và ph−ơng pháp nghiên cứu
3.4.3.2. Ph−ơng pháp xác định số loại và số l−ợng vi khuẩn
- Các đĩa thạch th−ờng sau khi đã ria cấy vi khuẩn, bồi d−ỡng trong tủ ấm 370C/24 giờ, xác định loại vi khuẩn qua khuẩn lạc.
+ Staphylococcus: khuẩn lạc dạng S, rìa gọn, tròn, mặt lồi, láng bóng có màu vàng rơm (nếu là Staphylococcus aureus).
+ Streptococcus: khuẩn lạc dạng S, nhỏ, mầu hơi xám, bóng.
+ Salmonella: khuẩn lạc dạng S, hoặc dạng R, tròn, sáng hoặc xám,
nhẵn bóng, hơi lồi lên ở giữa.
+ E.coli: khuẩn lạc dạng S, hoặc dạng R, tròn, −ớt, trắng nhạt, hơi lồi.
- Mỗi loại khuẩn lạc xác định đ−ợc nhuộm gram để xem lại.
+ Staphylococcus: bắt màu Gram (+), hình cầu, tụ lại hình chùm nho. + Streptococcus: bắt màu Gram (+), có hình cầu hoặc hình trứng. + E.coli: bắt màu Gram (-), là trực khuẩn hình gậy.
+ Salmonella: bắt mầu Gram (-), là trực khuẩn hình gậy ngắn.
- Khuẩn lạc đã tách thuần khiết đ−ợc cấy vào các môi tr−ờng phân lập.
gây bệnh thì môi tr−ờng biến thành màu vàng, không gây bệnh thì môi tr−ờng giữ nguyên màu đỏ.
+ Môi tr−ờng Edwasds: Streptococcus khuẩn lạc nhỏ, mặt hơi lồi, −ớt, mịn, rìa gọn.
+ Môi tr−ờng Brilliant: E.coli làm môi tr−ờng biến màu vàng chanh.
Salmonella làm môi tr−ờng có màu đỏ.
Toàn bộ quy trình xác định số l−ợng, số loại, phân lập vi khuẩn có trong dịch tử cung bò và kiểm tra kháng sinh đồ đ−ợc tiến hành theo sơ đồ (Phạm Kim Anh, 1991 [2]; Nguyễn Vĩnh Ph−ớc, 1974 [17]; Nguyễn Vĩnh Ph−ớc và cộng sự, 1978 [18]; Nguyễn Văn Quỳnh, 1991 [22]; Nguyễn Phú Quý và cộng sự, 1991 [23]):
Sơ đồ Bố TRí THí NGHIệM
Mẫu dịch
Pha loãng
Môi tr−ờng thạch th−ờng: quan sát hình thái, màu sắc, kích th−ớc, đếm tổng số các loại khuẩn lạc Đếm số khuẩn lạc Môi tr−ờng chuyên dụng cho Gram (+)
Nuôi cấy trên n−ớc thịt Nuôi cấy trên
n−ớc thịt
Môi tr−ờng chuyên dụng cho Gram (-)
Giữ trên thạch máu
Tính chất sinh học
Phác đồ điều trị
Nuôi cấy trên n−ớc thịt