Nguồn tôm giống thẻ chân trắng PL10 được mua từ trại giống uy tín và qua kiểm dịch ở Cái Răng-Cần Thơ về Khoa Thủy sản nuôi dưỡng 7 ngày sau đó tiến hành bố trí thí nghiệm. Tôm bố trí có kích cỡ đồng đều, bơi lội nhanh nhẹn, đầy đủ phụ bộ, không mang mầm bệnh. Cỡ tôm thí nghiệm có khối lượng thân và chiều dài tương ứng trung bình là 0,08 g và 1,2 cm.
3.2.4. Tinh dầu thiết yếu MixOil-TM
GrowNat-TM (MO)
Tinh dầu MO có thành phần chính là Propylene glycol, thymol, eugenol và tinh dầu hỗn hợp. Đây là sản phẩm thương mại và liều dùng theo khuyến cáo của nhà sản xuất. Tác dụng chính của tinh dầu này là kích thích tăng trưởng, tăng tỉ lệ sống và tăng cường đáp ứng miễn dịch không đặc hiệu.
3.2.5. Thức ăn
Thức ăn dùng trong thí nghệm là thức ăn thương mại chuyên dùng cho tôm chân trắng của công ty Grobest. Thành phần nguyên liệu có trong thức ăn được công bố bởi nhà sản xuất bao gồm: bột cá, bột đậu nành, bột mì, bột nội
tạng mực, chất dẫn dụ, bột men, lecithin, cholesterol, vitamin và khoáng chất. Thành phần dinh dưỡng có trong thức ăn được thể hiện qua bảng sau:
Bảng 1: Thành phần dinh dƣỡng có trong thức ăn Grobest
Thành phần dinh dƣỡng trong thức ăn (%)
Mã thức ăn
Grobest 01 Grobest 02 Grobest 03
Độ ẩm 11 11 11 Protein 40 40 40 Lipid 5-7 5-7 5-7 Xơ thô 1,5 1,5 1,5 Tro 4 4 4 Nguồn:Grobest Co. Ltd
3.2.6. Nguồn nước thí nghiệm
Nước ngọt: được lấy từ nước máy sinh hoạt tại khoa Thủy sản-Trường Đại học Cần Thơ.
Nước lợ: nguồn nước lợ trong thí nghiệm có độ mặn 10‰ được pha từ nước ót có độ mặn 100‰ (mua từ Vĩnh Châu-Sóc Trăng) cùng với nước máy sinh hoạt. Nước sau khi pha được xử lý bằng Chlorine với nồng độ 30 ppm và sục khí liên tục trong 24-48 giờ. Dùng Natrithiosunfat để trung hòa dư lượng Chlorine và tiếp tục sục khí trong 24 giờ. Khi nước được kiểm tra không còn Chlorine thì bắt đầu bố trí thí nghiệm.
3.3. Bố trí thí nghiệm
Thí nghiệm được bố trí khối hoàn toàn ngẫu nhiên gồm 4 nghiệm thức. Mỗi nghiệm thức lặp lại 3 lần với cùng mật độ 100PL/ bể 500L và sục khí liên tục trong suốt quá trình thí nghiệm. Các bể nuôi được thay nước với chu kỳ 2tuần/lần và trước khi thu mẫu môi trường 1 ngày, mỗi lần thay từ 20-30% lượng nước trong bể. Các nghiệm thức được bố trí như sau:
+ Nghiệm thức 0% là nghiệm thức đối chứng (ĐC) không bổ sung tinh dầu thiết yếu MO.
+ Nghiệm thức 0,02%: Bổ sung tinh dầu thiết yếu MO với hàm lượng 0,02%.
+ Nghiệm thức 0,04%: Bổ sung tinh dầu thiết yếu MO với hàm lượng 0,04%.
+ Nghiệm thức 0,06%: Bổ sung tinh dầu thiết yếu MO với hàm lượng 0,06%.
3.4. Chăm sóc cho ăn
Cho ăn theo nhu cầu của tôm. Kích thước và lượng thức ăn được thay đổi theo khả năng bắt mồi cũng như sức ăn của tôm. Tần suất cho ăn 3 lần/ngày vào lúc 7 giờ, 14 giờ và 21 giờ.
