cam tại pH = 4-5. Sau đó đo mật độ quang ở bước sóng λ= 420nm. Xác định màu của cặp ion và nêu ảnh hưởng của pH đến kết quả phân tích. 2. Lấy 0,5 ml dung dịch novocain 0,1% định mức thành 10ml, sau đó chiết
bằng CHCl3và định mức thành 25 ml. Đo mật độ quang được D0= 0,848.Lấy 0,5ml dd novocain làm ương tự như trên đo được D= 0,728. Xác định nồng độ % của dung dịch mẫu novocain .
Bài làm:
1. Dung dịch đo quang có độ hấp thụ quang max ở b/s λ= 420nm ứng với ánhsáng tím nên theo đặc điểm của cặp màu phụ nhau ta có thể xác định được màu của cặp ion novocain-methyl da cam là màu vàng lục.
- Ảnh hưởng của pH đến kết quả phân tích:
. pH ổn định giúp các ion ko bị chuyển sang dạng phân tử, làm quá trình hình thành cặp ion ko xảy ra, quá trình chiết ko có hiệu quả.
. Khoảng đổi màu của methyl da cam là 3,1 – 4,4 nên pH phải giữ ổn định ở khoảng 4.
. Đồng thời ta cần methyl da cam tồn tại dạng anion có màu cam và novocain dạng cation ko màu nên pH giữ ở khoảng 4.
2. Áp dụng định luật Lambert-beer : D = . .
Ta có : Cx= C0. = 0,1 . 0,728/ 0,848 = 0,086 %
Câu 3: Fluoroquinoless là một họ kháng sinh có hoạt phổ rộng. Để định lượng nó trong sữa dê ta làm như sau :
- Pha động : acid octophotphoric 0,16% (pH =3) và 20ml acetonitril trong 1 lit
- Cột pha đảo , nhiệt độ cột 500C
- Detector huỳnh quang,
- Bước sóng 445nm
- Thể tích bơm mẫu : 20µl
Mẫu trước khi bơm vào hệ thống được chiết bằng dung môi chiết gồm: diclometan, 2-propanol và acid photphoric 0,3M.
Hãy giải thích:
- Tại sao lại sử dụng 2 hệ dung môi khác nhau( khi chiết và khi sắc ký)
- Biểu đồ thể hiện nồng độ và diện tích peak dạng ( hình vẽ) có phù hợp với lý thuyết đã học.
Bài làm:
- Sử dụng hệ 2 dung môi khác nhau khi chiết và khi sắc ký vì đây là 2 quá trình khác nhau, mục đính thực hiện khác nhau
+ Chiết nhằm chuyển chất phân tích và một số chất ko tan trong nước sang pha dd hữu cơ. Quá trình dựa vào tính tan khác nhau của các chất trong các dung môi
+ Sắc ký là quá trình tách riêng biệt các chất ra khỏi mẫu dựa vào sự tương tác khác nhau của các chất tan trong hỗn hợp với 2 pha tĩnh- động. Nên cần chọn hệ dung môi pha động thích hợp để làm tăng hiệu quả sắc ký.
- Biểu đồ phù hợp với lý thuyết đã học : . Dạng biểu đồ có dạng
Câu 4:
Để xác định dư lượng của Pb trong một loại thuốc đông y, người ta làm như sau : Cân 1,5 g mẫu , sau khi vô cơ hóa mẫu và chế hóa thu được 100ml dung dịch A. Lấy 50ml dd A đem đo sóng khếch tán được dòng giới hạn là 0,7