4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.3.3 Ảnh hưởng của tổ hợp BAP và IAA ñế n khả năng nhân nhanh cây d ưa chuột ñơn bội (sau 6 tuần)
Năm 1960 Murashige ñã ñề nghị sử dụng phối hợp auxin/cytokinin trong môi trường nuôi cấy cho ña số các loài cây trồng, ñến năm 1993 Rhojwani và Razda cũng khẳng ñịnh rằng: ñể kích thích tạo chồi thì auxin cũng có tác ñộng tích cực khi phối hợp với cytokinin ở nồng ñộ thích hợp thường 0,1 – 1,0ppm. Vì vậy, ñể xác ñịnh môi trường nhân nhanh chồi dưa chuột ñơn bội tốt nhất cho 2 giống nghiên cứu chúng tôi bố trí thí nghiệm trên môi trường MS có bổ sung 3% Sucrose; 5g agar/l ; 15% CW; nồng ñộ BAP từ
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………82 1- 3ppm phối hợp với IAA có nồng ñộ từ 0,1 – 0,3 ppm. Kết quả ñược trình bày ở bảng 4.24.
Bảng 4.24: Ảnh hưởng của tổ hợp BA và IAA ñến khả năng nhân nhanh cây dưa chuột ñơn bội (sau 6 tuần)
Chiều cao (cm) Hệ số nhân (lần) Số lá/chồi Chất lượng chồi CTTN
Marinda Valaspik Marinda Valaspik Marinda Valaspik Marinda Valaspik
ðC 6,09f 5,64 f 1,19 a 1,18 a 4,62 4,82 +++ +++ 1,0 BAP + 0,1 IAA 5,81 e 4,36 e 2,81 e 2,50 cd 4,35 4,64 +++ +++ 1,0 BAP + 0,2 IAA 5,34 d 4,22 e 3,25 f 3,11 f 4,17 4,28 +++ +++ 1,0 BAP + 0,3 IAA 4,81 c 3,94 d 2,72 d 2,73 d 3,94 3,87 +++ +++ 2,0 BAP + 0,1 IAA 3,91 b 3,77 d 3,64 g 3,28 f 3,76 3,58 +++ +++ 2,0 BAP + 0,2 IAA 3,78 ab 3,56 c 3,19 f 2,85 e 3,53 3,36 +++ +++ 2,0 BAP + 0,3 IAA 3,46 a 3,45 c 2,78 de 2,59 d 3,41 3,17 ++ ++ 3,0 BAP + 0,1 IAA 3,90 b 3,26 bc 2,64 d 2,33 c 3,24 3,04 ++ ++ 3,0 BAP + 0,2 IAA 3,83 b 3,12 b 2,11 c 1,98 b 3,10 2,86 ++ ++ 3,0 BAP + 0,3 IAA 3,57 ab 2,84 a 1,89 b 1,93 b 2,81 2,64 + + CV% 4,1 4,1 3,6 4,0
Ghi chú: (+): Chồi nhỏ, thân mọng nước, sinh trưỏng phát triển kém.
(++): Chồi nhỏ, lá xanh nhạt, thân lá phát triển cân ñối
(+++): Chồi mập, lá xanh, thân lá phát triển cân ñối
Hệ số nhân chồi là một chỉ tiêu quan trọng và rất ñược chú ý trong các thí nghiệm nhân giống in vitro. Qua số liệu ở bảng 4.24 chúng tôi nhận thấy: khi bổ sung nồng ñộ BAP và IAA càng tăng vào môi trường nuôi cấy thì hệ số
nhân chồi tăng nhưng khi nồng ñộ BAP và IAA quá cao thì thệ số nhân chồi và chất lượng chồi giảm. Cụ thể như sau:
- Trong tổ hợp với 1ppm BAP, khi tăng nồng ñộ IAA từ 0,1ppm ñến 0,3 ppm thì hệ số nhân chồi của cả 2 giống có xu hướng tăng từ công thức 1,0ppm BAP + 0,1ppm IAA ñến 1,0ppm BAP + 0,2ppm IAA, sau ñó tiếp tục
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………83 tăng nồng ñộ IAA trong tổ hợp với 1,0 BAP thì cả hệ số nhân và chất lượng chồi ñều giảm.
- Trong tổ hợp với 2,0 và 3,0ppm BAP, khi nồng ñộ càng tăng IAA thì hệ số nhân chồi và trạng thái sinh trưởng của chồi càng giảm. Hệ số nhân chồi cao nhất ở công thức có bổ sung 2,0ppm BAP và 0,1ppm IAA ñạt 3,64 lần (marinda) và 3,28 lần (valaspik). ðặc biệt, từ công thức 6 bắt ñầu xuất hiện nhiều chồi nhỏ, yếu, lá nhỏ, chồi không phát triển hoàn chỉnh, không sử dụng
ñược cho giai ñoạn nuôi cấy tiếp theo.
Bên cạnh chỉ tiêu về hệ số nhân chồi, các chỉ tiêu về chất lượng chồi cũng rất ñược quan tâm vì mục tiêu của công tác nhân giống là có ñược hệ số
nhân chồi cao nhưng chồi phải có chất lượng tốt.
- Trong các công thức có bổ sung phối hợp 1- 3ppm BAP và 0,1- 0,3ppm IAA vào môi trường nuôi cấy, sự sinh trưởng phát triển của chồi giảm dần thể
hiện sự tăng trưởng chiều cao giảm từ 5,81 - 3,46 cm (Marinda) và 4,36 - 2,84 cm (Valaspik), ñồng thời số lá trung bình/chồi giảm từ 4,35 - 2,81 lá (Marinda) và 4,64 - 2,64 lá (Valaspik). Trong khi ñó ở công thức ñối chứng chiều cao ñạt 6,09cm (Marinda) và 5,64cm (Valaspik) và số lá trung bình/chồi ñạt 4,62 lá (Marinda) và 4,82 lá (Valaspik). Sở dĩ khi bổ sung tổ hợp chất ñiều tiết sinh trưởng vào môi trường ñã làm giảm sự sinh trưởng phát triển chồi có thể là do tổ
hợp ñã có tác dụng kích thích phát sinh nhiều chồi nên làm giảm sự tăng trưởng chiều cao và số lá. Do vậy, khi bổ sung tổ hợp BAP + IAA càng tăng làm tăng hệ số nhân chồi nhưng làm giảm chiều cao và số lá trung bình/chồi (bảng 4.24).
Kết luận: ðối với cả 2 giống nghiên cứu việc bổ sung tổ hợp BAP + IAA vào môi trường nhân chồi là rất cần thiết và tổ hợp thích hợp nhất là 2,0ppm BAP + 0,1 ppm IAA, ở tổ hợp này cho hệ số nhân chồi ñạt 3,64 lần (Marinda) và 3,28 lần (Valaspik), trạng thái chồi ñược ñánh giá tốt.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………84