Tinh dầu thiết yếu MO được trộn với một lượng dầu cá hồi nhất định, sau đó phun đều lên thức ăn theo từng nghiệm thức. Sau khi trộn 15 phút mới tiến hành cho tôm sử dụng. Thức ăn còn lại được trữ lạnh trong tủ mát ở nhiệt độ 4 oC để tôm sử dụng tiếp cho ngày hôm sau. Thức ăn được chuẩn bị 2 ngày/lần.
3.5. Theo dõi môi trƣờng nƣớc
Theo dõi hoạt động của tôm để điều chỉnh lượng thức ăn cho phù hợp, đồng thời thường xuyên siphon đáy bể để loại bỏ lượng thức ăn thừa và chất thải của tôm nuôi. Kiểm tra các chỉ tiêu môi trường nước cũng như việc duy trì độ mặn ở mức 10‰.
Các yếu tố thủy lý như nhiệt độ, pH được đo bằng máy đo và ghi kết quả trực tiếp vào thời điểm cố định (7h30-16h) của các ngày thu mẫu. Các yếu tố thủy hóa như: DO, COD, TSS, độ cứng, độ kiềm, NO2-, PO43-, TAN được thu và phân tích tại phòng Phân tích chất lượng nước-Khoa Thủy sản-Trường ĐHCT. Các chỉ tiêu chất lượng nước được thu với chu kỳ 2 tuần/lần. Dụng cụ thu mẫu, cách bảo quản và phương pháp phân tích mẫu chất lượng nước được thể hiện qua bảng sau:
Bảng 2: Các chỉ tiêu chất lƣợng nƣớc đƣợc đánh giá Chỉ tiêu
Dụng cụ bảo
quản Bảo quản Phƣơng pháp phân tích
DO (mg/L) Chai nút mày nâu 125mL
1 mL MnSO4,
1mL NaOH Phương pháp Winkler (APHA et al., 1995) COD (mg/L) Chai nút mày trắng 125 mL 2 mL H2SO4 4M Oxy hóa KMnO4 trong môi trường kiềm
(APHA et al., 1995) TSS (mg/L) Chai nhựa 1L Trữ lạnh 4 0
C Phân tích trọng lượng (APHA et al., 1995) Độ cứng
(mgCaCO3/L) Chai nhựa 1L Trữ lạnh 4 0
C Chuẩn độ Complexon (APHA et al., 1995) Độ kiềm
(mgCaCO3/L) Chai nhựa 1L Trữ lạh 4 0
C Chuẩn độ Acid (APHA et al., 1995) NO2
-
(mg/L) Chai nhựa 1L Trữ lạnh 4 0
C So màu Diazonium (APHA et al., 1995) PO3
3-
(mg/L) Chai nhựa 1L Trữ lạnh 4 0C Phương pháp SnCl2 (APHA et al., 1995) TAN (mg/L) Chai nhựa 1L Trữ lạnh 4 0
C So màu Indophenol blue (APHA et al., 1995)
3.6. Phƣơng pháp tính toán các chỉ tiêu tăng trƣởng và tỉ lệ sống
3.6.1. Tăng trưởng trọng lượng
- Tăng trưởng trọng lượng WG (Weight Gain)
WG (g) = WC – WĐ
- Tốc độ tăng trưởng tuyệt đối về trọng lượng DWG (Daily Weight Gain)
WC – WĐ
DWG (g/ngày) = --- T
- Tốc độ tăng trưởng tương đối về trọng lượng SGR (Specific Growth Rate)
LnWC – LnWĐ
SGR (%/ngày) = --- x 100 T
Trong đó:
WĐ: Trọng lượng tôm tại thời điểm bố trí (g)
WC: Trọng lượng tôm tại thời điểm kết thúc thí nghiệm (g) T: Thời gian thí nghiệm (ngày)
3.6.2. Tăng trưởng chiều dài
- Tăng trưởng chiều dài LG (Lenght Gain)
LG (cm)= LC – LĐ
- Tăng trưởng tuyệt đối về chiều dài DLG (Daily Lenght Gain) LC – LĐ
DLG (cm/ngày) = --- T
- Tăng trưởng tương đối về chiều dài SGR (Specific Growth Rate) Ln LC – Ln LĐ
SGR (%/ngày)= --- x 100 T
Trong đó:
LC: Chiều dài tôm tại thời điểm kết thúc thí nghiệm (cm) T: Thời gian thí nghiệm (ngày)
3.6.3. Tỷ lệ sống SR (Surviral Rate)
Nf
SR (%) = --- x 100 Ni
Trong đó:
Nf: Số tôm thu hoạch tại thời điểm kết thúc thí nghiệm Ni: Số tôm tại thời điểm bố trí thí nghiệm
3.7. Phƣơng pháp thu và phân tích thành phần hóa học của tôm
Mẫu tôm sau khi kết thúc thí nghiệm được chọn ngẫu nhiên 15 con cho từng bể riêng biệt sau đó xác định độ ẩm và hàm lượng protein của tôm. Độ ẩm và hàm lượng protein của tôm được phân tích theo phương pháp AOAC (2001).
