Định lượng pectin theo phương pháp Ca-pectat[13]

Một phần của tài liệu NGHIÊN CỨU SỰ TỔNG HỢP CẢM ỨNG PECTINASE Ở MỘT SỐ CHỦNG BACILLUS (Trang 35 - 36)

Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU

2.3.6. Định lượng pectin theo phương pháp Ca-pectat[13]

Nguyên tắc

Dùng kiềm để xà phòng hóa hoàn toàn lượng pectin có trong mẫu vật, chuyển pectin sang dạng acid pectic, rồi dùng CaCl2 để tác dụng với acid này tạo dạng kết tủa Ca-pectat. Sấy khô kết tủa trên giấy

đến trọng lượng không đổi, cân kết tủa khô rồi suy ra lượng pectin.

Hóa chất

- Dung dịch CH3COOH 1N - Dung dịch NaOH 0,1N

- Dung dịch CaCl2 2N: cân 230g pha trong 1 lít nước cất, lọc cẩn thận.

Cách tiến hành

Cân 20g nguyên liệu (chứa pectin), giã nhỏ cho vào 100ml nước cất, gia nhiệt tứ 40-450 C, sau 2-3 giờ, lấy dung dịch chiết lần một, tương tự thực hiện lần 2, lần 3 sao cho tổng thể tích dung dịch chiết là 200ml.

Lấy 20ml dung dịch này cho vào bình cầu rồi thêm 100ml dung dịch NaOH 0,1 N, để yên 7giờ (có thể qua đêm) sau đó thêm 50ml dung dịch CH3COOH 1N, qua 5 phút lại cho dung dịch CaCl2 2N để yên 1giờ.

Đem đun sôi 5 phút, lọc qua giấy lọc đã được sấy khô đến trọng lượng không đổi, rửa kết tủa Ca- pectat bằng nước cất nóng cho đến khi không còn ion Cl- (dùng dung dịch AgNO3 1% để thử).

Sau khi rửa sạch kết tủa, cho giấy lọc vào chén, sấy khô ở 1050C cho đến trọng lượng không đổi. Sự

khác nhau về trọng lượng giấy lọc và giấy lọc có kết tủa cho ta biết trọng lượng của Ca-pectat. Vì hàm lượng của canxi trong Caxi-pectat là 8% nên khi tính hàm lượng pectin ta phải nhân trọng lượng Ca-pectat với 0,92.

Cách tính hàm lượng pectin trong nguyên liệu

Hàm lượng pectin trong nguyên liệu được tính theo công thức sau:

A0(%) = B0 x 0,92 x 100

B0: Trọng lượng kết tủa Ca-pectat trên giấy (g)

2 : Lượng nguyên liệu có chứa pectin trong 20ml lấy để xà phòng hóa (g)

Một phần của tài liệu NGHIÊN CỨU SỰ TỔNG HỢP CẢM ỨNG PECTINASE Ở MỘT SỐ CHỦNG BACILLUS (Trang 35 - 36)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(78 trang)