Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm Toxocara sp. và các yếu tố liên quan của người dân Quận 2 trên 20 tuổi đến khám tại bệnh viện Quận 2 Thành phố Hồ Chí Minh năm 2010, nghiên cứu cắt ngang thực hiện trên 363 người. Tỷ lệ nhiễm Toxocara sp. là 20%, sự khác biệt tỷ lệ nhiễm có ý nghĩa thống kê giữa các nhóm mức độ thường xuyên rửa tay trước ăn với p=0,04; OR=1,55. Sự khác biệt mức độ rửa tay trước ăn ở nhóm trình độ học vấn có ý nghĩa với p=0,001. Dựa vào phân tích thống kê có mối liên quan mức độ rửa tay trước ăn và tỷ lệ nhiễm Toxocara sp.[4].
Nghiên cứu của Dương Văn Thấm về hành vi liên quan đến nhiễm giun đũa chó/mèo tại một số đơn vị thuộc Quân khu 9, tỷ lệ nhiễm Toxocara canis chiếm 67,1%;không phụ thuộc vào lứa tuổi nhưng phần nào phụ thuộc vào công việc phải thường xuyên tiếp xúc với đất [13].
Nghiên cứu “Tỷ lệ và một số yếu tố nguy cơ nhiễm Toxocara ở trẻ em tại Ecatepec Morelos, Mexico”, cũng chỉ ra có mối liên quan giữa huyết thanh dương tính với nuôi chó dưới 1 năm tuổi (OR=1,78; p > 0,05). Mặc dù nghiên cứu không đưa ra mối liên quan có ý nghĩa thống kê nhưng các giá trị OR gợi ý rằng các tác nhân khác có thể là các yếu tố dịch tễ quan trọng cho sự xuất hiện của Toxocara như là không rửa
tay trước khi ăn, suy dinh dưỡng, béo phì, và sử dụng các công viên công cộng. Trẻ em trong nhóm tuổi >12 và <16 tuổi có huyết thanh dương tính cao hơn(17,59%) nhóm >2 tuổi và < 11 tuổi (4,62%) [19].
Một số nghiên cứu chỉ ra yếu tố cá nhân có liên quan đến nhiễm giun đũa chó/mèo là giới.Nghiên cứu “Tỷ lệ và một số yếu tố nguy cơ nhiễm Toxocara ở trẻ em tại Ecatepec Morelos, Mexico”, nghiên cứu cắt ngang được thực hiện giữa tháng 8 và tháng 9 năm 2010 để xác định các yếu tố nguy cơ liên quan đến nhiễm Toxocara ở 108 trẻ em từ 2 đến 16 tuổi. Nghiên cứu sử dụng kỹ thuật ELISA để phát hiện kháng thể chống Toxocara, phân tích Chi-square, tỉ số chênh OR được sử dụng để xác định yếu tố nguy cơ liên quan với huyết thanh dương tính Toxocara canis. Kết quả tỷ lệ huyết thanh dương tính ở nam cao hơn ở nữ (28,84% và 16,07%) [19].
Nghiên cứu “Huyết thanh dương tính vớiToxocariasis ở trẻ em miền Đông tỉnh Azerbaijan, Iran”. Các mẫu máu được thu thập ngẫu nhiên từ trẻ em của tất cả 5 huyện của tỉnh Đông Azerbaijan, tổng cộng có 336 trẻ em, 187 nam và 149 nữ trong độ tuổi từ 0 – 15 tuổi, ELISA được sử dụng để phát hiện kháng thể IgG chống lại Toxocara bài tiết kháng nguyên. Phỏng vấn câu hỏi đã được tiến hành để có được những dữ liệu liên quan đến tuổi tác, giới tính và thói quen của họ.Kết quả nghiên cứu cho thấy giới đã được tìm thấy là một yếu tố nguy cơ đáng kể cho việc lây nhiễm Toxocara ở trẻ em. Trẻ em nam đã được tìm thấy bị nhiễm bệnh cao hơn (41,71%) so với trẻ em gái (24,16 %) [41].
