2. Mục tiêu của ñề tài
1.8.3. Các phương pháp phát hiện kháng thể Tiên mao trùng
Khi tiêm mao trùng ký sinh, cơ thể vật chủ sinh ra kháng thể đặc hiệu chống lại tiêm mao trùng. Những phương pháp sau cho phép phát hiện kháng thể kháng tiêm mao trùng trong máu vật chủ:
- Phương pháp ngưng kết trên phiến kính (SAT: Slice Agglutination Test): Hịa tan 1 giọt huyết thanh gia súc nghi mắc bệnh vào 1 giọt nước muối sinh lý trên phiến kính, sau đĩ cho 1 giọt máu chuột bạch cĩ nhiều Tiêm mao trùng vào, trộn đều, đậy lamen và soi dưới kính hiển vi (độ phĩng đại 10x20 hoặc 10x40). Nếu thấy ngưng kết hình hoa cúc là dương tính (+) và ngược lại là âm tính (-). Phương pháp này đơn giản, dễ làm và cĩ thể áp dụng trên diện rộng.
- Phương pháp LATEX (Latex Agglutination Test): LATEX là phương pháp ngưng kết giám tiếp, được dùng để phát hiện kháng thể lưu động cĩ trong máu của gia súc mắc bệnh Tiêm mao trùng.
- Phương pháp CATT (CAM Agglutination Test for Trypanosomiatis): Sử dụng kít và quy trình do đề án Bỉ - Việt Nam cung cấp. Phản ứng tiến hành theo quy trình của Magnus và cs (1978). ðộ pha lỗng sàng lọc là 1/4.
Nguyên lý: kháng nguyên tiêm mao trùng đã được nhuộm màu kết hợp với kháng thể tạo thành những đám kết tủa li ti màu xanh.
Phương pháp ELISA là một trong những phương pháp hiện đại nhất được ứng dụng để chẩn đốn bệnh tiêm mao trùng.
Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nơng nghiệp ……… 16
Nguyên lý: dùng kháng thể hoặc kháng thể kháng Globulin (kháng kháng thể) cĩ mang một enzym (phosphatase hoặc Peroxydase) được gắn trên mảnh Fc, cho kết hợp trục tiếp hoặc gián tiếp với kháng nguyên. Sau đĩ cho cơ chất sinh màu vào, cơ chất sẽ kết hợp với enzym và bị enzym phân hủy tạo nên màụ So sánh với màu của quang phổ kế sẽđịnh lượng được mức độ của phản ứng.
Phương pháp ELISA hiện đang được sử dụng rỗng rãi ở các nước trên thế giới, ở Việt Nam đã bước đầu chế kháng nguyên tiêm mao trùng và ứng dụng để chấn đốn bệnh Tiêm mao trùng ở nước tạ