Phương pháp

a. Trên chuột cống đực non thiến

Chuột cống đực non khoảng 35 ngày tuổi, khối lượng 60- 70 g sau khoảng 3 ngày nuôi trong điều kiện nghiên cứu mới, cắt bỏ hai bên tinh hoàn chuột, nuôi ổn định trong 7 ngày để hồi phục sức khỏe. Sau đó chuột được chia lô ngẫu nhiên, mỗi lô 6- 10 con và được dùng thuốc liên tục trong 10 ngày với liều lượng như sau:

- Lô 1: Uống dung môi pha mẫu thử (NaCMC 0,5%) (1 ml/100g cân nặng).

- Lô 2: Tiêm dưới da đùi dung dịch testosteron pha trong dầu oliu với liều 0,4 mg/kg cân nặng.

- Lô 3: Uống cao cồn 40% Testin liều 6 g/kg cân nặng (thể tích 1 ml/100g cân nặng).

- Lô 4: Uống cao cồn 40% Testin liều 12 g/kg cân nặng (thể tích 1 ml/100g cân nặng).

Đến ngày thứ 11, cân rồi mổ chuột. Các cơ quan sinh dục phụ được bóc tách và cân ngay trên cân phân tích, riêng túi tinh được ép nhẹ cho hết tinh dịch trước khi cân. Kết quả được tính theo khối lượng cơ quan mg/100g khối lượng cơ thể chuột, so sánh kết quả giữa các lô để đánh giá và rút ra kết luận. Phương pháp tiến hành được mô tả ở hình 2.1 dưới đây:

28

7 ngày sau thiến

Hình 2.1. Sơ đồ nghiên cứu hoạt tính androgen trên chuột cống đực non thiến

b. Trên chuột cống đực trưởng thành

Chuột cống đực trưởng thành 10- 12 tuần tuổi, khối lượng khoảng 200 g. Sau khi nuôi ổn định 5- 7 ngày trong điều kiện nghiên cứu, được chia thành 4 lô, mỗi lô 7- 10 con và cho uống mẫu thử trong vòng 10 ngày.

- Lô 1: Uống dung môi pha mẫu thử (NaCMC 0,5%) thể tích 1 ml/100g cân nặng

- Lô 2: Tiêm dưới da đùi dung dịch testosteron pha trong dầu oliu với liều 0,4 mg/kg cân nặng

- Lô 3: Uống cao cồn 40% Testin liều 6 g/kg cân nặng (thể tích 1 ml/100g cân nặng)

- Lô 4: Uống cao cồn 40% Testin liều 12 g/kg cân nặng (thể tích 1 ml/100g cân nặng)

Ngày thứ 11 cân lại khối lượng chuột, sau đó giết chuột bằng ether, mổ tách lấy các cơ quan sinh dục phụ gồm tinh hoàn, tuyến tiền liệt, túi tinh, tuyến Cowper, cơ nâng hậu môn, quy đầu rồi đem cân ngay các cơ quan này trên cân phân tích (túi tinh được ép nhẹ cho hết dịch trước khi cân).

Quá trình nghiên cứu được tóm tắt ở hình 2.2 dưới đây:

Hình 2.2. Sơ đồ nghiên cứu hoạt tính androgen trên chuột cống đực trưởng thành

7 ngày nuôi ổn định

Chia lô Giết chuột, bóc tách,

cân các cơ quan sinh dục Cho uống mẫu thử 2 4 6 2 4 6 8 10 11 Ngày

Thiến chuột Chia lô Giết chuột, tách, cân các

cơ quan sinh dục Cho chuột

uống mẫu thử

2 4 6

2 4 6 8 10 11 Ngày y

29