1.4.2. Thói quen ăn uống
Nghiên cứu hành vi liên quan đến nhiễm giun đũa chó (Toxocara canis) tại một số đơn vị thuộc Quân khu 9, sử dụng phương pháp nghiên cứu mô tả cắt ngang, xác định tỷ lệ nhiễm ký sinh trùng Toxocara canis bằng kỹ thuật ELISA huyết thanh, thống kê phân tích số liệu trên phần mềm SPSS 18.0 nhằm mục đích tìm hiểu đặc điểm nhiễm Toxocara canis và một số yếu tố nguy cơ lây nhiễm Toxocara canis ở bộ đội tại
một số đơn vị thuộc Quân khu 9. Tỷ lệ nhiễm Toxocara canis chiếm 67,1%; các yếu tố nguy cơ làm tăng tỉ lệ nhiễm Toxocara canis là ăn rau sống, ăn thịt chó [13].
1.4.3. Tiếp xúc với chó/mèo
Một nghiên cứu về tỷ lệ nhiễm và các yếu tố nguy cơ nhiễm ấu trùng giun đũa chó Toxocara canis ở Salvador, bang Bahia, Brazil (Souza RF và cs., 2011), 338 cá nhân được xét nghiệm về sự có mặt của các kháng thể IgG anti - Toxocara canis. Kết quả kháng thể xuất hiện cao hơn ở các đối tượng thuộc tầng lớp xã hội thấp do tiếp xúc với chó và mèo nhiều hơn[35].
Một nghiên cứu do nhóm tác giả ở trường đại học quốc gia La Plata, Argentina thực hiện (Chiodo P và cs.,2006) về các yếu tố liên quan đến bệnh ấu trùng giun đũa chó mèo ở người tại cộng đồng nông thôn Argentina. Kết quả cho thấy tỷ lệ huyết thanh dương tính là 23%, tăng bạch cầu ái toan trong máu ngoại vi được phát hiện trên 86,95% số cá nhân có huyết thanh dương tính và trên 37,66% cá nhân có huyết thanh âm tính (p < 0,001; OR = 11,03). Tất cả những người có huyết thanh dương tính đều có nuôi chó trong nhà [21].
Nghiên cứu “Tần suất nhiễm Toxocara ở trẻ em tham gia dịch vụ Y tế công cộng của Maringá, Nam Brazil”, nghiên cứu quan sát cắt ngang được thực hiện từ tháng 9/2004 đến tháng 9/2005 với 450 mẫu huyết thanh được thu thập ngẫu nhiên. Sử dụng bộ câu hỏi để đánh giá số liệu về dịch tễ học, lâm sàng và huyết học, sử dụng kỹ thuật Elisa đã phát hiện 130 (28,8%) huyết thanh dương tính, chủ yếu là của trẻ em từ 7 tháng đến 5 tuổi (p=0,0016). Tương quan có ý nghĩa được quan sát giữa huyết thanh dương tính và thường xuyên chơi trong các hộp cát ở trường hoặc trung tâm chăm sóc ban ngày (p=0,011), và sự có mặt của một con mèo ở trong nhà (p=0056). Thông tin từ các gia đình của trẻ, 50% là các gia đình có chó [33].
Nghiên cứu thực trạng nhiễm và đánh giá một số yếu tố nguy cơ lây nhiễm ấu trùng giun đũa chó ở người tại một số điểm khu vực miền Trung Việt Nam năm 2011,
nghiên cứu mô tả cắt ngang có phân tích trên 800 người (≥ 5 tuổi). Tỷ lệ xét nghiệm ELISA (+) là 15%, một số yếu tố liên quan được xác định là giới (nữ: 68,3% cao hơn nam: 31,7%), trình độ học vấn (đại học, cao đẳng 7,7% thấp hơn các nhóm còn lại 92,3%). Nguy cơ nhiễm ấu trùng giun chó (Toxocara canis) tỷ lệ thuận với hành vi nuôi chó hoặc tiếp xúc với chó [6].
Nghiên cứu thực trạng nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo trên người và các yếu tố nguy cơ tại cộng đồng dân cư người trưởng thành làm nghề nông tại huyện Cẩm Xuyên, tỉnh Hà Tĩnh và huện Yên Định, tỉnh Thanh Hóa năm 2013 sử dụng phương pháp mô tả cắt ngang, tỷ lệ dương tính trong cộng đồng là 71,3 % và 85,3% với kỹ thuật Ab – ELISA, các yếu tố nguy cơ làm tăng tỷ lệ nhiễm Toxocara canis là nuôi chó, nuôi mèo, chăm sóc chó mèo [7].Nghiên cứu của Dương Văn Thấm cũng chỉ ra có mối liên quan giữ nuôi chó, nuôi mèo với nhiễm giun đũa chó/mèo [13].
