- Các dụng cụ thủy tinh dùng trong quá trình thí nghiệm gồm có: bình tam
3.5. Đánh giá tác dụng diệt khuẩn in vitro của dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong dung môi ethanol 35% khi pha loãng.
trong dung môi ethanol 35% khi pha loãng.
Xác định được nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của kháng sinh, hay dịch chiết là một bước quan trọng trong việc lựa chọn liều điều trị trong thú y cũng như trong nhân y. Nồng độ ức chế tối thiểu MIC được hiểu là nồng độ thấp nhất của 1 kháng sinh có khả năng ức chế sự phát triển của vi khuẩn sau khoảng 24h nuôi cấy.
Nhằm nghiên cứu sâu hơn về khả năng diệt khuẩn in vitro của dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong dung môi ethanol 35%, cũng như tìm ra nồng độ thấp nhất khi pha loãng có khả năng diệt khuẩn in vitro đối với 02 chủng vi khuẩn gây bệnh để lựa chọn liều điều trị thử nghiệm trên lợn con, chúng tôi tiến hành thí nghiệm pha loãng dịch chiết để kiểm tra khả năng diệt khuẩn in vitro.
Kỹ thuật này nhằm mục đích xác định chính xác nồng độ nhỏ nhất của dịch chiết thân cây Mò hoa trắng có tác dụng ức chế sự phát triển của một chủng vi khuẩn trong môi trường nuôi cấy (phương pháp định lượng). Dựa theo nguyên lý nồng độ kháng sinh (dịch chiết) tăng dần trong môi trường nuôi cấy, khi đạt đến một nồng độ nhất định nó sẽ ức chế được sự phát triển của vi khuẩn, và bằng mắt thường đã có thể xác định được điều này thông qua quan sát sự xuất hiện có hay không có vòng vô khuẩn.
Bằng phương pháp pha loãng liên tiếp cao dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong dung môi ethanol 35% ở nồng độ 100mg/ml với hệ số pha loãng ½, sau đó, tiến hành thử kháng sinh đồ để kiểm tra khả năng ức chế vi khuẩn trên môi trường thạch.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 40
Thông qua sự xuất hiện hay không của vòng vô khuẩn chúng tôi xác định nồng độ tối thiểu thấp nhất của dịch chiết thân cây Mò hoa trắng, kết quả được thể hiện ở bảng 3.5.
Bảng 3.5. Khả năng diệt khuẩn in vitro dịch chiết thân cây Mò hoa trắng khi pha loãng
Vi khuẩn
Hệ số pha loãng cao dịch chiết (100mg/ml)
1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024
Nồng độ cao thân cây Mò hoa trắng (µg/ml)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Salmonella spp + + + + + + + + - -
E. coli + + + + + + + + - -
Chú thích:+ : Có đường kính vòng vô khuẩn; - : Không có đường kính vòng vô khuẩn. 1: 50.000µg/ml; 2: 25.000µg/ml; 3: 12500µg/ml; 4: 6250µg/ml; 5: 3125µ g/ml; 6: 1653µ g/ml; 7: 781µ g/ml; 8: 391µg/ml; 9: 195µg/ml; 10: 98µg/ml.
E. coli Salmonella spp.
Hình 3.8. Khả năng diệt khuẩn in vitro dịch chiết thân cây Mò hoa trắng khi pha loãng
Kết quả cho ta thấy dịch chiết thân cây Mò hoa trắng khi pha loãng vẫn có tác dụng diệt khuẩn in vitro đối với 02 chủng vi khuẩn E. coli và Salmonella spp. Theo quan xát đường kính vòng vô khuẩn giảm dần khi nồng độ cao dịch chiết giảm. Đối với cả 02 chủng vi khuẩn thì ở nồng độ cao dịch chiết ở 391µg/ml là nồng độ nhỏ nhất vẫn còn khả năng diệt khuẩn in vitro (quan sát thấy vòng vô
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 41
khuẩn) ở các nồng độ nhỏ hơn đều không quan sát thấy vòng vô khuẩn tức không còn khả năng diệt khuẩn in vitro.