Dựa theo kết quả của các nghiên cứu bào chế liposome doxorubicin đã đạt đƣợc, kết hợp với các nghiên cứu trên thế giới [50], liposome doxorubicin PEG hóa đƣợc bào chế theo phƣơng pháp tráng film angham trải qua 2 giai đoạn sau:
24
ào chế liposome chƣa mang dƣợc chất:
Tạo lớp film lipid: ân các thành phần HSPC: Chol: DSPE-PEG2000 theo công thức, hòa tan hoàn toàn trong cloroform. Bốc hơi dung môi trên thiết bị cất quay ở nhiệt độ 50o trong điều kiện chân không, tốc độ quay 50 vòng/phút, thời gian cất quay 12 giờ.
Hydrat hóa: sử dụng đệm amoni sulfat pH 5,5 đã lọc qua màng lọc 0,2 μm. Tăng tốc độ quay lên 80 vòng/phút và tăng nhiệt độ lên 55-600C. Sau 90 phút hydrat hóa thu đƣợc hỗn dịch liposome.
Giảm kích thước liposome: sử dụng 2 kỹ thuật: đùn qua màng hoặc đồng nhất hóa áp suất cao.
Sử dụng thiết bị đùn tay mini extruder: hỗn dịch tạo thành lần lƣợt qua các màng polycarbonat có kích thƣớc giảm dần từ 400nm - 50nm; nén tuần hoàn 10 chu kỳ/màng, nhiệt độ khi nén duy trì 550C- 600 C.
Sử dụng thiết bị nén áp suất cao khí nén nitrogen. Nén lặp lại nhiều chu kỳ ở điều kiện nhiệt độ vào áp suất thích hợp đến khi đạt KTTP và P I mong muốn. Sau cùng lọc hỗn dịch qua màng 0,2 µm.
ào chế thuốc tiêm liposome doxorubicin:
Đổi môi trường ngoài liposome: Sử dụng hệ thống lọc tiếp tuyến tự động để đổi môi trƣờng bên ngoài liposome bằng các hệ đệm thích hợp.
Đưa dược chất vào liposome:
- ân chính xác lƣợng doxorubicin hydroclorid cho vào hỗn dịch liposome để đạt hàm lƣợng 2 mg/ml, sử dụng thiết bị khuấy từ để hòa tan và khuếch tán OX vào trong liposome. Ủ trong 15 phút ở nhiệt độ 55 - 60o để quá trình khuếch tán diễn ra hoàn toàn. Lọc chế phẩm qua màng lọc cellulose acetat 0,2 µm.
- Liposome đƣợc đóng trong lọ thủy tinh 10 ml, đóng nút cao su và siết nắp nhôm, bảo quản tránh ánh sáng ở 2 – 8oC.