1.4.4. Yếu tố môi trường
Tại châu Á cũng có một nghiên cứu về tỷ lệ nhiễm Toxocara trong số trẻ em đi học ở Manado, Indonesia (Hayashi E và cs., 2010).Họ đã thực hiện một điều tra huyết thanh học về nhiễm trùng Toxocara canis ở các học sinh trung học từ 3 quận của phía bắc Sulawesi.Trong số 117 học sinh ở 2 quận nông thôn gần Manado cho phép chó vào nhà có tỷ lệ dương tính với Toxocara canis là 84.6%.Trong đó có 53 (45.3%) trường hợp mẫu huyết thanh có hiệu giá kháng thể cao của kháng thể chống Toxocara đặc hiệu. Một quận thành thị cho thấy một tỷ lệ nhiễm cao; 58/71 (81,7%) có hiệu giá kháng thể cao chống lại Toxocara phù hợp với kết quả test ELISA, dù không có triệu chứng lâm sàng. Các kết quả này chỉ ra nhiễm trùng ở phía bắc Sulawesi là tiềm tàng và nhiều ca bệnh hơn đánh giá trước đây đã từng làm và cho biết những người đang sống trong môi trường ô nhiễm bởi các trứng Toxocara trở nên dễ dàng nhiễm Toxocara canis và có tỷ lệ nhiễm bệnh cao [23].
Nghiên cứu “Huyết thanh dương tính vớiToxocariasis ở trẻ em miền Đông tỉnh Azerbaijan, Iran”.Các yếu tố nguy cơ đã được tìm thấy liên quan đến việc lây nhiễm
Toxocariasis ở trẻ em của tỉnh Đông Azerbaijan bao gồm tình trạng gia đình, điều kiện sống, nhận thức[41].
Nghiên cứu tại Cẩm Xuyên, Hà Tĩnh đã chỉ ra có mối liên quan giữa nhiễm giun đũa chó/mèo với không tẩy giun định kỳ cho vật nuôi và ô nhiễm môi trường [7].
1.5. Khung lý thuyết
Thực trạng nhiễm Toxocara sp.ở trẻ em từ 6 – 10 tuổi
- Xét nghiệm ELISA
- Yếu tố nghi ngờ nhiễm (Xét nghiệm BCAT)
Thói quen ăn uống
- Ăn rau sống - Uống nước lã
Các yếu tố liên quan đến nhiễm Toxocara sp. (yếu tố nguy cơ)
Vệ sinh môi trường
- Cách nuôi chó, mèo - Không xử lý phân chó,
mèo
- Không tẩy giun định kỳ cho chó, mèo
Hành vi cá nhân
- Nghịch đất cát
- Không rửa tay trước khi ăn
- Không rửa tay sau khi chơi với chó, mèo
Tiếp xúc với chó/mèo
- Gia đình có nuôi chó, mèo
- Chơi đùa, bồng bế chó/mèo
- Cho chó, mèo vào nhà
- Cho chó, mèo lên giường
1.6. Địa điểm nghiên cứu
Xã Yên Lạc, huyện Yên Định, tỉnh Thanh Hóa có diện tích 605,6 ha, dân số là 5136 người, mật độ dân số 774 người/km². Đây là một xã thuần nông, các hộ gia đình ở đây chủ yếu làm nông nghiệp, thói quen sinh hoạt không hợp vệ sinh và 80% các hộ gia đình đều có nuôi chó, mèo. Chó, mèo thường được thả rông, công tác thu gom, quản lý phân không được quan tâm.
Xã Yên Lạc có 3 làng: Châu Thôn (4 thôn: Châu Thôn 1, Châu Thôn 2, Châu Thôn 3, Châu Thôn 4), Phác Thôn (3 thôn: Phác Thôn 1, Phác Thôn 2, Phác Thôn 3), Hanh Cát (3 thôn: Hanh Cát 1, Hanh Cát 2, Hanh Cát 3).
