- Mơi trường YEA (mơi trường 2.1.4.1)
3.5.Các đặc điểm sinh học và phân loại của các chủng nấm sợi đã tuyển chọn.
Chương 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN.
3.5.Các đặc điểm sinh học và phân loại của các chủng nấm sợi đã tuyển chọn.
3.5.1.Đặc điểm hình thái, phân loại.
Các chủng nấm nghiên cứu được cấy trên các mơi trường khác nhau MT1, MT 2, MT 4 thành một hoặc ba điểm, nuơi ủ ở nhiệt độ phịng trong thời gian 3 4 ngày. Quan sát sự phát triển của khuẩn lạc
Để quan sát đại thể chúng tơi làm KL khổng lồ, quan sát vi thể chúng tơi làm phịng ẩm. Quan sát bào tử, cuống sinh bào tử, hệ sợi nấm dựa vào các tài liệu của Nguyễn Lân Dũng (2000) Ainsworth G.C (1973), Đặng Hồng Miên, Nguyễn Đức Lượng (2003), Bùi Xuân Đồng (2004), Saccardo P.A (cải tiến), Persoon ex Gray (1801) đểđịnh dạnh đến chi.
Chúng tơi gửi chủng nghiên cứu sang Cơng ty cổ phần Giám định và Khử
trùng FCC định danh đến lồi theo phương pháp quan sát hình thái đại thể và vi thể. Dựa vào các khĩa phân loại theo TK.A Revision of the genus trichoderma by MA .Rifai; Persoon ex Gray (1921),TK. The Genus Aspergillus – Kenneth B- Raper; TK. Manual of the penicillia by Kenneth B-Raper and Charles Thom để định danh tên giống (xem phụ lục)
3.5.1.a. Đặc điểm đại thể và vi thể của các chủng nấm sợi T1.2
Chủng T 1.2 cĩ tốc độ sinh trưởng nhanh, kích thước khuẩn lạc đạt 10 cm trong 7 ngày, cĩ màu sắc thay đổi tùy theo MT nuơi cấy.
Khuẩn lạc lúc non cĩ màu trắng đục, sau già chuyển màu xanh từ xanh lục nhạt
đến xanh lục đậm, dạng bơng xồm, kết cụm, mép khuẩn lạc hình tia, khơng xuất hiện giọt tiết. Mặt trái khuẩn lạc khơng tiết sắc tố.
Hệ sợi cĩ vách ngăn, trong suốt, khơng cĩ tế bào màng dày.Cuống sinh bào tử
thì phân nhánh nhiều, 2- 3 lần.. Các nhánh tạo thành các gĩc rộng với giá hoặc với các nhánh mang chúng. Các nhánh tận cùng ngắn mang ởđỉnh các thể bình.
Thể bình hình chai, phình to ở giữa , sau đĩ thon nhỏ đến đỉnh.
Bào tử hình oval, cầu, xuất phát từ đầu trên thể bình, khơng màu, tập hợp thành các khối trịn ở miệng thể bình, khơng nhày.
Qua các đặc điểm về hình thái khuẩn lạc, khuẩn ty và cơ quan sinh sản trên và dựa vào mơ tả của các tác giả chúng tơi cĩ thể kết luận chủng T1.2 thuộc chi
Trichoderma.
Kết quả này hồn tồn phù hợp với kết quả định danh của cơng ty Giám định và khử trùng FCC mà chúng tơi đã gửi chủng T1.2 đến, là lồi Trichoderma viride Pers. ex. SF. Gray aggr (phụ lục).
a b
Hình 3.8. Hình thái đại thể (a) , vi thể ( b) của chủng T. viride T 1.2
(trên MT PDA)
3.5.1.b. Đặc điểm đại thể và vi thể của các chủng nấm sợi T’1[46]
Khuẩn lạc của chủng T’1 cĩ màu đen nâu ở giữa, cĩ nhiều vịng đồng tâm dạng bột mịn, mép KL cĩ màu trắng hơi xanh, tốc độ sinh trưởng trung bình, đạt kích thước 3-4 cm trong 7 ngày.
Hệ sợi nấm gồm các sợi cĩ vách ngăn, phân nhánh, hơi cĩ màu nâu xẫm.Khối bào tử trên đỉnh bọng thường hình tia tỏa trịn. Bọng đỉnh giá hình cầu, vách dày, giá bào tử trần thắt lại ở phần dưới bọng, vách dày, vùng sinh sản khắp bọng.
