PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. NỘI DUNG
2.1.1. Kiểm tra một số chỉ tiêu sinh học của các chủng Master seed dùng chế vacxin nhị giá chế vacxin nhị giá
- Xác ựịnh các chỉ số ELD50, EID50 của virus nhược ựộc dịch tả vịt chủng C và virus nhược ựộc viêm gan vịt type I.
2.1.2. Xây dựng quy trình sản xuất vacxin
2.1.2.1. Quy trình sản xuất và kiểm nghiệm ựối với nguyên dịch ựơn giá. 2.1.2.2. Phối hợp hai loại nguyên dịch ựơn thành vacxin nhị giá và xây dựng quy trình ựông khô vacxin nhị giá.
2.1.3. đánh giá chất lượng vacxin nhị giá
2.1.3.1. Kiểm tra ựộ ẩm và chân không của vacxin ựông khô 2.1.3.2. Kiểm tra chỉ tiêu vô trùng
2.1.3.3. Kiểm tra chỉ tiêu an toàn 2.1.3.4. Kiểm tra chỉ tiêu hiệu lực
2.2. đỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU
Vacxin nhị giá ựông khô phòng bệnh dịch tả vịt và viêm gan do virus ở vịt.
2.3. đỊA đIỂM NGHIÊN CỨU
Phân xưởng sản xuất vacxin virus - Xắ nghiệp thuốc Thú y Trung ương - Hoài đức - Hà Nội
2.4. NGUYÊN LIỆU NGHIÊN CỨU
2.4.1. Chủng virus
- Chủng virus vacxin nhược ựộc viêm gan vịt type I do Xắ nghiệp thuốc thú y TW cung cấp
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 38 lực của vacxin. Có LD50 = 10-7,56
- Virus vacxin nhược ựộc Dịch tả Vịt chủng C
- Chủng virus cường ựộc dịch tả vịt tiêu chuẩn (chủng 769 do ban giống Xắ nghiệp thuốc thú y cung cấp, có LD50 = 10-9.
2.4.2. Phôi gà
Phôi gà ấp 9 - 11 ngày tuổi khỏe mạnh từ trứng của ựàn gà bố mẹ sạch bệnh
2.4.3. Phôi vịt
Phôi vịt ấp 10 - 12 ngày tuổi khỏe mạnh không có kháng thể thụ ựộng chống virus DTV và VGV từ trứng của ựàn Vịt bố mẹ sạch bệnh
2.4.4. Mẫu vacxin nhị giá 2.4.5. động vật thắ nghiệm 2.4.5. động vật thắ nghiệm
- Vịt nuôi từ 1- 3 ngày tuổi, sinh ra từ ựàn bố mẹ khoẻ mạnh, chưa tiêm phòng vacxin dịch tả và viêm gan vịt (không có kháng thể thụ ựộng chống virus DTV và VGV).
- Vịt nuôi từ 0,7 - 1 kg chưa ựược tiêm phòng 2 bệnh dịch tả và viêm gan Vịt (không có kháng thể chống virus DTV và VGV).
2.4.6. Các dụng cụ, trang thiết bị, hóa chất
* Dụng cụ:
- đèn soi trứng, khay ựựng trứng, giá ống nghiệm, bút chì, diêm, kim tiêm.
- Các dụng cụ thắ nghiệm khác dùng trong nghiên cứu virus như: Dùi trứng, seringe, ống nghiệm, hộp lồng, bình tam giác, thìa con, kéo, panh, kẹp, ampoul, lọ penicillin (tất cả ựược rửa sạch, sấy khô ở 180oC/3h)
* Hóa chất:
- Nước sinh lý 0,9% hấp ướt ở 120oC/30 phút, bông cồn 700C, bông cồn iod. Chloroform 5%, glycerin 50%, parafin, ựèn cồn.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 39