- Các dụng cụ thủy tinh dùng trong quá trình thí nghiệm gồm có: bình tam
3.4.1. Tác dụng diệt khuẩn in vitro của dịch chiết thân cây Mò hoa trắng đối vớ
vi khuẩn E. coli và Salmonella spp. phân lập được từ phân lợn con theo mẹ bị
viêm ruột tiêu chảy.
Sau khi thu được cao dịch chiết ở thí nghiệm trên, chúng tôi tiến hành pha cao dịch chiết bằng dung môi DMSO để cao dịch chiết đạt nồng độ 100mg/ml để tiến hành thí nghiệm, đánh giá khả năng diệt khuẩn của các loại cao dịch chiết trong các dung môi khác nhau.
Kết quả kiểm tra khả năng diệt khuẩn của các dịch chiết từ thân cây thu được ở nồng độ 100mg/ml cho thấy tất cả các loại dịch chiết đều thể hiện khả năng diệt khuẩn với đường kính vòng vô khuẩn từ 12,33 – 30,67mm đối với E. coli và 11,33 – 33,67mm đối với Salmonella spp. (Hình 3.5. A, B).
Dịch chiết sử dụng dung môi là ethanol 35% cho kết quả tốt nhất đối với cả hai vi khuẩn thử nghiệm đạt độ mẫn cảm cao với đường kính vòng vô khuẩn lần lượt là E .coli – 33,67mm và Salmonella spp. – 30,67 mm (Bảng 3.4).
Dịch chiết sử dụng dung môi aceton 70% ở nồng độ 100mg/ml cho tác dụng diệt khuẩn in vitro kém nhất trong 4 loại dung môi sử dụng với đường kính vòng vô khuẩn lần lượt là 12,33 mm và 11,33 mm cho vi khuẩn E. coli và Salmonella spp. (Bảng 3.4).
Dịch chiết sử dụng dung môi acid acetic 5% (một dung môi khá thông dụng khi chiết xuất dược liệu – dung môi giấm ăn) cung cho kết quả diệt khuẩn in vitro
đạt độ mẫn cảm trung bình với đường kính vòng vô khuẩn cho cả 02 chủng vi khuẩn thử nghiệm đều là 15mm (Bảng 3.4).
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 35
Khi sử dụng dung môi là ethanol ở nồng độ là 35% hay 70%, cao dịch chiết ở nồng độ 100mg/ml đều có khả năng diệt khuẩn in vitro đạt độ mẫn cảm cao đều có đường kính vòng vô khuẩn > 23mm.
Kết quả này đúng với nhận định về mầu sắc của thí nghiệm trên dịch chiết trong ethanol có mầu nâu sẽ có khả năng diệt khuẩn tốt hơn hai dung môi là axit acetic 5% và aceton 70% (cho dịch chiết chuyển dần sang mầu đen nhạt) (Hình 3.3).
Kết quả thí nghiệm về đánh giá khả năng diệt khuẩn in vitro và hiệu suất chiết của thân cây Mò hoa trắng cho thấy, dung môi ethanol là dung môi không chỉ cho hiệu suất chiết cao nhất mà còn có khả năng diệt khuẩn in vitro tốt nhất. Dung môi ethanol có thể hòa tan được các nhóm hoạt chất như: alkaloid, tinh dầu, nhựa, glycosid và ít hòa tan tạp chất. Dung môi ethanol không làm trương nở dược liệu như nước. Prashant Tiwari và cộng sự (2011), dung môi ethanol có khả năng hòa tan chọn lọc được các nhóm hợp chất như: flavonoid, polyphenol, polyacetylene, tannin, terpenoid, sterol, alkaloid. Bên cạnh đó dung môi ethanol là một dung môi thông dụng, một chất dễ thu nhận, ít độc hại, dễ mua, rẻ tiền nên sẽ có hiệu quả kinh tế cao.
Do đó chúng tôi sử dụng dung môi ethanol 35% để thu cao dịch chiết thân cây Mò hoa trắng để tiến hành các thí nghiệm tiếp theo.
Bảng 3.4. Tác dụng diệt khuẩn của các dịch chiết thân cây Mò hoa trắng in vitro
Vi khuẩn
Đường kính vòng vô khuẩn (mm)
DMSO
Dung môi chiết xuất Ethanol 70% Ethanol 35% Acid acetic 5% Aceton 70% E. coli 0 23,00 ± 1,00 30,67 ± 0,33 15,00 ± 1,00 12,33 ± 0,33 Salmonella spp. 0 25,00 ± 1,00 33,66 ± 0,33 15,00 ± 1,00 11,33 ± 0,33
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 36
Hình 3.5. Đường kính vòng vô khuẩn của dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong các dung môi khác nhau
Hình 3.6. Tác dụng diệt khuẩn in vitro của các dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong các dung môi khác nhau
(A- vi khuẩn E. coli; B- vi khuẩn Salmonella spp. Dịch chiết thân cây Mò hoa trắng trong các dung môi: 1- ethanol 70%, 2- ethanol 35%, 3- axit axetic 5%, 4- axeton 70%; 5- Đối chứng DMSO)
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 37