phương pháp tiến hành biến nạp dna plasmid vào tế bào vi khuẩn
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn ADN vào tế bào vi khuẩn Ecoli DH5a
Ngày tải lên :
07/04/2013, 21:46
... chiết plasmid, kiểm tra Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E.coly DH5α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn Ecoly DH5α Khả nạp Plasmid ... nghiên cứu 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Nhiễm sắc thể + CaCl2 + DNA plasmid Màng tế bào trở nên khả nạp sốc nhiệt ổn định tế bào Màng tế bào hồi phục plasmid bắt đầu chép Nhân ... ml 4.2.2 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 100µg/ ml Hình 4.5 Kết cấy vi khuẩn biến nạp đối chứng Biến nạp có tế bào khả nạp plasmid ( thể tích 30μl tế bào khả nạp) phục hồi 800μl...
- 74
- 2.7K
- 7
Hoàn thiện quy trình biến nạp đoạn dna vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5
Ngày tải lên :
27/10/2012, 10:53
... Giới thiệu tƣợng biến nạp Biến nạp phƣơng pháp đơn giản có để đƣa DNA tái tổ hợp vào tế bào Trong trƣờng hợp tế bào E coli biến nạp có nghĩa đƣa DNA plasmid vào tế bào Biến nạp đƣợc sử dụng với ... hạn vi khuẩn 13 Hình 3.1 Phản ứng tạo đầu (blunt-end) cho đoạn DNA 35 Hình 4.1 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn thể tích 10:1.5 38 Hình 4.2 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn ... thực khuẩn thể xâm nhiễm vào tế bào vi khuẩn sinh sôi nhờ máy sinh tổng hợp vi khuẩn Khi số lƣợng phage tăng lên đến hàng triệu sao, chúng phá vỡ tế bào vi khuẩn Nhƣng số trƣờng hợp, tế bào vi khuẩn...
- 23
- 1.3K
- 15
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coli DH5α
Ngày tải lên :
31/10/2012, 09:35
... chiết plasmid, kiểm tra Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E.coly DH5α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn Ecoly DH5α Khả nạp Plasmid ... nghiên cứu 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Nhiễm sắc thể + CaCl2 + DNA plasmid Màng tế bào trở nên khả nạp sốc nhiệt ổn định tế bào Màng tế bào hồi phục plasmid bắt đầu chép Nhân ... ml 4.2.2 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 100µg/ ml Hình 4.5 Kết cấy vi khuẩn biến nạp đối chứng Biến nạp có tế bào khả nạp plasmid ( thể tích 30μl tế bào khả nạp) phục hồi 800μl...
- 74
- 3.3K
- 15
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.Coly DH5α
Ngày tải lên :
16/11/2012, 16:15
... chiết plasmid, kiểm tra Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E.coly DH5α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn Ecoly DH5α Khả nạp Plasmid ... nghiên cứu 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Nhiễm sắc thể + CaCl2 + DNA plasmid Màng tế bào trở nên khả nạp sốc nhiệt ổn định tế bào Màng tế bào hồi phục plasmid bắt đầu chép Nhân ... ml 4.2.2 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 100µg/ ml Hình 4.5 Kết cấy vi khuẩn biến nạp đối chứng Biến nạp có tế bào khả nạp plasmid ( thể tích 30μl tế bào khả nạp) phục hồi 800μl...
- 74
- 2.5K
- 5
Tài liệu HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α pot
Ngày tải lên :
25/02/2014, 15:20
... Giới thiệu tƣợng biến nạp Biến nạp phƣơng pháp đơn giản có để đƣa DNA tái tổ hợp vào tế bào Trong trƣờng hợp tế bào E coli biến nạp có nghĩa đƣa DNA plasmid vào tế bào Biến nạp đƣợc sử dụng với ... hạn vi khuẩn 13 Hình 3.1 Phản ứng tạo đầu (blunt-end) cho đoạn DNA 35 Hình 4.1 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn thể tích 10:1.5 38 Hình 4.2 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn ... Thực tách chiết plasmid theo qui trình mục 3.4.6.1 38 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn B A C Hình 4.1 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn thể tích...
- 68
- 449
- 1
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 3 pptx
Ngày tải lên :
28/07/2014, 02:21
... Thực tách chiết plasmid theo qui trình mục 3.4.6.1 38 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn B A C Hình 4.1 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn thể tích ... đoạn 900bp; (C) Biến nạp plasmid chưa tái tổ hợp C 47 Kết biến nạp hoàn toàn plasmid tái tổ hợp vào vi khuẩn khuẩn lạc màu trắng tế bào vi khuẩn bị đột biến kháng kháng sinh tạo thành Còn đĩa đối ... agar/X-gal/IPTG, ủ qua đêm 370C 39 A B C D Hình 4.2 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn thể tích 3:0.5 (A )Biến nạp với tỷ lệ tế bào khả nạp plasmid theo thể tích (µl) 3:0.5 phục hồi 200µl môi...
