4. Ý nghĩa thực tiễn
3.2.1.3Sự hình thành và tăng trưởng của mô sẹo từ lớp mỏng tử diệp
Bảng 3.3a: Sự thay ñổi trọng lượng tươi của mô sẹo có nguồn gốc từ lớp mỏng tử diệp sau 2, 3, 4, và 5 tuần nuôi cấy trên môi trường chỉ bổ sung auxin (2,4-D)
Nghiệm thức
Trọng lượng tươi (g)
2 tuần 3 tuần 4 tuần 5 tuần
T0 0,12 ± 0,03ab 0,13 ± 0,02a 0,13 ± 0,05a 0,14 ± 0,0289a T1 0,11 ± 0,01ab 0,24 ± 0,02b 0,33 ± 0,02b 0,41 ± 0,0150b T2 0,19 ± 0,04abc 0,27 ± 0,03bc 0,49 ± 0,05cde 0,45 ± 0,0502b
T3 0,18 ± 0,04abc 0,48 ± 0,02f 0,77 ± 0,04f 0,83 ± 0,0318e
Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức 95%
Đối với môi trường chỉ bổ sung 2,4-D, sau 3 tuần nuôi cấy, mô sẹo ñược hình thành từ lớp mỏng tử diệp có màu vàng hơi xanh, trắng và xốp (ảnh 3.3B). Mô sẹo này bắt ñầu chuyển sang nâu và trở nên chắc hơn ở tuần thứ 4. Trọng lượng tươi khối mô sẹo tăng dần theo sự tăng của nồng ñộ 2,4-D. Trọng lượng tươi khối mô sẹo sau 5 tuần nuôi cấy khoảng 0,41 – 0,83g. Trong ñó, môi trường theo nghiệm thức có bổ sung 2,4-D 1mg/l (T3) cho mô sẹo tốt nhất (0,83g) (bảng 3.3a).
Bảng 3.3b: Sự thay ñổi trọng lượng tươi của mô sẹo có nguồn gốc từ lớp mỏng tử diệp sau 2, 3, 4, và 5 tuần nuôi cấy trên môi trường bổ sung auxin (2,4-D hay AIA) kết hợp với cytokinin (BA)
Nghiệm thức
Trọng lượng tươi (g)
2 tuần 3 tuần 4 tuần 5 tuần
T4 0,12 ± 0,01ab 0,26 ± 0,04bc 0,41 ± 0,02bc 0,42 ± 0,03b T5 0,13 ± 0,01ab 0,36 ± 0,03de 0,44 ± 0,02cd 0,57 ± 0,02cd T6 0,12 ± 0,05ab 0,38 ± 0,04de 0,47 ± 0,05cde 0,52 ± 0,04bc T7 0,25 ± 0,02c 0,51 ± 0,05f 0,95 ± 0,04g 0,99 ± 0,03f T8 0,22 ± 0,01bc 0,54 ± 0,05f 0,94 ± 0,02g 0,92 ± 0,04ef T9 0,21 ± 0,03abc 0,55 ± 0,01f 0,81 ± 0,02f 0,85 ± 0,04e T10 0,10 ± 0,05a 0,35 ± 0,04cd 0,54 ± 0,01de 0,60 ± 0,05cd T11 0,11 ± 0,04ab 0,46 ± 0,03ef 0,57 ± 0,02e 0,64 ± 0,05d
Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức 95%
Sự thay ñổi màu sắc, ñặc ñiểm mô sẹo cũng giống như mô sẹo ñược hình thành từ lớp mỏng ñốt tử diệp tương ứng trên các môi trường bổ sung 2,4-D kết hợp với BA hay AIA kết hợp với BA (ảnh 3.5, 3.6).
Ở các nghiệm thức có bổ sung 2,4-D kết hợp với BA, trọng lượng tươi khối mô sẹo tăng dần theo sự tăng của nồng ñộ 2,4–D và BA có trong môi trường nuôi cấy. Trọng lượng tươi khối mô sẹo sau 5 tuần nuôi cấy khoảng 0,57 – 0,99g (bảng 3.3b).
Đối với môi trường có bổ sung AIA kết hợp với BA 0,5mg/l (T10, T11), trọng lượng tươi khối mô sẹo tăng dần theo sự tăng của nồng ñộ AIA. Trọng lượng tươi khối mô sẹo sau 5 tuần nuôi cấy trong khoảng 0,60 – 0,64g, không có sự hình thành rễ ở các nghiệm thức (bảng3.3b, ảnh 3.5D).
Sự hình thành mô sẹo không ñồng ñều ở các lớp mỏng. Lớp mỏng ñầu tử diệp, mô sẹo ñược hình thành nhiều nhất, sau ñó giảm dần ñến lát mỏng cuối tử diệp (tính từ gốc ñến chóp tử diệp).
Như vậy, nguồn auxin thích hợp cho sự hình thành mô sẹo từ lớp mỏng tử diệp là 2,4-D. Môi trường có nồng ñộ 2,4–D 1mg/l và BA 0,2mg/l (T7), sự hình thành mô sẹo tốt nhất (0,99g) (bảng 3.3a,b; ảnh 5.5).
Ảnh 3.5:Mô sẹo từ lớp mỏng tử diệp 3 tuần tuổi, mũi tên trắng chỉ rễ (A): môi trường MS ñối chứng
(B): môi trường MS bổ sung 2,4-D 1mg/l
(C): môi trường MS bổ sung 2,4-D 1mg/l và BA 1mg/l
(D): môi trường MS bổ sung AIA 2mg/l và BA 0,5mg/l
A 1cm B 1cm
1cm 1cm
D
Ảnh 3.6:Mô sẹo từ lớp mỏng ñốt tử diệp 5 tuần tuổi trên môi trường MS bổ sung AIA 2mg/l và BA 0,5mg/l