* Rau mầm trồng từ hạt cải củ trắng:
Công thức Thời gian thu hoạch
CC1 1 ngày sau khi gieo CC2 2 ngày sau khi gieo CC3 3 ngày sau khi gieo CC4 4 ngày sau khi gieo CC5 5 ngày sau khi gieo CC6 6 ngày sau khi gieo CC7 7 ngày sau khi gieo CC8 8 ngày sau khi gieo CC9 9 ngày sau khi gieo
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 39
* Rau mầm trồng từ hạt cải bẹ vàng:
Công thức Thời gian thu hoạch
CBE1 1 ngày sau khi gieo CBE2 2 ngày sau khi gieo CBE3 3 ngày sau khi gieo CBE4 4 ngày sau khi gieo CBE5 5 ngày sau khi gieo CBE6 6 ngày sau khi gieo CBE7 7 ngày sau khi gieo CBE8 8 ngày sau khi gieo CBE9 9 ngày sau khi gieo * Rau mầm trồng từ hạt cải xanh:
Công thức Thời gian thu hoạch
CX1 1 ngày sau khi gieo CX2 2 ngày sau khi gieo CX3 3 ngày sau khi gieo CX4 4 ngày sau khi gieo CX5 5 ngày sau khi gieo CX6 6 ngày sau khi gieo CX7 7 ngày sau khi gieo CX8 8 ngày sau khi gieo CX9 9 ngày sau khi gieo
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 40
* Rau mầm trồng từ hạt cải bắp trắng:
Công thức Thời gian thu hoạch
CBA1 1 ngày sau khi gieo CBA2 2 ngày sau khi gieo CBA3 3 ngày sau khi gieo CBA4 4 ngày sau khi gieo CBA5 5 ngày sau khi gieo CBA6 6 ngày sau khi gieo CBA7 7 ngày sau khi gieo CBA8 8 ngày sau khi gieo CBA9 9 ngày sau khi gieo * Rau mầm trồng từ hạt cải chắp:
Công thức Thời gian thu hoạch
CCH1 1 ngày sau khi gieo CCH2 2 ngày sau khi gieo CCH3 3 ngày sau khi gieo CCH4 4 ngày sau khi gieo CCH5 5 ngày sau khi gieo CCH6 6 ngày sau khi gieo CCH7 7 ngày sau khi gieo CCH8 8 ngày sau khi gieo CCH9 9 ngày sau khi gieo
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 41
* Rau mầm trồng từ hạt cải ngọt:
Công thức Thời gian thu hoạch
CN1 1 ngày sau khi gieo CN2 2 ngày sau khi gieo CN3 3 ngày sau khi gieo CN4 4 ngày sau khi gieo CN5 5 ngày sau khi gieo CN6 6 ngày sau khi gieo CN7 7 ngày sau khi gieo CN8 8 ngày sau khi gieo CN9 9 ngày sau khi gieo
3.3.3. Phương pháp nghiên cứu
3.3.3.1. Xác ựịnh hàm lượng glucosinolate trong rau mầm họ cải bằng phương pháp của J.Jezek [17]
* Tiến hành:
- Chiết xuất glucosinolate từ mẫu rau mầm họ cải:
Nghiền mẫu rau (500mg) cho vào dung dịch ựệm acetat (pH = 4,2; 0,2 M; 7,5 ml). Sau ựó hỗn hợp giữ ở bếp cách thuỷ sôi 15 phút. Tiếp ựó ựể lạnh 5 phút, toàn bộ dịch chiết trộn với dung dịch gồm chì axetat (0,5M; 1,5 ml) và polyvinylpolypyrrolidone (0,4g). Hỗn hợp ựược ủ và khuấy 15 phút trước khi cho Na2SO4 (2M; 1,5ml) và ly tâm 14000 vòng/phút trong 5 phút.
- Xử lắ kiềm và phản ứng với ferricyanide:
Lấy 2 ml dịch mẫu trộn với 2 ml NaOH 2M ựể trong vòng 30 phút. Sau ựó cho 0,3ml HCl ựậm ựặc vào hỗn hợp. Hỗn hợp ựem ly tâm 14000 vòng/phút trong 3 phút. Dịch trong thu ựược (lấy 2 ml) ựem trộn với 2 ml Kali ferricyanide 2mM ựược chuẩn bị trong dung dịch ựệm photphat (pH = 7; 0,2M). đo ựộ hấp thụ quang học ở bước sóng 420 nm ựối với dung dịch ựệm photphat.
