a) Kết quả tinh sạch qua lọc gel Biogel P-100 khi tủa protease bằng muối.
Hình 4.3 : Sắc ký đồ kết quả tinh sạch qua lọc gel Bio-gel P – 100 khi tủa bằng muối đối với nấm Aspergillus kawasaki.
Kết quả tinh sạch qua lọc gel khi tủa enzyme bằng muối thu đƣợc 2 peak với thứ tự nhƣ sau :
Peak1 : từ ống số 7 đến ống 12 : 12 ml Peak2 : từ ống số 22 đến ống 29 : 16 ml.
Xác định hàm lƣợng protein và hoạt tính protease cho từng peak. Chúng tôi nhận thấy cả hai peak thu đƣợc đều có hoạt tính. Tuy nhiên hoạt tính protease và hàm lƣợng protein của peak 2 cao nhất nên có thể dự đoán peak 2 có chứa protease quan tâm.
Hình 4.4 : Sắc ký đồ kết quả tinh sạch qua lọc gel Biogel P-100 khi tủa bằng cồn đối với Aspergillus kawasaki.
Kết quả tinh sạch qua lọc gel khi tủa enzyme bằng cồn thu đƣợc hai peak với thứ tự nhƣ sau :
Peak 1 : Từ ống số 7 đến ống 13 : 14 ml. Peak 2 : từ ống số 14 đến ống 31 : 36 ml
Xác định hàm lƣợng protein và hoạt tính protease cho từng peak. Chúng tôi nhận thấy cả hai peak thu đƣợc đều có hoạt tính. Tuy nhiên hoạt tính protease và hàm lƣợng protein của peak 2 cao nhất nên có thể dự đoán peak 2 có chứa protease quan tâm.
c) Kết quả tinh sạch protease của Aspergillus kawasaki khi tủa protease bằng cồn và muốiqua sắc ký lọc gel.
Bảng 4.16 : Kết quả tinh sạch protease của Aspergillus kawasaki qua sắc ký lọc gel. HT protease (UI/g CP) HL protein (mg/g CP) HTR (UI/mg) Độ tinh sạch Hiệu suất về HT (%) Chế phẩm enzyme thô 12,852 20,40 0,63 1 100 Chạy sắc ký qua Biogel P-100 khi tủa muối 8,045 1,38 5,83 9,25 62,7 Chạy sắc ký qua Biogel P-100 khi tủa cồn. 5,534 1,05 5,27 8,37 43,1 Nhận xét kết quả lọc gel :
Sau quá trình tinh sạch enzyme bằng sắc ký lọc gel, hoạt tính riêng của protease tăng. Độ tinh sạch của enzyme sau khi qua sắc ký nhƣ sau :
+ Khi tủa protease bằng muối : Độ tinh sạch gấp 9,25 lần so với chế phẩm enzyme thô ban đầu.
+ Khi tủa protease bằng cồn : Độ tinh sạch gấp 8,37 lần so với chế phẩm enzyme thô ban đầu.