- Các dụng cụ thủy tinh dùng trong quá trình thí nghiệm gồm có: bình tam
3.4.2. Tác dụng diệt khuẩn in vitro của dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong
dung môi ethanol 35% trên E. coli chứa plasmid có gen kháng kháng sinh.
Việc chưa tuân thủ đúng nguyên tắc sử dụng kháng sinh là một trong những nguyên nhân dẫn đến hiện tượng kháng thuốc của các vi khuẩn gây bệnh. Hiện tượng vi khuẩn kháng lại kháng sinh hiện đang trở thành vấn đề lớn trên toàn thế giới (WHO, 2014). Vi khuẩn kháng thuốc không chỉ làm giảm thậm chí làm mất hiệu lực điều trị bệnh của vật nuôi và con người, mà còn làm ô nhiễm môi trường sống, ảnh hưởng đến chất lượng sống của cộng đồng. Các nhà nghiên cứu khẳng định việc nỗ lực tìm ra các chất kháng khuẩn mới nhằm thay thế kháng sinh là yêu cầu cấp thiết hiện nay (Rojas, 2003). Các chất có nguồn gốc thiên nhiên, dù được sử dụng dưới dạng truyền thống hay các dạng đã được tinh chế và chiết tách được đánh giá là một nguồn đáng kể cho việc tìm hiểu và khám phá ra các thuốc thay thế các chất hóa học tổng hợp (Cos, 2006). Thảo dược đang ngày càng chứng minh vai trò quan trọng của mình trong nền công nghiệp dược phẩm như là một giải pháp an toàn thay thế cho các thuốc hóa học tổng hợp (Mahesh et al., 2008; Nguyễn Thanh Hải, Bùi Thị Tho, 2013).
Chúng ta không thể hoàn toàn loại bỏ được hiện tượng kháng thuốc kháng sinh của vi khuẩn một khi chúng xuất hiện. Ngoài sự linh hoạt do đặc tính sinh học, vi khuẩn còn có khả năng bảo tồn sự đề kháng một khi gen kháng thuốc nằm trên nhiễm sắc thể của nó. Ngược lại, khi yếu tố di truyền liên quan đến đề kháng nằm trên plasmid nhất là plasmid tiếp hợp, vi khuẩn sẽ có khả năng truyền sự đề kháng này cho vi khuẩn khác cùng hay khác loài. Từ đó sự kháng kháng sinh gia tăng dần lên trong quần thể vi khuẩn.
Nhằm minh chứng cho vấn đề này, cũng như minh chứng cho việc sử dụng thảo dược nói chung và dịch chiết cây Mò hoa trắng nói riêng có khả năng diệt khuẩn in vitro đối với cả những chủng vi khuẩn có mang plasmid chứa gen kháng kháng sinh, chúng tôi tiến hành thí nghiệm sử dụng dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong dung môi ethanol 35% đối với 2 chung vi khuẩn E. coli chứa plasmid có gen kháng thuốc (E. coli Top 10 pJET 1.2/blunt kháng ampicillin và E. coli Top 10 pPS1 kháng kanamycin).
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 38
Kết quả kiểm tra tác dụng của dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong dung môi ethanol 35% trên E. coli chứa plasmid có gen kháng thuốc (E. coli Top 10 pJET 1.2/blunt kháng ampicillin và E. coli Top 10 pPS1 kháng kanamycin) cho thấy, dịch chiết có tác dụng diệt khuẩn mạnh đều đạt độ mẫn cao (đường kính vòng vô khuẩn >20mm) (Hình 3.6. C, D). Với vi khuẩn E. coli Top 10 pJET 1.2/blunt
kháng ampicillin cho đường kính vòng vô khuẩn (26mm) nhỏ hơn so với vi khuẩn
E. coli phân lập (30,67mm) nhưng vẫn đạt độ mẫn cảm cao. Với vi khuẩn E. coli Top 10 pPS1 kháng kanamycin lại có vòng vô khuẩn (35,00 mm) lớn hơn so với vi khuẩn E. coli phân lập (33,66mm), kết quả này phù hợp với công bố của tác giả Nguyễn Thanh Hải và Bùi Thị Tho (2013) khi sử dụng dịch chiết tỏi trên E. coli O44 và E. coli Top 10 pPS1.
Hình 3.7. Tác dụng diệt khuẩn in vitro của các dịch chiết thân cây Mò hoa trắng
(C- Vi khuẩn E. coli Top 10 pPS1 (kháng kanamycin); D- Vi khuẩn E. coli Top 10 pJET 1.2/blunt (kháng ampicillin); Dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong các dung môi: 1- ethanol 70%, 2- ethanol 35%, 3- axit axetic 5%, 4- axeton 70%; 5- Đối chứng DMSO)
Kết quả thí nghiệm cho thấy dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong dung môi ethanol 35% không chỉ có tác dụng diệt khuẩn in vitro tốt đối với 2 chủng vi khuẩn E. coli và Salmonella spp. gây bệnh viêm ruột tiêu chảy cho lợn con theo mẹ
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 39
mà còn có tác dụng diệt khuẩn in vitro tốt đối với cả những chủng E. coli mang plasmid có chứa gen kháng kháng sinh. Đây là một dẫn chứng khoa học, để một lần nữa chứng minh việc sử dụng các hợp chất có nguồn gốc thiên nhiên (thảo dược) nhằm thay thế sử dụng các loại kháng sinh trong phòng và trị bệnh trong thú y nhằm hạn chế cũng như chống lại sự kháng thuốc của vi khuẩn. Dựa trên kết quả nghiên cứu này chúng tôi sử dụng dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong điều trị thử nghiệm cho lợn con bị mắc bệnh viêm ruột tiêu chảy.