3.8. Phƣơng pháp xử lý số liệu
Các số liệu được thu thập trên từng bể riêng biệt và xử lý thống kê trên phần mềm Excel. Sau đó tính trung bình ± độ lệch chuẩn. Để đánh giá sự khác biệt giữa các nghiệm thức sử dụng phần mềm Statistica 5.0 để xử lý ở mức ý nghĩa p=0,05.
CHƢƠNG IV: KẾT QUẢ THẢO LUẬN 4.1. Chất lƣợng nƣớc trong hệ thống thí nghiệm
4.1.1. Nhiệt độ
Nhiệt độ trong quá trình thí nghiệm không có sự khác biệt giữa các nghiệm thức (p >0,05). Do được bố trí cùng điều kiện trong trại thực nghiệm nên nhiệt độ giữa các nghiệm thức chênh lệch không đáng kể và dao động trong khoảng từ 25,5-29,5 oC. Ở nghiệm thức 0%, nhiệt độ vào buổi sáng dao động từ 25,6-27,5 oC, trong khi đó vào buổi chiều nhiệt độ biến thiên từ 26,5- 29,2 oC. Ở các nghiệm thức có bổ sung tinh dầu thiết yếu MO nhiệt độ vào buổi sáng dao động từ 25,3-28,4 oC, nhiệt độ vào buổi chiều biến thiên từ 26,5-29,4 oC (Hình 5). Nhìn chung nhiệt độ rất ổn định và không có sự chênh lệch nhiều giữa các đợt thu mẫu. Bên cạnh đó biến động nhiệt độ giữa sáng và chiều không quá 2 oC. Theo nghiên cứu của Trương Quốc Phú (2006) nhiệt độ thích hợp đối với sự phát triển của sinh vật trong khoảng từ 25-32 o
C, trung bình 27-28 oC. Theo Chanratchakool et al. (1995), khi nhiệt độ cao hơn 32-33 oC hay thấp hơn 25 oC thì khả năng bắt mồi của tôm sẽ giảm 30-50%. Như vậy, trong điều kiện thí nghiệm nhiệt độ nằm trong khoảng thích hợp và lý tưởng cho sự sinh trưởng và phát triển bình thường của tôm chân trắng.
23 24 25 26 27 28 29 30 1 14 28 42 56 Ngày thí nghiệm N hi ệt đ ộ ( 0 C) 0% Sáng 0,02% Sáng 0,04% Sáng 0,06% Sáng 0% Chiều 0,02% Chiều 0,04% Chiều 0,06% Chiều
Hình 5: Biến động về nhiệt độ ở các nghiệm thức
4.1.2. pH
Do bố trí cùng điều kiện trong trại thực nghiệm và nguồn nước thí nghiệm đã qua xử lý nên pH ở các bể nuôi không có sự thay đổi lớn giữa sáng và chiều. Vào buổi sáng, pH dao động từ 6,5-7,7 trong khi buổi chiều pH không cao chỉ dao động ở mức 6,7-7,9 (Hình 6). Ở nghiệm thức 0% pH dao
động trong khoảng từ 6,8-7,8, chênh lệch pH giữa sáng và chiều ở mức 1,0. Bên cạnh đó ở các nghiệm thức 0,02; 0,04 và 0,06% dao động từ 6,5-7,8 chênh lệch pH giữa sáng và chiều ở mức 1,2. Sự biến đổi pH của thí nghiệm liên quan nhiều đến sự biến động của thực vật trong môi trường nước và các hoạt động trao đổi khí của sinh vật. Đặc biệt là về cuối vụ, khi hàm lượng dinh dưỡng tích lũy cao tạo điều kiện cho tảo và vi sinh vật phát triển mạnh. Ngoài ra, thí nghiệm được bố trí với hệ thống thổi khí liên tục một phần CO2 ngoài không khí khuếch tán vào bể nên pH của thí nghiệm thay đổi không quá cao và khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p >0,05). Theo Chanratchakool et al. (1995) cho rằng pH dao động trong khoảng 7,5-8,5 là thích hợp đối với tôm chân trắng. Như vậy, pH ở các nghiệm thức nằm trong khoảng thích hợp cho sự sinh trưởng và phát triển bình thường của tôm chân trắng.
