Phương pháp tách chiết chất kháng nấm

Một phần của tài liệu nghiên cứu một số chủng xạ khuẩn sinh hoạt chất kháng nấm fusarium gây hại trên cây cà chua (lycopersicon esculentum mill ) (Trang 47 - 48)

Nguyên tắc: Dựa trên khả năng hòa tan trong các dung môi hữu cơ của chất kháng nấm, tiến hành li tâm không những loại bỏ được sinh khối mà còn loại bỏ được các chất độc hại ra khỏi dịch nuôi cấy.

Cách tiến hành:

Sau khi nuôi cấy XK trong các điều kiện MT cụ thể đã xác định, trên máy lắc 220 vòng/phút. Sau đó, tiến hành li tâm 5000 vòng/ phút để tách riêng dịch nuôi cấy và sinh khối.

Phần sinh khối:

Phần sinh khối được chiết bằng các loại dung môi khác nhau ( etanol, axeton, etyl axetat, metanol), với tỉ lệ là 1: 1. Hỗn hợp dung môi sinh khối này được lắc 220 vòng/phút ở nhiệt độ phòng trong 30 phút, sau đó li tâm 5000 vòng/ phút để loại sinh khối. Cuối cùng dùng dung môi chiết được thử hoạt tính kháng nấm Fusarium

bằng phương pháp khoan lỗ thạch.

So sánh kết quả đo vòng kháng khuẩn để lựa chọn dung môi thích hợp để tách chất kháng nấm từ sinh khối XK.

Dịch nuôi cấy

Dịch nuôi cấy sau khi loại sinh khối có thể được tách chiết bằng các loại dung môi hữu cơ khác nhau như: n – butanol, etyl axetat, n – propanol và iso – butanoltỷ lệ giữa dịch chiết và dung môi là 1 : 1. Hỗn hợp dịch nuôi cấy và dung môi được lắc 220 vòng/phút ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. Sau đó thử hoạt tính kháng nấm

Fusariumtrong dung môi và trong dịch chiết bằng phương pháp khoan lỗ thạch. So sánh kết quả đo vòng kháng khuẩn để lựa chọn dung môi thích hợp để tách chất kháng nấm từ dịch nuôi cấy XK.

Một phần của tài liệu nghiên cứu một số chủng xạ khuẩn sinh hoạt chất kháng nấm fusarium gây hại trên cây cà chua (lycopersicon esculentum mill ) (Trang 47 - 48)