Xã có một trạm y tế đạt chuẩn Quốc Gia với 6 cán bộ, trong đó có 1 bác sỹ là Trạm trưởng, 2 y sỹ, 1 y tá và 1 dược sỹ trung học, 1 nữ hộ sinh, mô hình bệnh tật đặc thù là các bệnh: viêm đường hô hấp, bệnh đường tiêu hóa…
Xã có một trường tiểu học Yên Lạc, hầu hết các trẻ từ 6 – 11 tuổi trong xã đều tập trung học tại trường (260/270), số trẻ còn lại học trên huyện.Nghiên cứu được tiến hành tại trường tiểu học Yên Lạc.
Chương 2
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Đối tượng nghiên cứu
Đối tượng chính: trẻ em từ 6 - 11 tuổi sống tại xã Yên Lạc, huyện Yên Định, tỉnh Thanh Hóa, hiện đang theo học tại trường tiểu học Yên Lạc.
Đối tượng hỗ trợ trả lời phỏng vấn: người chăm sóc chính của trẻ (bố hoặc mẹ)
Tiêu chuẩn lựa chọn: Tất cả các trẻ học tại trường tiểu học Yên Lạc.
Tiêu chuẩn loại trừ: Các trẻ nghỉ ốm, nghỉ học, không có mặt trong thời gian nghiên cứu hoặc không đồng ý tham gia nghiên cứu (17 trẻ).
2.2. Thời gian và địa điểm nghiên cứu
Thời gian: Nghiên cứu được tiến hành từ tháng 03/2014 đến hết tháng 06/2014.
Địa điểm: Trường tiểu học xã Yên Lạc, huyện Yên Định, tỉnh Thanh Hóa.
2.3. Thiết kế nghiên cứu
Nghiên cứu mô tả cắt ngang có phân tích:
- Điều tra thực trạng nhiễm giun đũa chó/mèo bằng kỹ thuật ELISA phát hiện kháng thể kháng Toxocara sp..Những trường hợp xét nghiệm ELISA dương tính trong nghiên cứu này là những trường hợp được xác định là nhiễm bệnh.
- Phỏng vấn đối tượng nghiên cứu và cha mẹ trẻ về các yếu tố nguy cơ.
2.4. Cỡ mẫu
Toàn bộ trẻ từ 6 – 11 tuổi tại trường tiểu học xã Yên Lạc có mặt tại thời điểm nghiên cứu thu thập số liệu và đồng ý tham gia nghiên cứu, dự kiến là 260 trẻ, thực tế nghiên cứu là 243 trẻ (số còn lại nghỉ học và không đồng ý tham gia).
Nghiên cứu viên họp với ban giám hiệu nhà trường và các thầy cô giáo trong trường để giới thiệu về mục tiêu và nội dung nghiên cứu, thống nhất thời gian tiến hành nghiên cứu. Sau đó họp với cha mẹ trẻ để lấy phiếu chấp thuận tham gia nghiên cứu.
Xét nghiệm: Trẻ sẽ được các kỹ thuật viên tiến hành lấy máu tĩnh mạch (3ml/trẻ) để làm xét nghiệm ELISA phát hiện kháng thể kháng Toxocara sp., đồng thời trẻ được lấy 1 giọt máu đầu ngón tay đưa vào lam kính, nhuộm giemsa đếm số lượng bạch cầu ái toan. Các mẫu máu được thu thập, bảo quản theo quy định và xét nghiệm tạo labo Viện Sốt rét – Ký sinh trùng – Côn trùng Trung ương.
Phỏng vấn: Điều tra viên tiến hành phỏng vấn trẻ em bằng bộ câu hỏi hành vi nguy cơ cho trẻ em được thiết kế sẵn (Phụ lục 1) và phỏng vấn người chăm sóc chính của trẻ bằng bộ câu hỏi yếu tố môi trường được thiết kế sẵn (Phụ lục 2).
2.6. Thử nghiệm bộ công cụ
Tập huấn cho các điều tra viên tham gia phỏng vấn trẻ cách tiếp cận và kỹ năng phỏng vấn trẻ để thu được thông tin chính xác nhất.
