Phân tích hệ protein và hệ enzyme thủy phân lignocelulose

Một phần của tài liệu Phân lập và nghiên cứu đặc tính nấm mốc chịu nhiệt có khả năng thủy phân Lignocellulose (Trang 58 - 60)

Dịch enzyme thô của 46 chủng nấm mốc chịu nhiệt được chạy qua cột Hi- trap desalting để loại các phân tử kích thước nhỏ tránh làm nhiễu bản điện di. Mẫu sau khi chạy cột có thể chạy được luôn, một số mẫu lượng protein thấp được cô chân không sau đó mới tiến hành điện di. Kết quả điện di SDS-PAGE và zymogram CMC, xylan của 46 chủng nấm mốc chịu nhiệt được thể hiện ở Hình 3.10

Hình 3.10. Ảnh điện di SDS-PAGE và zymogram CMC, xylan của 46 chủng nấm mốc chịu nhiệt

Kết quả điện di SDS-PAGE cho thấy các chủng nấm mốc chịu nhiệt sinh khá nhiều protein tuy nhiên cũng có một số chủng do lượng protein sinh ra quá thấp điện di lên băng rất mờ nhạt mặc dù đã được cô đặc nhiều lần như nhóm

Rhizomucor pusillus FCH 5.7, FCH 6.4, FCH 20.1 hay một số chủng Myceliophthora fergusii FCH 5.4, Melanocarpus albomyces FCH 5.6, chủng FCH

14.1. Nhóm sinh nhiều protein và khá đồng đều giữa các chủng trong cùng một loài

là nhóm Thermomyces lanuginosus (FCH 5.5, 6.5, 8.1, 10.6, 12.1, 30.1, 31.1, 32.1,

Kết quả zymogram cũng cho thấy sự khác biệt rõ ràng giữa hệ cellulase và xylanase của 46 chủng nấm mốc. Các chủng cho hoạt tính CMCase cao đồng thời

sản sinh khá nhiều băng enzyme. Đặc biệt là nhóm Aspergillus fumigatus, Myceliophthora thermophila tuy nhiên cũng có một vài nhóm cho số băng enzyme nhiều nhưng hoạt tính lại rất thấp, đó là nhóm Rhizomucor miehei, Rhizomucor pusillus, Rhizopus microsporus. Điều này đồng nghĩa với việc biểu hiện hoạt tính

của các enzyme ở các chủng khác nhau là khác nhau.

Trái ngược với bản điện di zymogram CMC, bản điện di xylan lại cho số

băng hoạt tính thấp hơn nhiều trừ nhóm nấm Aspergillus fumigatus. Đây là nhóm

nấm mốc duy nhất điện di cho khoảng 5-6 băng enzyme còn lại các chủng nấm mốc

chỉ có khoảng 1-3 băng enzyme. Tuy mang 5-6 băng enzyme nhưng hoạt tính của A. fumigatus lại thấp hơn rất nhiều so với các chủng chỉ mang 1-2 băng điện di. Điển hình là nhóm Thermomyces lanuginosus. Nhóm nấm mốc này chỉ sản xuất khoảng

1-2 loại xylanase, 1 loại có kích thước nhỏ chỉ khoảng 20 kDa chiếm lượng lớn và 1 lượng nhỏ xylanse kích thước lớn khoảng 66 kDa. Tuy nhiên chỉ với 2 loại xylanase

này đã thể hiện hoạt tính gấp hàng chục lần so với A. fumigatus. Điều này phù hợp với các nghiên cứu cho rằng T. lanuginosus chỉ tiết một lượng nhỏ enzyme để thủy

phân xylan. Hầu hết xylanase của các chủng nấm mốc còn lại đều có kích thước

nhỏ, dưới 35 kDa trừ một vài nhóm như Scytalidium thermophilum, ngoài băng

enzyme có kích thước khoảng 18 kDa còn có 1 băng hoạt tính với kích thước

khoảng 40 kDa hay nhóm Myceliophthora thermophila FCH 112.2, FCH 156.3.

Một phần của tài liệu Phân lập và nghiên cứu đặc tính nấm mốc chịu nhiệt có khả năng thủy phân Lignocellulose (Trang 58 - 60)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(93 trang)