6. Đóng góp mới của đề tài
2.2.3.2. Phân nhóm động vật thí nghiệm
Động vật thí nghiệm là chuột nhắt trắng thuần chủng dòng Swiss khỏe mạnh được cân từng con, đánh dấu, phân lô ngẫu nhiên trước khi thí nghiệm.
a.Tạo mô hình chuột béo phì
- Lô nuôi thường (lô 1): Cho ăn chế độ bình thường (thức ăn chuẩn của
Viện Vệ sinh Dịch tễ TW).
- Lô nuôi béo (lô 2 đến lô 12): Cho ăn thức ăn giàu lipid với thành phần
được trộn từ nhiều loại thức ăn khác nhau.
Các lô chuột được theo dõi trong vòng 6 tuần, trọng lượng của các con chuột được kiểm tra hàng tuần.
b.Tạo mô hình chuột ĐTĐ type 2
Mô hình chuột ĐTĐ type 2 được xây dựng trên nhóm chuột béo phì kết hợp với tiêm STZ liều thấp.
Phương pháp:
Chuột nuôi với chế độ ăn giàu chất béo trong 6 tuần ở trên. Sau 16h cho nhịn đói, tiến hành tiêm màng bụng liều đơn STZ (110mg/kg thể trọng) pha
trong đệm citrate 0,01M ở pH = 4,3. Sau đó chúng được tiếp nhận nước và thức ăn bình thường. Nồng độ glucose huyết được kiểm tra trước và sau khi tiêm 3 ngày. Những con chuột có đường huyết xác định ≥ 18mmol/l và ổn định sẽ được chọn để uống cao các phân đoạn dịch chiết trong vòng 21 ngày.
c.Phân lô chuột thí nghiệm
Sau khi đã tạo được chuột béo phì và chuột ĐTĐ type 2 chúng tôi tiến hành phân lô chuột thí nghiệm như sau :
* Mô hình chuột béo phì
- Lô 1: Chuột nuôi thường (Lô đối chứng (chung cho cả hai mô hình))
- Lô 2: Chuột béo phì, không điều trị
- Lô 3: Chuột béo phì điều trị bằng cao ethanol
- Lô 4: Chuột béo phì, điều trị bằng cao n-hexan
- Lô 5: Chuột béo phì, điều trị bằng cao chloroform
- Lô 6: Chuột béo phì, điều trị bằng cao ethylacetat
* Mô hình chuột ĐTĐ
- Lô 7: Chuột ĐTĐ type 2, không điều trị
- Lô 8: Chuột ĐTĐ type 2, điều trị bằng thuốc metformin
- Lô 9: Chuột ĐTĐ type 2, điều trị bằng cao ethanol
- Lô 10: Chuột ĐTĐ type 2, điều trị bằng cao n-hexan
- Lô 11: Chuột ĐTĐ type 2, điều trị bằng cao chloroform
- Lô 12: Chuột ĐTĐ type 2, điều trị bằng cao ethylacetat