Quá trình thực hiện nhân giống in vitro sẽ tạo ra các dòng vô tính, theo khái niệm chung về dòng vô tính trong chọn giống thì dòng vô tính là một nhóm cá thể có kiểu gen tương tự nhau, chúng ñược nhân bằng sinh sản vô tính, các dòng vô tính này sẽ ñược tạo ra theo các ñường hướng sau:
- Tái sinh cây trực tiếp từ ñỉnh sinh trưởng, phôi, ngọn chồi, chồi nách - Tái sinh cây gián tiếp thông qua giai ñoạn hình thành mô sẹo
• Tái sinh cây trực tiếp
Tái sinh trực tiếp từ mẫu nuôi cấy: Là quá trình phát ñộng những ñiểm tồn tại sẵn có trong mô nuôi cấy phân chia và tái sinh thành cây. Xét về nguồn gốc các cây này có thể phát sinh từ chồi ñỉnh, chồi nách phá ngủ hoặc từ chồi mới phát sinh [32]. Các cây con này ñược phát sinh từ các ñỉnh sinh trưởng có bộ nhiễm sắc thể 2n, hoàn toàn ñồng nhất về mặt di truyền và duy trì ñược các tính trạng của cây mẹ . Tái sinh trực tiếp cũng có thể xuất phát từ những tế bào không nằm trên ñỉnh sinh trưởng ñó là các ñoạn thân, mảnh lá, cuống lá, mảnh hoa….Trong trường hợp này, các tế bào thường phân chia nhưng không
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………16 hình thành các tế bào mô sẹo mà tạo thành các ñiểm sinh trưởng phụ sau ñó tái sinh thành cây con . Sác xuất biến dị và ñột biến thường cao hơn so với tái sinh từ ở trường hợp nói trên [29].
• Con ñường tái sinh gián tiếp
Mẫu cấy khi nuôi cấy trong môi trường thích hợp có chứa auxin và cytokinin có thể ñem lại sự gia tăng thành khối tế bào không tổ chức ñó chính là các tế bào mô sẹo. Trong nuôi cấy, sự tăng sinh này có thể ñược duy trì nhiều hay ít là không hạn ñịnh, chỉ cần mô sẹo ñược cấy chuyển sang môi trường mới theo chu kỳ. Tuy nhiên, tế bào mô sẹo khi cấy chuyển nhiều lần sẽ không ổn ñịnh về mặt di truyền. ðể tránh tình trạng này nên sử dụng các mô sẹo các loại mô sẹo vừa mới phát sinh. Nuôi cấy mô sẹo có vai trò vô cùng quan trọng trong công nghệ sinh học thực vật. Tỷ lệ auxin và cytokinin trong môi trường có thể dẫn tới sự phát triển của ngọn, rễ hay phôi soma từ ñó có thể tạo thành cây hoàn chỉnh [19] . Nuôi cấy mô sẹo cũng có thể ñược sử dụng ñể mở ñầu nuôi cấy tế bào dịch huyền phù hay tạo ra hạt nhân tạo [13].
ðể có thể thực hiện nuôi cấy có kết quả tốt, dù bằng con ñường nào ñi chăng nữa cũng cần chú ý tới các yếu tố ảnh hưởng tới nuôi cấy vì chính các yếu tố này quyết ñịnh ñường hướng vô tính cũng như chất lượng của cây giống thu ñược.