4. Ý nghĩa thực tiễn
3.2.1.2 Sự hình thành và tăng trưởng của mô sẹo từ lớp mỏng ñốt tử diệp
Bảng 3.2a: Sự thay ñổi trọng lượng tươi của mô sẹo có nguồn gốc từ lớp mỏng ñốt tử diệp sau 2, 3, 4, và 5 tuần nuôi cấy trên môi trường chỉ bổ sung auxin (2,4-D)
Nghiệm thức Trọng lượng tươi (g)
2 tuần 3 tuần 4 tuần 5 tuần
D0 0,02 ± 0,00a 0,03 ± 0,00a 0,11 ± 0,01a 0,19 ± 0,03a D1 0,12 ± 0,04b 0,23 ± 0,02b 0,46 ± 0,02b 0,53 ± 0,02b D2 0,12 ± 0,01b 0,27 ± 0,03b 0,53 ± 0,04b 0,66 ± 0,05c
D3 0,25 ± 0,04c 0,64 ± 0,02de 0,86 ± 0,02e 0,94 ± 0,03ef
Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức 95%
Các nghiệm thức chỉ bổ sung 2,4-D, sau 3 tuần nuôi cấy, mô sẹo ñược hình thành có màu vàng ñậm, trắng và xốp (ảnh 3.3B). Mô sẹo này bắt ñầu chuyển sang nâu và trở nên chắc hơn ở tuần thứ 4. Trọng lượng tươi khối mô sẹo tăng dần theo sự tăng của nồng ñộ 2,4-D. Trọng lượng tươi khối mô sẹo sau 5 tuần nuôi cấy khoảng 0,53 – 0,94g. Trong ñó, môi trường theo nghiệm thức bổ sung 2,4-D 1mg/l (D3) cho mô sẹo tốt nhất (0,94g) (bảng 3.2a).
Bảng 3.2b: Sự thay ñổi trọng lượng tươi của mô sẹo có nguồn gốc từ lớp mỏng ñốt tử diệp sau 2, 3, 4, và 5 tuần nuôi cấy trên môi trường bổ sung auxin (2,4-D hay AIA) kết hợp với
cytokinin (BA)
Nghiệm thức
Trọng lượng tươi (g)
2 tuần 3 tuần 4 tuần 5 tuần
D4 0,15 ± 0,01b 0,24 ± 0,04b 0,47 ± 0,02b 0,54 ± 0,03b D5 0,15 ± 0,02b 0,28 ± 0,03b 0,67 ± 0,02c 0,86 ± 0,02de D6 0,19 ± 0,05bc 0,24 ± 0,04b 0,73 ± 0,06cd 0,86 ± 0,04de D7 0,15 ± 0,01b 0,47 ± 0,05c 1,04 ± 0,03f 1,03 ± 0,03f D8 0,20 ± 0,04bc 0,59 ± 0,05d 1,08 ± 0,03f 1,17 ± 0,04g D9 0,33 ± 0,01d 0,73 ± 0,01e 1,23 ± 0,04g 1,53 ± 0,04h D10 0,19 ± 0,01bc 0,38 ± 0,02c 0,77 ± 0,02d 0,81 ± 0,05d D11 0,24 ± 0,01c 0,40 ± 0,03c 0,86 ± 0,02e 0,89 ± 0,05de
Các số trung bình trong cột với các mẫu tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa ở mức 95%
Đối với môi trường có bổ sung 2,4-D kết hợp với BA, mô sẹo có màu vàng xanh, trắng, ít xốp hơn ( ảnh 3.3D). Mô sẹo bắt ñầu chuyển sang nâu ở tuần thứ 5, chậm hơn so với những nghiệm thức chỉ có bổ sung 2,4-D (ảnh3.4).
Trọng lượng tươi khối mô sẹo tăng dần theo sự tăng của nồng ñộ 2,4–D và BA có trong môi trường nuôi cấy. Trọng lượng tươi khối mô sẹo sau 5 tuần nuôi cấy khoảng 0,54 – 1,53g (bảng 3.2b).
Đối với môi trường có bổ sung AIA kết hợp với BA 0,5mg/l (D10, D11), mô sẹo hình thành từ tuần 1 ñến tuần 4 có màu vàng xanh, trắng và xốp. Trọng lượng tươi khối mô sẹo tăng dần theo sự tăng của nồng ñộ AIA. Trọng lượng tươi khối mô sẹo sau 5 tuần nuôi cấy trong khoảng 0,81 – 0,89g, không có sự hình thành rễ ở các nghiệm thức (bảng3.2b, ảnh 3.3D).
Sự hình thành mô sẹo không ñồng ñều ở các lớp mỏng ñốt tử diệp. Lớp mỏng ñốt tử diệp ở giữa ñốt, mô sẹo ñược hình thành nhiều nhất, ñến ñầu ñốt, sau cùng là cuối ñốt tử diệp (tính theo chiều từ trên chồi ngọn xuống rễ của cây).
Như vậy, sự thay ñổi trọng lượng tươi của mô sẹo cũng giống như các mẫu lá tương ứng trên các môi trường chỉ bổ sung 2,4–D hoặc môi trường có bổ sung 2,4–D kết hợp với BA hay môi trường có bổ sung AIA kết hợp với BA. Nguồn auxin thích hợp
cho sự hình thành mô sẹo từ lớp mỏng ñốt tử diệp là 2,4-D. Môi trường theo nghiệm thức có nồng ñộ 2,4–D 1mg/l và BA 1mg/l (D3), sự hình thành mô sẹo tốt nhất (1,53g) (bảng 3.2a, b; ảnh 3.3).
Ảnh 3.3:Mô sẹo từ lớp mỏng ñốt tử diệp 3 tuần tuổi, mũi tên chỉ rễ (A): môi trường MS ñối chứng
(B): môi trường MS bổ sung 2,4-D 1mg/l
(C): môi trường MS bổ sung 2,4-D 1mg/l Và BA 1mg/l
(D): môi trường MS bổ sung AIA 2mg/l và BA 0,5mg/l 1 cm A B 1.2 cm C 1 cm D 1 cm
Ảnh 3.4:Mô sẹo từ lớp mỏng ñốt tử diệp 5 tuần tuổi trên môi trường MS bổ sung 2,4- D1mg/l và BA 1mg/l