- T Bunyapaiboonsri et al 2009, Một Hêmiacêtan mới có vòng kép và đơn, isariotin sE (1) và F (2), cùng với TK57164A (3) đã được phân lập từ nấm ký sinh côn trùng Isaria tenuipes BCC
3.1.1.Đặc điểm hình thái nấm ký sinh côn trùng Cordyceps sp1.
Cordyceps sp1. thuộc họ Clavicipitaceae và được tìm thấy trên mặt đất tại Vườn
Quốc gia Pù Mát ở độ cao gần 1000 m so với mực nước biển. Một phần của
Cordyceps sp1. nhô lên khỏi mặt đất khoảng 3 - 4 cm, đó chính là quả thể. Quả thể có
màu trắng, dài khoảng 107 mm. Ký chủ là ấu trùng của côn trùng thuộc Bộ cánh vảy (Lepidoptera), có màu nâu vàng, kích thước 45,65 x 6,04 mm (Hình 3.1).
Quả thể dạng chai (Perithecia) kích thước 241,2µm 1,9 µm; Tíu bào tử (Asci) 138,3 x14,85 µm; phần đầu Tipcaps 12,49 m x 8,55 µm. Bào tử túi (Ascospore) chiều dài 63,45 µm, đứt gãy tạo thành 64 pastpore. Past-spore kích thước 45 µm x 2,07 µm.
Trên môi trường PDA, sợi nấm sinh trưởng khá nhanh, đạt 15,18 m sau 2 tuần. Sợi nấm có màu trắng hoặc trắng sữa. Mặt sau có màu vàng nhạt và có thể quan sát thấy dạng hình sao. Bào tử vo tính (conidia) có dạng hình trụ, có kích thước 1 - 1,2 x 0,5 - 0,7 µm.
Cordyceps sp1. là loài nấm ký sinh côn trùng có phổ phân bố tương đối hẹp, chỉ
có thể tìm thấy ở những khu rừng nguyên sinh có độ cao trên 800 m so với mực nước biển.
Hình 3.1. a-b. Mẫu vật Cordyceps sp1.; c. Vật chủ sâu non bộ cánh vảy; d. Quả thể; e-f. Túi bào tử Ascus; g. Bào tử Pastpore; h. Bào tử vô tính Conidia; i-k. Khuẩn lạc nấm trên PDA mặt sau và trước
a b d h g e f i k c
3.1.2. Đặc điểm hình thái của Isaria javanica Luangsa-ard J.J.; Hywel-Jones N.L.; Manoch L.;Samson R.A. N.L.; Manoch L.;Samson R.A.
Nấm thuộc họ Clavicipitaceae,Giống: Isaria. Mẫu vật được tìm thấy phía sau mặt lá, trên cành cây hoặc trong tàn dư thực vật. Thu thập tại Khe Kèm - Pù Mát. Kích thước vật chủ có chiều dài 3,04-12,07mm, trung bình đạt 7,97mm và chiều rộng 1,50-5,32mm, trung bình đạt 3,26mm. Vật chủ được bao phủ một lớp nấm trắng, quan sát dưới kính hiển vi các cuống bào tử đính mọc thẳng đứng, phân nhánh.
Quan sát cấu trúc sinh bào tử cho thấy, thành khuẩn ty dinh dưỡng dày, trơn nhẵn, trong suốt, rộng 0,5-2,2 µm. Cuống bào tử đính dạng đơn, mọc thẳng đứng, sinh ra chủ yếu từ các khuẩn ty nằm phía trên, có chiều dài 50 µm và rộng 1,5-2,5µm. Chúng phân nhánh dưới dạng các vòng, không đều, mỗi vòng gồm 2 - 3 thể bình, khoảng cách giữa các lần phân nhánh biến động 27 - 45 µm. Thể bình có dạng hình trụ là chủ yếu, có kích thước với chiều dài 8 - 14µm và đường kính 2 - 2,8µm. Phía cổ thon lại mỏng và dài có chiều rộng khoảng 0,7-1,4µm.
Bào tử đính thường tạo thành dạng chuỗi dài đính trên các thể bình. Bào tử chủ yếu hình trụ, thỉnh thoảng hình thoi. Thành bào tử trơn nhẵn, trong suốt. Kích thước bào tử 4,5- 7,4 x 1,4-1,7µm. Không có bào tử vách dày. Khuẩn lạc trên môi trường PDA mọc tương đối nhanh đạt kích thước lớn nhất 22,35mm sau 8 ngày. Bào tử xuất hiện vào ngày thứ 6 sau nuôi cấy. Màu sắc khuẩn lạc thay đổi, ban đầu màu trắng sau đó chuyển sang màu kem khi thành thục. Mặt sau không màu đến màu vàng, xuất hiện vết nứt hình chân chim. Khi khuẩn lạc bắt đầu tàn lụi thì xuất hiện giọt dịch trên bề mặt.
Kiểu mọc của khuẩn lạc là tỏa tròn, hướng lên trên, dạng lông nhung mềm mượt màu trắng. Sau 4 ngày, khuẩn lạc bắt đầu phân chia thành 2 tầng rõ rệt, tầng trên dạng hình cầu. Đây là kết quả của sự nhô lên ở phần giữa của khuẩn lạc. Tầng trên tăng độ cao theo thời gian, sau đó xuất hiện bào tử dạng bột mịn màu trắng và dần chuyển sang màu nâu nhạt, cuối cùng màu kem. Sau 7 ngày, trên bề mặt khuẩn lạc bắt đầu xuất hiện các vết lõm. Các vết lõm này sâu và rộng dần, có dạng hình
xoáy trôn ốc. Mặt trong của vết lõm màu vàng nhạt. Sau 9 ngày, toàn bộ bề mặt khuẩn lạc bao phủ lớp bào tử dày đặc, màu kem, mịn, dạng bột.
Hình 3.2. a-b. Vật chủ; c-e. Cấu trúc sinh bào tử; f. Bào tử đính; g-i. Khuẩn lạc nấm trên PDA mặt trước và sau