II. Tổng quan tài liệu nghiên cứu
3.4.3.Các chỉ tiêu sinh hóa máu
Trong thực tập và nghiên cứu, chúng tôi đt sử dụng máy phân tích các chỉ tiêu sinh hóa tại Cụng ty TNHH cụng nghệ và xột nghiệm y học Medlatec.
Xác định hàm l−ợng prơtein tổng số và tiểu phần protein huyết thanh bằng cách lấy huyết thanh rồi chạy bằng máy phân tích tại Cụng ty TNHH cụng nghệ và xột nghiệm y học Medlatec.
Đơn vị là :g/1.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghiệp…………44 * Xác định hoạt độ enzyme GOT và GPT (theo ph−ơng pháp IFCC) trong máy phân tích tại Cụng ty TNHH cụng nghệ và xột nghiệm y học Medlatec.
+ Nguyên lý: Dựa theo phản ứng: GOT
α-Oxglutarate + L-aspartate L-Glutamate + Oxaloacetate MDH
Oxaloacetate + NADH + H+ L-malate + NAD+
+ Dụng cụ và hóa chất: Điều kiện thí nghiệm (factors) sử dụng ở 370C; Loại thuốc thử MPR1 (30x2ml); Đo mật độ quang ở chiều dài sóng: Hg 365mm; ống đo 1cm, nhiệt độ 370C, đo ng−ợc ánh sáng; Quang kế 4010.
+ Cách tiến hành: Lấy 0,2ml huyết thanh + 2ml thuốc thử MPR1 ở nhiệt độ 370C, lắc đều rồi cho vào máy đọc quang kế 4010, đọc trong l phút, đọc 3 lần, lấy kết quả cuối cùng.
+ Tính kết quả: Hoạt độ GOT trong huyết thanh đ−ợc tính theo công thức sau: U/L = 1746 x ∆∆340mm/phút.
Nồng độ thuốc thử ban đầu: TRIS: 88 mmol/1; pH = 7,8; L-aspartate: 246 mmol/1; MDH : 0,64 U/ml ; LDH = 0,66 U/ml ; NADH = 0,18 mmol/1; a- Oxơglutarate = 12mmol/1.
* Xác định hoạt độ enzyme GPT
+ Nguyên lý phản ứng:
GPT
α-Oxglutarate + L-aspartate L-Glutamate + Pyruvat LDH
Pyruvat + NADH + H+ Lactate + NAD+
+ Dụng cụ và hóa chất, cách tiến hành, tính kết quả nh− xác định hoạt độ enzyme GOT.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghiệp…………45 Nồng độ thuốc thử ban đầu: TRIS = 110mmol/1; pH = 7,3 ; L-Alanine = 550mmol/1; LDH = 1,3 U/ml; NADH = 0,198mmol/1; α-Oxoglutarale =16,5mmol/1