D- TÍNH KẾT QUẢ Chất rắn tổng cộng (mg/l) = ( )
B- DỤNG CỤ, THIẾT BỊ VÀ HÓA CHẤT Dụng cụ và thiết bị
3.10. Xác định nitrogen – nitrate
Nitrate là sản phẩm của giai đoạn ôxy hoá cao nhất trong chu trình của nitơ, đồng thời cũng là giai đoạn cuối cùng trong tiến trình ôxy sinh học các hợp chất hữu cơ có chứa nitơ.
A- NGUYÊN TẮC
Phản ứng giữa nitrate và brucine cho sản phẩm có màu vàng được áp dụng để xác định hàm lượng nitrate bằng phương pháp so màu. Cường độ màu đươc đo ở bước song λ= 410nm. Tốc độ phản ứng giữa nitrat và brucune chịu ảnh hưởng rõ rệt vào lượng nhiệt tỏa ra trong quá trình phản ứng. Vì thế các chất phản ứng được thêm vào lần lượt và ủ ở một khoảng thời gian ở nhiệt độ xác định. Nồng độ acid và thời gian phản ứng được lựa chọn để tạo màu tốt nhất và ổn định.Phương pháp này thích hợp với cả nước ngọt và nước biển, với hàm lượng N-NO3 xấp xỉ 0.1-2ml/l
B- DỤNG CỤ, THIẾT BỊ VÀ HÓA CHẤTDụng cụ và thiết bị Dụng cụ và thiết bị • Ống nghiệm 25ml đã đánh số từ 1-5 và 7 ống khác; • Pipet 1ml , 2ml ,10ml , 25ml • Hộp giấy kín hoặc tủ kín • Spectrophotometer Hóa chất
Hòa tan 0.721g anhydrous potassium nitrate KNO3 trong một lít nước cất. Lấy 50ml dung dịch này pha loãng với nước cất thành 500ml.
+ Dung dịch brucine-sulfunilic: cân 1g brucine sulfate + 0.1g sulfaanilic acid trong 70ml nước vất nóng, thêm 3ml HCl đậm đặc , làm lạnh và pha loãng thánh 100ml. Giữ trong chai đậm màu ở 50C. Dung dịch này có màu hồng nhưng ảnh hưởng đến kết quả phân tích và có thể dùng trong vài tháng.
+ Dung dịch H2SO4 đậm đặc
+ Dung dịch sodium arsenite (NaAsO2): hòa tan 5g NaAsO2 với 1 nước cất + Dung dịch sodium chloride: hòa tan 300g NaCl với 1 lít nước cất.
C- CÁCH TIẾN HÀNH
+ Chuẩn bị dung dịch tham chiếu như sau:
STT(ống nghiệm) 1 2 3 4 5 6
ml dd N-NO3 chuẩn 1 2 3 4 5 6
ml nước cất 9 8 7 6 5 4
C (µg) 2 4 6 8 10 12
C (mg/l) 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
+ Trong loạt ống nghiệm khác, cẩn thận lấy 4ml H2SO4 dd vào từng ống.
+ Thật chính xác, trích 1ml dd tham chiếu cũng nhưmẫu vào từng ống nghiệm theo đúng thứ tự ống. STT 0 1 2 3 4 5 6 7 ml dd tham chiếu 0 1 1 1 1 1 1 - ml nước cất 2 1 1 1 1 1 1 1 ml mẫu nước - - - 1 Dung dịch brucine 0.5 ml/ống
H2SO4 Rót nhanh 4ml dd acid đã chuẩn bị vào mỗi ống đựng dd N-NO3 chuẩn và mẫu lắc đều từng ống.
+ Lắc đều. Đặt tất cả vào tủ kín hoặc hộp giấy trong bong tối, đợi 10 phút.
+ Trong thời gian dợi phản ứng hoàn tất, hút sẵn 5ml nước vào từng ống nghiệm đã dùng H2SO4 trước đó.
+ Sau 10 phút rót nhanh 5ml nước cất vào từng ống nghiệm lắc đều, tiếp tục để trong tối thêm 20 phút nữa cho phản ứng hoàn toàn.
+ Đo độ hấp thu ở λ= 410nm (Nếu mẫu có chlorine, khử lượng chlorine này bằng cách thêm 1 giọt sodium arsenite cho mỗi 0.1 mg Cl trên 50ml mẫu)
D- TÍNH KẾT QUẢ
Từ loạt đo độ hấp thu. Vẽ giản đồ biểu diễn tương quan giữa độ hấp thu với hàm lượng Nitrate
Từ độ hấp thu của mẫu, đối chiếu trên đồ thị xác định hàm lượng Nitrate trong mẫu. Nếu màu của mẫu vượt quá đường cong tham chiếu, làm lại với một thể tích mẫu thích hợp và pha loãng đến nồng độ thích hợp.