2.2.3.2.1. Xây dựng mô hình chuột béo phì thực nghiệm:
Chuột nhắt trắng chủng Swiss (khối l-ợng ban đầu là 13 -14g), sau khi mua về đ-ợc chăm sóc bình th-ờng trong 3-4 ngày để thích ứng với môi tr-ờng, sau đó chúng tôi tiến hành phân chuột thành các lô, mỗi lô gồm 6 con.
+ Lô nuôi th-ờng: Cho ăn chế độ bình th-ờng (thức ăn của Viện Vệ sinh Dịch tễ TW).
+ Các lô còn lại: Cho ăn thức ăn giàu lipid với thành phần đ-ợc trộn từ nhiều loại thức ăn khác nhau nh-: ngô, sữa bột, đậu t-ơng, lòng đỏ trứng, lạc, mỡ n-ớc…
+ Thời gian nuôi chuột theo 2 chế độ ăn là 6 tuần.
Thành phần thức ăn đ-ợc tính toán dựa trên thành phần d-ỡng chất của từng loại hỗn hợp thức ăn phối trộn, theo tài liệu chuẩn của Viện dinh d-ỡng Quốc gia Việt Nam và theo tài liệu [59, 61].
Thời gian nuôi chuột theo 2 chế độ khác nhau là 6 tuần, sau 6 tuần nuôi, tiến hành cân đo trọng l-ợng và xét nghiệm một số chỉ số hoá sinh nh-: glucose máu, lipid máu gồm cholesterol toàn phần, triglycerid, HDL-c, LDL - c để xác định mức độ khác nhau của các lô theo hai chế độ ăn.
2.2.3.2.2. Nghiên cứu ảnh h-ởng của các phân đoạn dịch chiết đến trọng l-ợng và một số chỉ số hoá sinh trên mô hình chuột béo phì thực nghiệm
Để đánh giá tác dụng đến trọng l-ợng và một số chỉ số sinh liên quan đến trao đổi lipid của các phân đoạn dịch chiết, chúng tôi tiến hành phân chuột thành các lô. Dựa trên mô hình gây chuột béo phì thực nghiệm, chuột béo phì đ-ợc chia làm 6 lô, mỗi lô gồm 6 con, cao của các phân đoạn dịch chiết từ cây Thảo quyết minh đ-ợc hòa vào n-ớc cất rồi cho chuột uống hàng ngày vào buổi sáng, cách thức đ-ợc thể hiện ở bảng 2.1
Bảng 2.1. Mô hình nghiên cứu ảnh h-ởng của các phân đoạn dịch chiết và một số chỉ số hoá sinh trên mô hình chuột béo phì thực nghiệm Số
lô
Chế độ ăn tr-ớc điều trị Điều trị
1 Thức ăn chuẩn N-ớc muối sinh lí 0,9%( đối chứng -) 2 Thức ăn giàu lipid N-ớc muối sinh lí 0,9%( đối chứng +) 3 Thức ăn giàu lipid Metformin ( 500mg/Kg) thuốc tân d-ợc
4 Thức ăn giàu lipid Uống cao phân đoạn n - hexan (1000mg/kg) 5 Thức ăn giàu lipid Uống cao phân đoạn ethyaxetate (1000mg/kg) 6 Thức ăn giàu lipid Uống cao phân đoạn ethanol (1000mg/kg)
Tiến hành điều trị trong 21 ngày, trọng l-ợng của các con chuột đ-ợc theo dõi hàng tuần, vào ngày 21 sau khi kiểm tra trọng l-ợng các con chuột đ-ợc nhịn đói 12 giờ, sau đó tiến hành lấy máu tổng số, để phân tích các chỉ số liên quan đến trao đổi lipid nh-: cholesterol, triglixerid, HDL-c, LDL-c và glucose, lipase máu (lipoprotein lipase, EC 3.1.1.34).