- Xác định Hoạt độ malolactic (HĐML ): HĐML là khả năng phân giải axit D,Lmalic của một gam sinh khối vi khuẩn ẩm ở dạng cố định hay tự do trong một
3.7.Chuẩn bị các chất làm trong:
*Polyclar 10: phadung dịch 10% trong n−ớc, khuấy đều trong 60 phút. *Bentonit: pha thành dung dịch 10% trong n−ớc.
Phần IV : kết quả và bàn luận
4.1.Lựa chọn giống vi khuẩn có hoạt độ malolactic cao:
Nuôi cấy cả 4 chủng giống vi khuẩn vào các bình tam giác 500 ml chứa môi tr−ờng PL10JR nuôi ở nhiệt độ 25 oC và theo dõi sự phát triển của chúng theo thời gian. Đo OD, xác định nồng độ sinh khối và HĐML t−ơng đối của sinh khối vi khuẩn.
Kết quả bảng 1 và 2 cho thấy trong số 4 chủng vi khuẩn thì LF01 phát triển nhanh hơn cả, chỉ sau 3 ngày nuôi cấy trên môi tr−ờng lỏng OD đã đạt giá trị cực đại và giá trị cực đại này cũng cao hơn của 3 chủng còn lại. Nồng độ sinh khối thu đ−ợc của 4 chủng sau 3 ngày nuôi cấy cũng chỉ ra kết quả t−ơng tự, LF01 có nồng độ sinh khối cao nhất (4,99 g/l), v−ợt trội giá trị này của 3 chủng LF02, LF04 và đặc biệt là LF03 (3,88 g/l). Bên cạnh khả năng sinh tr−ởng và phát triển tốt chủng LF01 còn có HĐML tuyệt đối cao hơn các chủng khác, nếu coi HĐML của LF01 là 100,0 (%) thì của các chủng còn lại lần l−ợt là : 89,3; 90,5; và 85,2.
Bảng 1:ảnh h−ởng của thời gian nuôi đến OD của 4 chủng vi khuẩn trên môi tr−ờng PL10JR OD Thời gian ( ngày) LF01 LF02 LF03 LF04 0 0,080 0,090 0,060 0,080 1 0,5320 0,4972 0,4254 0,4370 2 0,8886 0,8103 0,7156 0,7985 3 1,1006 1,0097 0,8532 0,8671 4 0,9845 0,9103 1,0007 1,0054 5 0,7820 0,7268 0,8015 0,7950
Bảng2.HĐML t−ơng đối của sinh khối các loại vi khuẩn sau 3 ngày nuôi trong tam giác 500 ml
Loại giống Leuconostoc oenos
Chỉ tiêu phân tích LF01 LF02 LF03 LF04
Sinh khối ẩm ( g/l ) 4,99 4,3 3,88 4,104 OD (600 nm) 1,1006 1,0097 0,8532 0,8671
HĐML tuyệt đối ( g/gtbẩm./h) 0,240 0,214 0,217 0,204 HĐML t−ơng đối (%) 100,0 89,3 90,5 85,2
Nh− vậy các kết quả trên đã cho thấy rằng chủng LF01 là tốt nhất trong số 4 chủng vi khuẩn, không những phát triển nhanh trên môi tr−ờng lỏng mà còn có HĐML cao nhất. Vì thế chọn chủng LF01 để tiến hành các nghiên cứu tiếp theo.