- T Bunyapaiboonsri et al 2009, Một Hêmiacêtan mới có vòng kép và đơn, isariotin sE (1) và F (2), cùng với TK57164A (3) đã được phân lập từ nấm ký sinh côn trùng Isaria tenuipes BCC
2.4.2.4. Phương pháp bảo quản giống
Bảo quản nấm ký sinh côn trùng là điều rất quan trọng. Để bảo quản ngắn hạn có thể bảo quản ở nhiệt độ 50C đến - 200C, nếu có thể. Để bảo quản dài hạn, có thể bảo quản trong điều kiện 200C (môi trường nitơ lỏng). Các giống nấm phải được nhận dạng thích hợp.
Việc duy trì tính độc của các giống trong quá trình bảo quản là vô cùng quan trọng. Nấm có thể bị mất tính độc nếu cấy chuyền quá nhiều trên môi trường nhân tạo. Để tránh mất độc tính của nấm, chúng ta có thể sử dụng môi trường nuôi cấy từ hệ thống bảo quản vacxin hoặc chúng ta có thể phân lập lại EPF từ các côn trùng được lây nhiễm nhân tạo.
Mỗi loại EPF khác nhau có cách thức bảo quản khác nhau.
Việc bảo quản các bào tử vô tính nên tiến hành trong điều kiện lạnh và khô. - Phương pháp chuẩn bị môi trường thạch nghiêng (slope) để bảo quản mẫu nấm. Sử dụng ống nghiệm có thể tích 15 hoặc 30 ml có nắp nhựa hoặc không có nắp nhựa. Đối với ống nghiệm không có nắp nhựa, dùng bông sạch để làm nút.
Bước 1: Hấp tiệt trùng ống nghiệm, nút bông, nắp nhựa ở 1210C trong 20 phút. Chuẩn bị môi trường PDA.
Bước 2: Rót môi trường PDA (khi chưa bị đông đặc) vào các ống nghiệm với mức 5 ml (ống nghiệm 15 ml) và 10 ml (ống nghiệm 30 ml).
Bước 3: Đậy nút bông hoặc nắp nhựa (nắp nhựa không được vặn quá chặt), cho vào nồi hấp tiệt trùng ở 1210C trong 20 phút. (Chú ý để đứng ống nghiệm, tránh làm đổ môi trường ra ngoài).
Bước 4: Sau khi kết thúc chế độ là việc của nồi hấp tiệt trùng (ở nhiệt độ 700C), lấy các ống nghiệm ra ngoài để nằm nghiêng khoảng 450. Vặn chặt nắp nhựa, chờ môi trường nguội và đông đặc lại, ta được môi trường thạch nghiêng (slope).
Bước 5: Tiến hành cấy chuyển mẫu nấm vào các slope trong tủ hốt vô trùng. Bước 6: Để các slope đã cấy nấm trong các tủ nuôi ở nhiệt độ từ 22 đến 240C, theo dõi 2 - 3 ngày để phát hiện và loại bỏ các slope bị nhiễm vi khuẩn và nấm khác.
Các mẫu đạt yêu cầu chuyển sang bảo quản ở chế độ thích hợp.