3.3.2.1. K iểm tra mật ñộ vi khuẩn tổng số[31]
Cân 10g mẫu vào bình tam giác dung tích 250ml có chứa 90ml nước cất
ñã khử trùng. Lắc trên máy lắc 150 vòng/phút trong 30 phút, thu ñược dịch pha loãng có nồng ñộ là 10-1. Sau ñó, hút 1ml dịch trong bình pha loãng nồng
ñộ 10-1 sang ống nước cất 9ml ñã khử trùng, ñược nồng ñộ pha loãng 10-2. Tiếp tục pha loãng như trên, ñược nồng ñộ pha loãng 10-3, 10-4…, ñến nồng
ñộ pha loãng cần thiết. Hút 0,05ml dịch ñã pha loãng nhỏ vào các hộp petri chứa môi trường thạch thịt-pepton. Dùng que trang thuỷ tinh (ñã vô trùng),
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………35
trang ñều lên mặt môi trường trong hộp petri. Sau khi trang xong dùng giấy gói lại và chuyển các hộp petri chứa vi sinh vật vào tủ ấm và nuôi cấy ở ñiều kiện nhiệt ñộ thích hợp. Sau khoảng từ 2- 4 ngày nuôi cấy, lấy mẫu ra quan sát và ñếm số khuẩn lạc mọc trên các hộp petri. Số lượng khuẩn lạc ñược tính bằng công thức: N = ) 1 , 0 (n1 n2 d C + ∑ Trong ñó:
N: là số vi sinh vật trong một ñơn vị kiểm tra (CFU/g (ml));
∑C: là tổng số khuẩn lạc ñếm ñược trên tất cả các ñĩa Petri ñược giữ
lại;
n1: là sốñĩa ñược giữ lại ởñộ pha loãng thứ nhất; n2: là sốñĩa ñược giữ lại ởñộ pha loãng thứ hai;
d : là hệ số pha loãng tương ứng với ñộ pha loãng thứ nhất.
3.3.2.2. K iểm tra mật ñộ nấm men [34]
Kiểm tra trên môi trường Hansen với nguồn cung cấp năng lượng là tinh bột, các bước tiến hành tương tự theo phương pháp 3.3.2.1.
3.3.2.3. K iểm tra mật ñộ xạ khuẩn [34]
Kiểm tra trên môi trường Gause với nguồn cacbon là CMC, các bước tiến hành tương tự theo phương pháp 3.3.2.1.
3.3.2.4. Kiểm tra mật ñộ chủng B17 [34]
Kiểm tra trên môi trường Piko với nguồn photpho hữu cơ là lexitin, các bước tiến hành tương tự theo phương pháp 3.3.2.1.
3.3.2.5. Kiểm tra mật ñộ chủng CT6 [34]
Kiểm tra trên môi trường King B với nguồn protein là casein, các bước tiến hành tương tự theo phương pháp 3.3.2.1
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………36
3.3.2.6. Kiểm tra mật ñộ Salmonella [34]
Kiểm tra trên môi trường SS, các bước tiến hành tương tự theo phương pháp 3.3.2.1.
3.3.2.7. Kiểm tra mật ñộ E.coli [34]
Kiểm tra trên môi trường Maconkey, các bước tiến hành tương tự theo phương pháp 3.3.2.1.
3.3.2.8. Xác ñịnh trứng giun [19a]
Lấy 100g mẫu ñã chuẩn bị cho vào ống nghiệm (chiếm khoảng 2/3
ống). ðổ ñầy dung dịch NaOH 0, 5% cho ñầy ống dùng que khuấy trộn ñều khoảng 30 phút.
ðem li tâm ống nghiệm với tốc ñộ 1000-1500 vòng/phút. Lấy ống nghiệm ra, ñổ bỏ lớp nước bên trên. ðổ dung dịch NaNO3 bão hoà vào trong (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
ống nghiệm tiếp tục dùng que khuấy kỹ trong 10 phút, ñem ly tâm với tốc ñộ
1000 vòng/phút trong 5 phút.
Lấy ống nghiệm ñã ly tâm ra. ðổ dung dịch NaNO3 bão hoà cho ñầy
ống nghiệm ñến khi mặt nước hơi vồng lên miệng ống. ðậy lam kính lên miệng ống, ñặt trong 20 phút.
Nhấc lam kính ra khỏi miệng ống sao cho có một giọt trên lam kính. Nhỏ 1 giọt Glyxerin 50% phủ lên giọt mẫu ñó trên lam kính.
ðem soi trên kính hiển vi, phát hiện trứng giun ở vật kính 10x, quan sát chi tiết ở vật kính 40x.
ðếm số trứng giun trong tiêu bản dựa vào ñặc ñiểm hình thái ñặc trưng của trứng giun, sán. Kết quả thu ñược là số trứng giun có trong 100g mẫu.
Xác ñịnh chất lượng trứng giun, sán còn tốt hay ñã hỏng bằng cách nhuộm màu xanh metylen, nếu bắt màu hoàn toàn là trứng ñã hỏng.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………37