- 22
- 492
- 0
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 2 doc
Ngày tải lên :
28/07/2014, 02:22
... phƣơng pháp sử dụng biến nạp 2.4.1 Chuẩn bị tế bào khả nạp Vi khuẩn vật chủ lý tƣởng cho vi c đƣa DNA tái tổ hợp vào biến chúng thành nhà máy sản xuất sản phẩm mà ta mong muốn Những ƣu điểm vi khuẩn ... tăng trƣởng tế bào chủ Trƣớc hết, biến nạp plasmid vào tế bào chủ, sau nuôi cấy tế bào chủ môi trƣờng chọn lọc thích hợp thu nhận sinh khối tế bào Quá trình tách chiết plasmid từ tế bào chủ công ... chuẩn bị tế bào E coli khả nạp, biến nạp plasmid vào tế bào theo phƣơng pháp hóa chất sốc nhiệt, sau ông đƣa công thức tính hệ số biến nạp N = A x10n x OV/PV 21 N: hệ số biến nạp, tính CFU/µg plasmid...
- 23
- 492
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 9 pptx
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... 39 4.2 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 43 4.2.1 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 60µg/ ml 43 4.2.2 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh ... Cách tiến hành 28 3.3.4 Chuẩn bị tế bào khả nạp .29 3.3.5 Biến nạp plasmid pBluescript vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α phƣơng pháp sốc nhiệt 30 3.3.6 Chọn lọc khuẩn ... plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E.coly DH5α kiểm tra .27 3.3.3 Xác định mật số vi khuẩn cách đo OD600nm kết hợp với phƣơng pháp đếm khuẩn lạc...
- 8
- 295
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 8 pptx
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... CaCl2 100mM lạnh vào hòa tan phần kết tủa Thêm 20μl glycerol 98% vào trữ -700C Biến nạp plasmid vào khả nạp Bƣớc 1: Hút 3µl dịch huyền phù tế bào competen cell đƣơc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ... đoạn DNA vào tế bào chủ DH5α Quy trình sử dụng cho thí nghiệm tạo dòng áp dụng trực tiếp phòng thí nghiêm Các bƣớc quy trình Chuẩn bị khả nạp Dịch tế bào chuẩn bị để làm khả nạp phải có mật độ tế ... thí nghiệm, chuyển đoạn DNA từ sản phẩm cắt vào tế bào, chuyển gen hoàn chỉnh vào tế bào chủ kiểm soát biểu của gen 59 Nếu trƣờng hợp không đủ hoá chất để tách chiết plasmid theo quy trình sử...
- 8
- 284
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 7 pdf
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... sản phẩm PCR vào plasmid ta đƣợc plasmid tái tổ hợp Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào vi khuẩn E.coly DH5α khả nạp, thu đƣợc kết nhƣ sau 52 a b Hình 4.16 Kết cấy vi khuẩn biến nạp plasmid tái tổ ... a Hình 4.17 Kết cấy vi khuẩn biến nạp plasmid tái tổ hợp với đoạn DNA 580bp môi trƣờng LB/amp/ X-gal/IPTG (a )Biến nạp với tỉ lệ tế bào khả nạp plasmid tái tổ hợpvới đoạn DNA 580bp theo thể tích ... chiết từ tỉ lệ biến nạp theo thể tích tế bào khả nạp plasmid :0.5 (lần 1), (DC1) plasmid gốc (chưa biến nạp) , (DC2, DC3) plasmid đối chứng từ sản phẩm tách chiết Kết hình cho thấy plasmid đƣợc...
- 8
- 333
- 2
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 6 doc
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... ml 4.2.2 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 100µg/ ml Hình 4.5 Kết cấy vi khuẩn biến nạp đối chứng Biến nạp có tế bào khả nạp plasmid ( thể tích 30μl tế bào khả nạp) phục hồi 800μl ... khả nạp mà không cần xác định giá trị OD 42 4.2 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 4.2.1 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 60µg/ ml a b c DC Hình 4.3 Kết cấy vi khuẩn ... vi khuẩn, khác biệt lớn thời gian biến nạp Vì vậy, lần biến nạp sau chọn sốc nhiệt 60 giây Mặc khác, đĩa đối chứng mọc nhiều khuẩn lạc nhƣng toàn khuẩn lạc trắng, đĩa có trang vi khuẩn biến nạp...
- 8
- 339
- 1
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 5 pot
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... vector DNA insert theo số mol Đổi từ số mol lượng (ng) phân tử DNA μg μg DNA = Kích thƣớc DNA (bp) fmole DNA x x 3000 fmol 1000 bp Từ lượng vector DNA tính lượng DNA chèn Vector (ng) x DNA chèn ... lệ DNA chèn (bp) (ng )DNA chèn = Vector (kb) Vector Căn vào tỉ lệ số mol vector DNA chèn dựa vào để tính lƣợng DNA cần sử dụng Thực phản ứng nối với thành phần nhƣ sau T4 reaction buffer 1µl DNA ... tế bào vi khuẩn E.coly DH5α khả nạp (theo quy trình Sambrook cộng sự, 1989 có chỉnh sửa) Thực biến nạp theo quy trình sau Hút 10µl dịch huyền phù tế bào competen cell đƣơc chuẩn bị cho vào eppendorf...
