Phương phỏp phổ khối lượng là phương phỏp khỏ hiện đại và quan trọng trong việc xỏc định một cỏch định tớnh và định lượng thành phần cũng như cấu trỳc của cỏc hợp chất hoỏ học. Ưu điểm nổi bật của phương phỏp này là cú độ nhạy cao, cho phộp xỏc định tương đối chớnh xỏc phõn tử khối của hợp chất.
Cơ sở của phương phỏp là sự bắn phỏ cỏc phõn tử hợp chất trung hoà bằng cỏc phõn tử mang năng lượng cao để biến chỳng thành cỏc ion phõn tử mang điện tớch dương hoặc phỏ vỡ thành cỏc mảnh ion, cỏc gốc. Tuỳ thuộc vào cấu tạo và tớnh chất của chất nghiờn cứu mà người ta chọn phương phỏp bắn phỏ và năng lượng bắn phỏ thớch hợp.
Hiện nay trong phương phỏp phổ khối người ta thường ỏp dụng cỏc phương phỏp ion hoỏ khỏc nhau như: ion hoỏ hoỏ học (CI), ion hoỏ bằng phương phỏp bụi electron (ESI), bắn phỏ bằng nguyờn tử tăng tốc (FAB), phun mự e dựng khớ trợ giỳp (PAESI)…Cỏc phương phỏp này đều cú những ưu, nhược điểm riờng. Tuy nhiờn, trong số cỏc phương phỏp trờn, phương phỏp bụi e là phự hợp nhất và được sử dụng để nghiờn cứu cỏc phức chất của kim loại. Ưu điểm của phương phỏp này là năng lượng ion hoỏ thấp do đú khụng phỏ vỡ hết cỏc liờn kết phối trớ giữa kim loại và phối tử. Phương phỏp ESI gồm 4 bước cơ bản như sau [33]:
+ Bước 1: Ion hoỏ mẫu trong dung dịch: bước này thực hiện sự chuyển đổi pH để tạo ra sự ion hoỏ trong dung dịch mẫu.
+ Bước 2: Phun mự: dựa trờn hai tỏc động là sức căng bề mặt và độ nhớt của dung mụi hoà tan mẫu để điều chỉnh ỏp suất phun dung dịch mẫu.
+ Bước 3: Khử dung mụi: Giai đoạn này phụ thuộc vào nhiệt bay hơi của dung mụi để cung cấp khớ khụ và núng cho phự hợp với sự bay hơi của dung mụi.
+ Bước 4: Tỏch ion ra khỏi dung dịch: ion được tỏch ra cú thể là một phõn tử chất nghiờn cứu liờn kết với H+ hay Na+, K+, NH4+….nếu chỳng cú mặt trong dung dịch hoặc cú thể là một ion chất khi mất đi một proton.
Dựa vào phổ khối lượng cú thể thu được cỏc thụng tin khỏc như: khối lượng phõn tử chất nghiờn cứu, cỏc mảnh ion phõn tử, tỉ lệ cỏc pic đồng vị. Từ cỏc thụng tin này cú thể xỏc định được cụng thức phõn tử của phức chất và cấu tạo của phức chất dựa vào việc giả thiết sơ đồ phõn mảnh.
Trong cỏc phức chất nghiờn cứu đều cú cỏc nguyờn tố cú nhiều đồng vị thỡ pic ion phõn tử sẽ tồn tại dưới dạng một cụm pic của cỏc đồng vị. Cường độ tương đối giữa cỏc pic trong cụm pic đồng vị cũng cho ta thụng tin để xỏc nhận thành phần phõn tử hợp chất nghiờn cứu. Muốn vậy người ta đưa ra cụng thức phõn tử giả định của hợp chất nghiờn cứu. Tớnh toỏn lý thuyết cường độ tương đối của cỏc pic đồng vị sau đú so sỏnh với cường độ của cỏc pic trong phổ thực nghiệm để suy ra sự tương quan tỷ lệ cỏc pic đồng vị theo thực tế và theo lý thuyết. Từ đú khẳng định cụng thức phõn tử phức chất giả định.
Việc tớnh toỏn lý thuyết được sử dụng bằng cỏch sử dụng phần mềm tớnh toỏn topeiso disstribution calculator: www.webelement.com hoặc http:/www.sisweb.com/ mstool/isotope.