Bộ công cụ này đã được thử nghiệm trước với một nhóm đối tượng bao gồm 10 trẻ em 6 – 11 tuổi và 5 người chăm sóc chính của trẻ tại xã Yên Thịnh, huyện Yên Định, tỉnh Thanh Hóa để đảm bảo có sự tương đồng về môi trường và cách sống của đối tượng nghiên cứu trước khi tiến hành nghiên cứu. Các câu hỏi chưa rõ ràng về nghĩa, từ ngữ khó hiểu … được điều chỉnh sau khi thử nghiệm và tạo thành các bản cuối cùng trước khi điều tra chính thức.
2.7. Các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu Kỹ thuật ELISA Kỹ thuật ELISA
Kỹ thuật ELISA được thực hiện tại labo Khoa Ký sinh trùng Viện Sốt rét – Ký sinh trùng – Côn trùng Trung ương.
Dùng bộ Kit ELISA phát hiện kháng thể IgG đặc hiệu Toxocara sp. trong huyết thanh người bị nhiễm ấu trùng giun đũa chó.Bộ Kit ELISA ấu trùng giun đũa chó hoạt động trên nguyên tắc phản ứng kỹ thuật miễn dịch gắn men gián tiếp phát hiện kháng thể.Kháng nguyên Toxocara sp.đã gắn trong các giếng nhựa polystyrene tóm bắt kháng thể bám trên giếng nhựa bằng cộng hợp kháng IgG người đánh dấu men Peroxidase.
Đọc kết quả bằng máy đọc ELISA đo mật độ quang (OD) của các giếng, căn cứ vào mật độ quang của các giếng xác định những trường hợp âm tính và dương tính với giun đũa chó mèo:
Các trường hợp dương tính với giun đũa chó/mèo có OD ≥ 0,3 Các trường hợp âm tính với giun đũa chó/mèo có OD < 0,3
Trong nghiên cứu này chúng tôi sử dụng bộ Kit Toxocara ELISA của Hoa Kỳ sản xuất, với độ nhạy 93%, độ đặc hiệu 88%.
Kỹ thuật đếm số lượng bạch cầu ái toan (BCAT)
Xác định tỷ lệ BCAT (Eosinophil) bằng cách lấy máu giọt mỏng, nhuộm giêm sa, soi lam và tính theo công thức:
Số Eosinophil đếm được
% Eosinophil = x 100 100 bạch cầu
Tỷ lệ BCAT bình thường: 1 – 4%
Các mức độ tăng BCAT (Theo Franklin và CS., 1998): Tăng nhẹ: > 4 – 7 %
Tăng trung bình: > 7 – 10% Tăng cao: > 10%
Phỏng vấn được thực hiện tại Trường Tiểu học Yên Lạc, xã Yên Lạc, huyện Yên Định, tỉnh Thanh Hóa. Điều tra viên phỏng vấn là nghiên cứu viên và các cán bộ y tế xã đã được tập huấn.
Trẻ em được các điều tra viên phỏng vấn trực tiếp thông qua bộ câu hỏi về các yếu tố nguy cơ được thiết kế sẵn
Các yếu tố môi trường tại gia đình trẻ sinh sống được các điều tra viên phỏng vấn qua cha mẹ trẻ.
2.8. Các biến số của nghiên cứu
STT Biến số Định nghĩa Loại biến Phương pháp
thu thập Thông tin chung của đối tượng nghiên cứu
1 Tuổi Tuổi của đối tượng nghiên cứu(ĐTNC) tính theo tròn năm tới thời điểm nghiên cứu
Rời rạc Phỏng vấn trẻ
2 Giới Giới tính của đối ĐTNC (nam hoặc nữ)
Nhị phân Quan sát
3 Dân tộc Dân tộc của ĐTNC (Kinh hoặc khác)
Định danh Phỏng vấn bố/mẹ trẻ
Thực trạng nhiễm giun đũa chó/mèo
4 ELISA ĐTNC có kết quả xét nghiệm ELISA dương tính hay âm tính
Nhị phân Kỹ thuật ELISA
5 BCAT Đếm số lượng bạch cầu ái toan tăng và không tăng
Nhị phân Đếm lam máu nhuộm giêmsa
Hành vi cá nhân
6 Rửa tay sau khi chơi với chó, mèo
ĐTNC có/không có rửa tay sau khi chơi với chó, mèo
7 Mức độ thường xuyên của việc rửa tay sau khi chơi với chó, mèo
Mức độ thường xuyên của