3.1. Tiến hănh thí nghiệm lín men acetic
- Cho văo dụng cụ thuỷ tinh có miệng rộng, thể tích 100ml. + 30 - 40 ml bia.
+ 0,5ml rượu ítylic (chất giău năng lượng). + 3 - 5ml axit axític 1N để axit hoâ môi trường.
- Để dụng cụ năy ngoăi không khí văi giờ rồi đậy bằng vải măn mỏng, cho văo tủ ấm 25 - 300C.
- Sau 2 - 3 ngăy trín miệng dụng cụ sẽ thấy xuất hiện 1 lớp vâng vi khuẩn axític trín bề mặt môi trường.
3.2. Xâc định câc đặc trưng của quâ trình lín men axític
a. Xâc định thănh phần loăi vi sinh vật tham gia
- Lăm tiíu bản để quan sât vi khuẩn acetic từ lớp măng trắng của dấm. - Tiến hănh nhuộm đơn tiíu bản bằng xanh mítylen hoặc Fuchsin, Lugol.
- Quan sât tiíu bản bằng vật kính dầu (x 100).
b. Câc phản ứng định tính axit axític:
* Nguyín tắc:
Dựa văo những phản ứng đặc trưng của axit axític với câc chất khâc nhau
để xâc định sự có mặt của axit năy trong quâ trình lín men. * Câch tiến hănh:
- Phản ứng tạo thănh ítyl axítat: + Cho văo ống nghiệm câc chất sau:
5 ml dịch lín men. 0,5 ml rượu ítylic 96%. 3 ml H2SO4đậm đặc.
+ Đun nóng ống nghiệm trín đỉn cồn vă thấy mùi thơm bay ra do ítyl axítat tạo thănh. Điều năy chứng tỏ trong thănh phần dịch lín men có axit axític.
- Phản ứng tạo thănh sắt axítat: + Cho văo ống nghiệm câc chất sau:
3 ml dịch lín men 1 ml NaOH 20%
Văi giọt dung dịch FeCl3 5%
+ Lắc đều ống nghiệm vă đun nóng trín ngọn đỉn cồn. Nếu dung dịch có axit axític thì sẽ có mău đỏ thẫm do sắt axítat được tạo thănh.
c. Phản ứng định lượng axit axític
+ Cho văo bình tam giâc có thể tích 100 ml
10 ml dịch lín men
1 - 2 giọt dung dịch phínolphtalíin 0,1% + Chuẩn độ bằng dung dịch NaOH 0,1N
+ Tính số gam axit axític trong 10 ml dịch lín men (Biết rằng 1ml NaOH 0,1N tương đương với 0,006g axit axític).