- 8
- 308
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 4 pps
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... Phƣơng pháp nghiên cứu 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Nhiễm sắc thể + CaCl2 + DNA plasmid Màng tế bào trở nên khả nạp sốc nhiệt ổn định tế bào Màng tế bào hồi phục plasmid ... chiết plasmid, kiểm tra Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E.coly DH5α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn Ecoly DH5α Khả nạp Plasmid ... nhƣng không cho DNA plasmid vào tế bào khả nạp để làm đối chứng Quy trình Hút 3µl dịch huyền phù tế bào khả nạp đƣợc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ml, thêm 0.5µl DNA plasmid vào, đảo nhẹ, giữ...
- 8
- 369
- 1
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 3 ppt
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... biến nạp DNA Cohen công (1973), thành công biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào vi khuẩn E.coly phƣơng pháp Calcium chloride Sambrook cộng (1989), đƣa phƣơng pháp chuẩn bị tế bào E.coly khả nạp, ... khả nạp, biến nạp plasmid vào tế bào theo phƣơng pháp hóa chất sốc nhiệt, sau ông đƣa công thức tính hệ số biến nạp N = A x10n x OV/PV N: hệ số biến nạp, tính CFU/µg plasmid DNA A: số khuẩn lạc ... nhiễm vào vi khuẩn Để tăng bội DNA phage ngƣời ta cho phage nhiễm vào vi khuẩn Các phage chứa DNA lạ sinh sản mạnh phá vỡ vi khuẩn Các vi khuẩn sau đƣợc trải thạch hộp petri 2.7 Các nghiên cứu biến...
- 8
- 308
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 1 pdf
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α” khoá luận tốt nghiệp 1.2 Mục tiêu đề tài Thiết lập quy trình chèn đoạn DNA vào plasmid pBluescipt chuyển đƣợc plasmid tái tổ hợp vào tế bào ... chặt vào ComK promoter, điều đảm bảo phiên mã xác nồng độ ComK thấp 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E.coly 2.3.1 Khái niệm biến nạp nhân tạo Biến nạp nhân tạo vi c đƣa đoạn DNA vào tế bào ... mục đích tăng cƣờng khả biến nạp, ngƣời ta thƣờng xử lý tế bào chủ phƣơng pháp hóa học hay vật lý Tế bào chủ sau đƣợc xử lý phƣơng pháp gọi tế bào khả nạp Tế bào E.coly tế bào chủ đƣợc sử dụng rộng...
- 8
- 499
- 1
Chuyển gen gfp vào tế bào vi khuẩn Pseudomanas fluorescens bằng phương pháp tiếp hợp ba thành phần
Ngày tải lên :
19/11/2012, 15:13
... Nhờ tế bào cho, sau truyền DNA cho tế bào nhận, không thay đổi chất hệ gen 2.2 Vách tế bào vi khuẩn Vách tế bào thành phần quan trọng tế bào, phần lớn các vi khuẩn có vách kín, giúp cho tế bào ... tố F đƣợc truyền cho tế bào nhận F- biến các tế bào Fthành tế bào F+ Tế bào F+ sau truyền yếu tố F cho tế bào F- tế bào F+ Hiện tƣợng tiếp hợp xảy tần số thấp F+ x FVi khuẩn 2F+ Hfr (High frequency ... chuyển sang vi khuẩn F-, tế bào F- không biến thành tế bào F+ Hiện tƣợng tiếp hợp xảy với tần số cao Hfr x F- Hfr F- Hình 2.5 Quá trình tiếp hợp vi khuẩn Hfr vi khuẩn F- 10 Vi khuẩn F’: vi khuẩn Hfr...
- 81
- 1.1K
- 9
Tài liệu CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN) VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens BẰNG PHƯƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN potx
Ngày tải lên :
25/02/2014, 15:20
... Nhờ tế bào cho, sau truyền DNA cho tế bào nhận, không thay đổi chất hệ gen 2.2 Vách tế bào vi khuẩn Vách tế bào thành phần quan trọng tế bào, phần lớn các vi khuẩn có vách kín, giúp cho tế bào ... tố F đƣợc truyền cho tế bào nhận F- biến các tế bào Fthành tế bào F+ Tế bào F+ sau truyền yếu tố F cho tế bào F- tế bào F+ Hiện tƣợng tiếp hợp xảy tần số thấp F+ x FVi khuẩn 2F+ Hfr (High frequency ... chuyển sang vi khuẩn F-, tế bào F- không biến thành tế bào F+ Hiện tƣợng tiếp hợp xảy với tần số cao Hfr x F- Hfr F- Hình 2.5 Quá trình tiếp hợp vi khuẩn Hfr vi khuẩn F- 10 Vi khuẩn F’: vi khuẩn Hfr...
- 81
- 575
- 0