Thể bình xếp 2 tầng, lớp 1 cĩ hình dạng tam giác ngược, lớp 2 dạng hình chai. BTT cĩ hình dạng cầu, màu nâu đen, cĩ gai thưa, chuỗi bào tử trần tách rời nhau, đơi khi hình cột.
Qua các đặc điểm về hình thái khuẩn lạc, khuẩn ty và cơ quan sinh sản trên và dựa vào mơ tả của các tác giả chúng tơi kết luận chủng T’1 thuộc chi Aspergillus.
Kết quả này hồn tồn phù hợp với kết quả định danh của cơng ty Giám định và khử trùng FCC mà chúng tơi đã gửi chủng T’1 đến, là lồi Aspergillus foetidus var acidus Naka, Simo and Wat.(phụ lục).
a b
Hình 3.9. Hình thái đại thể (a)vi thể (b) của chủng A. foetidus T’1.
3.5.1.c. Đặc điểm đại thể và vi thể của các chủng nấm sợi T7.1[46]
Hình dạng khuẩn lạc trịn, khi non bề mặt KL cĩ màu trắng, sau 3 ngày chuyển sang màu đen nâu, dạng bột rời, ghồ lên ở giữa khuẩn lạc. Tốc độ sinh trưởng trung bình, kích thước 3,5- 4 cm trong 7 ngày.
Hệ sợi nấm gồm các sợi cĩ vách ngăn, phân nhánh, vách nhám, dầy.
Bọng đỉnh giá hình cầu. Giá bào tử trần thắt lại ở phần dưới bọng, vách dày, vùng sinh sản khắp bọng (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Thể bình xếp 2 lớp, lớp 1 hình dạng tam giác ngược, lớp 2 hình dạng chai. BTT cĩ hình dạng cầu, cĩ gai rõ. Chuỗi BTT tách rời nhau, đơi khi hình cột, khối bào tử trên đỉnh bọng thường hình tia tỏa trịn.
Sau 5 ngày nuơi cấy xuất hiện rõ các hạch nấm màu trắng kem, hình cầu, số
lượng tập trung nhiều ở tâm khuẩn lạc, đường kính gần 1mm.
a b
Hình 3.10. Hình thái đại thể (a), vi thể (b) của chủng: A.tubingensis T 7.1
( MT Czapek- Dox)
Qua các đặc điểm về khuẩn lạc, khuẩn ty và cơ quan sinh sản trên và dựa vào mơ tả của các tác giả chúng tơi kết luận chủng T 7.1 thuộc chi Aspergillus
Kết quả này hồn tồn phù hợp với kết quả định danh của cơng ty Giám định và khử trùng FCC mà chúng tơi đã gửi chủng T 7.1 đến, là lồi Aspergillus tubingensis (Schober) Messeray.
3.5.1.d. Đặc điểm đại thể và vi thể của các chủng nấm sợi Đ 33.1[48] Khuẩn lạc cĩ dạng trịn, mặt nhung mịn, bột rời.
Khuẩn lạc cĩ phân vùng rõ rệt, tâm khuẩn lạc cĩ màu xanh đậm (Deep Green) kế đến cĩ màu xanh nhạt hơn, rìa trắng. Mặt trái KL cĩ màu vàng da cam cĩ nhiều vịng đồng tâm xen kẽ rãnh phĩng xạ, cĩ hình mạng nhện. Tốc độ sinh trưởng chậm, kích thước 2,2-2,4 cm trong 7 ngày ở nhiệt độ 27 0 C
Giá BTT nhẵn, phát triển từ hệ sợi nền, cĩ hình dạng chổi, trên cĩ thể bình hình chai.
BTT cĩ hình dạng cầu, khơng vách ngăn, tạo thành chuỗi dài , hơi tỏa.
a b
Hình 3.11. Hình thái đại thể (a), vi thể (b) của chủng
P.citrinum Thom Đ33.1
Qua các đặc điểm về khuẩn lạc, khuẩn ty và cơ quan sinh sản trên và dựa vào mơ tả của các tác giả chúng tơi kết luận chủng Đ 33.1 thuộc chi Penicillium.
Kết quả này hồn tồn phù hợp với kết quả của cơng ty Giám định và khử
trùng FCC mà chúng tơi đã gửi chủng Đ 33.1 đến, là lồi Penicillium citrinum Thom.
Đặc điểm chủng nấm nghiên cứu Đặc điểm phân loại các taxon tương ứng theo Bùi Xuân Đồng (2004)
T 1.2 1.2
- KL trịn, từ màu trắng đến xanh lục, phát triển nhanh.