5 5.5 6 6.5 7 7.5 8 8.5 9 1 14 28 42 56 Ngày thí nghiệm pH 0% Sáng 0,02% Sáng 0,04% Sáng 0,06% Sáng
0% Chiều 0,02% Chiều 0,04% Chiều 0,06% Chiều
Hình 6: Biến động về pH ở các nghiệm thức
4.1.3. Oxy hòa tan-DO
Kết quả thí nghiệm cho thấy hàm lượng DO giữa các nghiệm thức có bổ sung tinh dầu thiết yếu MO và đối chứng khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p >0,05). Oxy hòa tan trong thí nghiệm chủ yếu phụ thuộc vào quá trình sục khí. Tuy nhiên, hàm lượng DO ở các bể thí nghiệm có khuynh hướng giảm dần vào cuối chu kỳ nuôi và dao động từ 4,5-8,3 mg/L. Cụ thể, nghiệm thức 0% hàm lượng DO dao động từ 5,2-8,3 mg/L trung bình ở mức 7,1±1,06 mg/L. Hàm lượng DO ở nghiệm thức 0,02; 0,04 và 0,06% đạt các giá trị trung bình tương ứng là 6,6±0,66; 6,9±1,1 và 7,2±0,9 mg/L (Hình 7). Do thí nghiệm bố trí cùng nguồn nước đã được xử lý và sục khí mạnh nên hàm lượng DO trong đợt thu mẫu đầu tiên ở tất cả các bể đều cao hơn 7 mg/L. Theo Whetstone et al. (2002) hàm lượng DO tốt nhất cho sự phát triển của tôm là
lớn hơn 5 mg/L và nhỏ hơn 15 mg/L. Lawrence và Seidman. (1985) chứng minh rằng có sự giảm hoạt động và lượng thức ăn được tiêu hóa thấp ở tôm sú và tôm chân trắng khi điều kiện oxy hòa tan thấp. Tăng trưởng của hai loài này giảm có ý nghĩa khi hàm lượng oxy hòa tan nhỏ hơn 2 mg/L. Tuy nhiên, các quá trình phân giải chất hữu cơ và hoạt động của sinh vật làm cho hàm lượng DO có khuynh hướng giảm về cuối thí nghiệm nhưng vẫn nằm trên mức thích hợp cho tôm. 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 14 28 42 56 Ngày thí nghiệm D O ( m g /L ) 0% 0,02% 0,04% 0,06% Hình 7: Biến động về hàm lƣợng DO ở các nghiệm thức
4.1.4. Nhu cầu Oxy hóa học-COD
Hàm lượng COD ở hệ thống thí nghiệm nghiên cứu về tinh dầu thiết yếu MO tăng cao vào ngày thứ 14. Trung bình ở mức 5,18±0,23 mg/L sau đó có khuynh hướng giảm dần đến ngày thứ 42. Vào đợt thu mẫu cuối hàm lượng COD có gia tăng nhưng không cao. Cụ thể, ở nghiệm thức 0% COD dao động từ 2,13-5,17 mg/L, nghiệm thức 0,02% dao động từ 1,84-5,49 mg/L, nghiệm thức 0,04% dao động từ 2,48-5,12 mg/L và ở nghiệm thức 0,06% dao động từ 2,48-4,93 mg/L (Hình 8). Theo Boyd et al. (1998) trong ao nuôi tôm nên
khống chế hàm lượng COD ở mức dưới 20 mg/L. Do đó, vào đợt thu mẫu thứ hai hàm lượng COD tăng cao nhưng vẫn còn ở mức thấp (5,2±0,2 mg/L) và thích hợp đối với tôm. Nguyên nhân là do điều kiện nuôi thuận cho các hoạt động của tôm như tăng cường độ bắt mồi, tăng khả năng tiêu hóa thức ăn nên hàm lượng COD ở các nghiệm thức ít có sự biến động. Qua kết quả xử lý thống kê cho thấy hàm lượng COD ở hệ thống thí nghiệm khác biệt không có ý nghĩa (p >0,05). Theo Trương Quốc Phú (2006) hàm lượng COD đối với tôm nuôi đạt ở mức nhỏ hơn 6 mg/L là thích hợp. Tuy nhiên, trong hệ thống
