Phần mềm Quantity One của BioRad là phần mềm thông dụng và được sử dụng nhiều trên thế giới để xác định độ đậm nhạt của các băng protein trên điện di đồ. Chúng tôi sử dụng phần mềm này để xác định độ tinh khiết của protein sản phẩm được điện di trên gel acrylamide bằng kỹ thuật SDS-PAGE. Kết quả xác định độ tinh sạch được thể hiện trên Hình 19.
Hình 19. Xác định thành phần độ tinh khiết của protein bằng phần mềm Quantity One
Mẫu sau tinh chế IL-2 TQ
58
Bảng 6. Thông số phân tích băng protein xác định độ tinh khiết của sản phẩm IL-2 bằng phần mềm Quantity One
% Độ tinh khiết của protein
STT băng Maker Trung Quốc Mẫu
1 13,37838 94,14868 98,021 2 19,20191 2,351318 3 16,52623 4 17,1558 5 11,64706 6 21,09062 7 13,37838 Tổng số 99% 96.5% 98%
Nhìn trên Hình 19 ta thấy, mẫu IL-2 của Trung Quốc (TQ), là một sản phẩm sạch đã được kiểm tra chất lượng về độ tinh khiết đạt hơn 95%. Sản phẩm IL-2 TQ tồn tại 2 băng ở kích thước 15 kDa và một băng cao khoảng 30 kDa, đây là dạng IL- 2 kép dimer (kết quả kiểm tra lai Western blot bằng kháng thể đặc hiệu kháng IL-2 vẫn phát hiện được băng này). Do vậy băng protein 30 kDa này vẫn chính là sản phẩm IL-2 và không ảnh hưởng đến độ tinh khiết của sản phẩm. Độ sạch của thang protein chuẩn (Fermentas) là 99%, mẫu IL-2 TQ cho tỷ lệ IL-2 đạt 95%. Độ tinh sạch của mẫu IL-2 sau tinh chế của chúng tôi được xác định bằng phần mềm đạt đến 98%, cao hơn so vói mẫu đối chứng là sản phẩm IL-2 của Trung Quốc được bán trên thị trường. Như vậy, sản phẩm protein tái tổ hợp IL-2 sau khi tinh chế đã đạt yêu cầu về độ tinh khiết cần thiết của một sản phẩm dược phẩm và sẵn sàng để tiến hành đông khô thử nghiệm và xác định công thức pha chế phù hợp.