T ủa dịch chiết enzym vừa thu được bằng cồn 960 theo tỉ lệ 1:3 (thể tích dịch chiết enzym/ thể tích cồn 960, giữ lạnh trong 15 phút, sau đó li tâm hỗn hợp trên hu nhận chế phẩm enzym lắng ởđáy ống l
3.10.1. Khảo sát giá trị pH thích hợp cho hoạt động của enzym
Thí nghiệm nhằm xác định pH tối ưu cho hoạt động của enzym. Tiến hành nuôi cấy các chủng vi khuẩn ởđiều kiện nuôi cấy tối ưu nhưđã xác định ở trên.
Quá trình tách chiết enzym được thực hiện theo mục 2.3.4, sử dụng dung dịch enzym sau tách chiết như dịch enzym thô.
Các phản ứng enzym được tiến hành ởđiều kiện: - Nhiệt độ 370 C
- Nồng độ cơ chất: 1%
- Thời gian phản ứng: 60 phút
Tiến hành khảo sát ảnh hưởng pH đối với hoạt độ pectinase theo mục 2.3.9.1. Kết quảđược trình bày
ở bảng 3.19 và đồ thị 3.8
Bảng 3.20: Sự biến thiên hoạt độ pectinase của hai chủng Bacillus theo giá trị pH Chủng
Bacillus pH trung bìnhOD0 trung bìnhODt OD trung bình Hoạt độ pectinase (UI/g CT) 5 0,217 1,511 1,294 359,195 6 0,308 2,335 2,027 562,665 7 0,362 2,887 2,525 700,995 8 0,325 2,536 2,211 613,648 9 0,273 2,207 1,934 536,942 10 0,205 1,543 1,338 371,409 Bl2 11 0,176 1,013 0,837 232,339 5 0,103 0,997 0,894 248,068 6 0,212 1,658 1,446 401,388 Bs4 7 0,276 2,077 1,801 499,838
8 0,32 2,603 2,283 633,634
9 0,297 2,455 2,158 599,121
10 0,231 2,103 1,872 519,732 11 0,124 1,352 1,228 340,967 11 0,124 1,352 1,228 340,967
Đồ thị 3.8: Sự biến thiên hoạt độ pectinase của hai chủng Bacillus theo giá trị pH
Nhận xét: Ở chủng Bl2, pH tối ưu ở pH 7 với giá trị hoạt độ enzym pectinase là: 700,995 UI/g CT.
Đối với chủng Bl2, hoạt độ enzym đạt giá trị tối ưu ở pH 8 với giá trị hoạt độ là 633,634 UI/g CT, khi giá trị pH vượt 8 thì hoạt độ enzym giảm, đến pH 11 hoạt độ enzym chỉ còn 340,957 UI/g CT( bằng 54% so với pH tối ưu) chứng tỏ enzym petinase Bl2 là một enzym chịu kiềm.