3. VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.4.5. Phương pháp lây nhiễm PRSV bằng tiếp xúc cơ học
* Giá thể gieo cây thắ nghiệm:
đất gieo trồng cây thắ nghiệm ựược ủ trong formol 5 ngày ựể tiêu diệt các nguồn bệnh có trong ựất thắ nghiệm, có che phủ nilông, sau ựó bỏ nilông ra cho ựất thoáng, sau 2 ngày có thể sử dụng. đất sau khi ủ trong formol ựược bổ sung phân bón vi sinh và vỏ trấu hun trước khi gieo cây thắ nghiệm.
* Cây lây: Cây ựu ựủ khi cây có 2 -3 lá thật (khoảng 1 tháng sau gieo), cây bầu bắ gia ựoạn lá mầm ựã hình thành 2-3 lá thật(khoảng 1 tuần sau gieo)
* Cách lây:
- Thắ nghiệm ựược tiến hành vào buổi chiều, cây ựu ựủ, bầu bắ ựược ựể trong bóng tối một ngày trước khi lây nhiễm.
- Chọn lá bệnh có triệu chứng ựiển hình (lá bánh tẻ), nghiền mẫu lá bệnh trong dung dịch ựệm phosphate 0.01M, pH 7, với tỷ lệ 1 g lá bệnh/5 ml dung dịch ựệm bằng chày cối sứ ựã ựược khử trùng. Dung dịch ựệm, chày cối sứ ựều ựược ựể lạnh trong suốt quá trình làm thắ nghiệm. Sau ựó, thêm vào bột carborandum 600 Mesh vào hỗn hợp dịch nghiền.
- Dùng tăm bông chấm vào dịch hỗn hợp có chứa virus trên rồi sát nhẹ lên lá cây theo chiều từ cuống lá ựến chóp lá. Sau thời gian lây nhiễm 30 phút, dùng bình xịt có chứa nước cất rửa dịch chiết và bột carborandum 600 Mesh bám trên bề mặt lá ựể thuận lợi cho việc quan sát triệu chứng bệnh sau này ựược rõ ràng.
- Cây thắ nghiệm ựặt trong nhà lưới chống côn trùng, thực hiện chăm sóc cây và theo dõi triệu chứng biểu hiện bệnh của cây lây nhiễm. Ghi chép, quan sát mô tả và ựánh giá kết quả các chỉ tiêu theo dõi.