thí nghiệm này với quá trình thay nước định kỳ 2 tuần/lần và việc sử dụng thức ăn có kiểm soát nên góp phần làm giảm ô nhiễm môi trường nước. Hàm lượng COD trong các bể thí nghiệm chủ yếu bị chi phối bởi thức ăn tan rã và chất thải của tôm nuôi. Như vậy, hàm lượng COD ở hệ thống thí nghiệm hoàn toàn thích hợp cho sự sinh trưởng và phát triển bình thường của tôm chân trắng. 0 1 2 3 4 5 6 1 14 28 42 56 Ngày thí nghiệm C O D ( m g /L ) 0% 0,02% 0,04% 0,06%
Hình 8: Biến động về COD ở các nghiệm thức
4.1.5. Độ cứng tổng cộng
Độ cứng tổng cộng ở hệ thống thí nghiệm có khuynh hướng tăng cao vào ngày thu mẫu thứ 28 nhưng sau đó giảm dần đến cuối chu kỳ nuôi (Hình 9). 1000 1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700 1800 1900 1 14 28 42 56 Ngày thí nghiệm Đ ộ cứ ng ( m gC aC O 3 /L ) 0% 0,02% 0,04% 0,06% Hình 9: Biến động về độ cứng tổng cộng ở các nghiệm thức
Theo kết quả ghi nhận được thì độ cứng của nước ở các nghiệm thức dao động từ 1400-1775 mg/L và khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p >0,05). Nghiệm thức 0% độ cứng biến thiên từ 1400-1708 mg/L, trung bình ở mức 1533±105 mg/L. Ở các nghiệm thức có bổ sung tinh dầu thiết yếu MO độ cứng dao động từ 1458-1775 mg/L và đạt giá trị trung bình 1608±23 mg/L (Hình 9). Nguyên nhân là do vào cuối chu kỳ nuôi tôm lột xác, nhu cầu về Ca2+; Mg2+ của tôm tăng cao làm cho độ cứng của nước giảm. Theo Vũ Thế Trụ (2003) và Trương Quốc Phú (2006) thì độ cứng ở hệ thống thí nghiệm hoàn toàn phù hợp cho sự sinh trưởng và phát triển bình thường của tôm chân trắng.
4.1.6. Độ kiềm tổng cộng
Độ kiềm ở hệ thống thí nghiệm có sự biến động tỉ lệ nghịch theo thời gian, dao động ở mức từ 109-171 mg/L và khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p>0,05). Ở nghiệm thức 0% độ kiềm dao động từ 119-167 mg/L, trung bình ở mức 147±21 mg/L. Độ kiềm ở các nghiệm thức 0,02; 0,04 và 0,06% biến thiên từ 109-171 mg/L và đạt các giá trị trung bình lần lượt là 139,7±15,3; 146,9±20,3 và 132,2±20 mg/L (Hình 10). Độ kiềm trong ao nuôi tôm tăng cao là do mật độ tảo cùng với pH biến động mạnh (Trương Quốc Phú, 2006). Tuy nhiên, độ kiềm ở các bể có xu hướng giảm đến cuối chu kỳ nuôi. Nguyên nhân là do quá trình thay nước định kỳ cùng với việc siphon đáy bể, kiểm soát lượng thức ăn thừa làm nguồn dinh dưỡng cho tảo phát triển