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 42
* Tắnh toán:
Sinigrin ựược dùng làm chất chuẩn trong phương pháp này. Hàm lượng glucosinolate ựược xác ựịnh dựa trên ựường chuẩn mô tả mối quan hệ giữa nồng ựộ sinigrin và ựộ hấp thụ quang ở bước sóng A = 420nm và ựược tắnh bằng ộmol sinigrin/g chất khô.
Hình 3.2: đường chuẩn sinigrin
3.3.3.2. Xác ựịnh hàm lượng vitamin C trong rau mầm họ cải bằng phương pháp chuẩn ựộ Iốt [2] (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
* Tiến hành:
Cho 5 gam mẫu rau và 1 ắt HCl 2 % vào cối sứ nghiền. Tách dịch trong, lặp lại 3 ựến 4 lần.
Dùng 10 ml HCl tráng cối chày sứ có cả bã sang bình ựịnh mức 50 ml, dùng nước cất lên thể tắch ựến vạch. đặt bình trong bóng tối 10 phút sau ựó lọc lấy dịch trong. y = -0.0003x + 0.6596 Rỗ = 0.9916 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0 200 400 600 800 1000 1200 A 5 7 0 n m Nồng ựộ sinigrin (ộmol/l) đường chuẩn sinigrin
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 43
Lấy 10 ml dịch trong cho vào bình tam giác. Thêm 10 giọt tinh bột 0,5 %, lắc nhẹ. Dùng Iốt 0,01 N chuẩn ựộ ựến khi xuất hiện màu xanh lam nhạt.
* Tắnh toán:
Hàm lượng vitamin C trong rau ựược tắnh theo công thức sau (mg/100g chất tươi):
a ừ V ừ 0,00088 ừ 1000 ừ 100 X=
v ừ c Trong ựó:
X: hàm lượng vitamin C có trong rau (mg/100g chất tươi) a: số ml I2 0,01 N dùng chuẩn ựộ (ml)
v: số ml dung dịch mẫu ựem phân tắch (ml) V: thể tắch toàn bộ dịch chiết (ml)
c: khối lượng mẫu rau ựem phân tắch (gam)
0,00088 là số gam vitamin C tương ựương với 1 ml I2 0,01 N
3.3.3.3. Xác ựịnh khả năng kháng ôxy hóa trong rau mầm họ cải bằng phương pháp DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) [28]
* Nguyên tắc:
DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) là gốc tự do có màu tắm có ựộ hấp thụ quang cực ựại là Amax =517. Khi cho dung dịch chất có khả năng kháng ôxy hóa vào dung dịch DPPH thì các gốc tự do bị khử và mất màu tắm. Dựa vào khả năng làm mất màu tắm gốc tự do DPPH của dịch chiết từ rau mầm họ cải ta xác ựịnh ựược khả năng kháng ôxy hóa của dịch chiết từ rau mầm họ cải.
* Tiến hành:
+ 150ộl dịch chiết ựã pha loãng ựến nồng ựộ thắch hợp + 3850ộl DPPH 1ộmol/lit
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 44
+ Vortex cho dung dịch ựồng nhất trong ống nghiệm, ựặt ống nghiệm ở ựiều kiện 250C trong 30 phút rồi ựem ựo ựộ hấp thụ quang tại bước sóng 517nm, dựa vào ựường chuẩn trolox ta xác ựịnh ựược khả năng kháng ôxy hóa của dịch chiết từ rau mầm.
* Tắnh toán:
% kìm hãm ựược xác ựịnh theo công thức: %kìm hãm = (ODcontrol - ODmẫu) / ODcontrol
Trong ựó:
ODcontrol: ựộ hấp thụ quang của mẫu control ODmẫu: ựộ hấp thụ quang của mẫu cần xác ựịnh
Trolox ựược dùng làm chất chuẩn trong test này, khả năng kháng ôxy hoá ựược xác ựịnh dựa trên ựường chuẩn mô tả mối quan hệ giữa nồng ựộ trolox và % kìm hãm và ựược tắnh bằng ộmol TE/g CK (TE Ờ Trolox Equivalent)
y = 0.060x + 7.287 Rỗ = 0.990 0 10 20 30 40 50 60 70 80 0 200 400 600 800 1000 % k ìm h ã m
đường chuẩn Trolox
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 45