kết quả kiểm tra thí nghiệm biến nạp sản phẩm nối giữa các gen ltb gp5m ltb gp3 và vector tách dòng pbt vào tế bào vi khuẩn e coli dh 5α
Hoàn thiện quy trình biến nạp đoạn dna vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5
Ngày tải lên :
27/10/2012, 10:53
... phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5 α khả nạp (theo quy trình Sambrook cộng sự, 1989 có chỉnh sửa) 37 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 4.1 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn ... chép tế bào chủ để làm phƣơng tiện mang gen, biến nạp gen, tăng gen, biểu gen hay thao tác khác gen Các cấu trúc DNA dùng cho mục tiêu gọi vector Vi c biến nạp DNA tái tổ hợp vào tế bào thích ... tài “ Hồn thiện quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E coli DH5 α” phát triển từ đề tài: “Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E coli DH5 α” Phạm Duy Huỳnh Văn Thái,...
- 23
- 1.3K
- 15
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coli DH5α
Ngày tải lên :
31/10/2012, 09:35
... trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5 α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn Ecoly DH5 α Khả nạp Plasmid Bluescript II SK (+/-) Sốc nhiệt Vi khuẩn mang plasmid Bluescript Đoạn DNA Chọn lọc khuẩn ... có glucose), lactose ln kết với repressor làm biến đổi hình thể repressor, repressor khơng ln kết với operator: operon Lac mở, RNA polymerase lyên kết với promoter trƣợt dài theo gen operon; mRNA ... đổi hoạt tính endonuclease nhằm làm tăng lƣợng plasmid tích luỹ tế bào Thông thƣờng ngƣời ta gây đột biến gen endA (endA-) gen mã hóa cho endonuclease I Vi c endonuclease làm tăng sản lƣợng plasmid...
- 74
- 3.3K
- 15
Tài liệu HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α pot
Ngày tải lên :
25/02/2014, 15:20
... primer T3, T7 Sơ đồ 3.3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E coli DH5 α kiểm tra 27 3.4.3 Tăng sinh vi khuẩn E coli DH5 α mơi trƣờng LB Từ dòng vi khuẩn E coli DH5 α gốc hút 20µl dịch vi khuẩn ... Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Vi khuẩn Ecoli Xử lí CaCl2 Sốc nhiệt 420C 45 giây Cấy lên đĩa Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn E coli Vi khuẩn E coli sau ... phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5 α khả nạp (theo quy trình Sambrook cộng sự, 1989 có chỉnh sửa) 37 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 4.1 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn...
- 68
- 449
- 1
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 3 pptx
Ngày tải lên :
28/07/2014, 02:21
... 38 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn B A C Hình 4.1 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn thể tích 10:1.5 (A) Biến nạp với tỷ lệ tế bào khả nạp plasmid ... Thực phản ứng phủ đầu cho sản phẩm PCR plasmid sau cắt HindIII, tinh sản phẩm, nối đoạn sản phẩm PCR vào plasmid Biến nạp plasmid nối vào vi khuẩn E coli DH5 α khả nạp, và thực tƣơng tự với plasmid ... 160C qua đêm, tinh trực tiếp sản phẩm cách sử dụng cột tinh GFX thu lại 3μl elution buffer 37 3.4.10 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E coli DH5 α khả nạp (theo quy trình Sambrook cộng sự,...
- 22
- 492
- 0
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 2 doc
Ngày tải lên :
28/07/2014, 02:22
... primer T3, T7 Sơ đồ 3.3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E coli DH5 α kiểm tra 27 3.4.3 Tăng sinh vi khuẩn E coli DH5 α mơi trƣờng LB Từ dòng vi khuẩn E coli DH5 α gốc hút 20µl dịch vi khuẩn ... Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Vi khuẩn Ecoli Xử lí CaCl2 Sốc nhiệt 420C 45 giây Cấy lên đĩa Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn E coli Vi khuẩn E coli sau ... số tế bào không tiếp nhận DNA plasmid 26 3.4.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E coli DH5 α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn E coli DH5 α Khả nạp Plasmid Bluescript II SK (+/-) Sốc nhiệt Vi khuẩn...
- 23
- 492
- 0
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.Coly DH5α
Ngày tải lên :
16/11/2012, 16:15
... trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5 α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn Ecoly DH5 α Khả nạp Plasmid Bluescript II SK (+/-) Sốc nhiệt Vi khuẩn mang plasmid Bluescript Đoạn DNA Chọn lọc khuẩn ... có glucose), lactose ln kết với repressor làm biến đổi hình thể repressor, repressor khơng ln kết với operator: operon Lac mở, RNA polymerase lyên kết với promoter trƣợt dài theo gen operon; mRNA ... đổi hoạt tính endonuclease nhằm làm tăng lƣợng plasmid tích luỹ tế bào Thông thƣờng ngƣời ta gây đột biến gen endA (endA-) gen mã hóa cho endonuclease I Vi c endonuclease làm tăng sản lƣợng plasmid...
- 74
- 2.5K
- 5
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 9 pptx
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... dùng thí nghiệm 25 3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu .26 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5 α kiểm tra ... 3.3.11 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coly DH5 α khả nạp 37 3.3.12 Kiểm tra kết chiết tách plasmid sử dụng enzym BamHI Hind III, thực phản ứng PCR plasmid với cặp primers (T3, T7) (ITS4, ... tƣợng biến nạp 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E. coly 2.3.1 Khái niệm biến nạp nhân tạo 2.3.2 Sự điều hoà gen operon Lac E. coly .5 2.3.3 Chuẩn bị tế bào khả nạp...
- 8
- 295
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 8 pptx
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... phần kết tủa Thêm 20μl glycerol 98% vào trữ -700C Biến nạp plasmid vào khả nạp Bƣớc 1: Hút 3µl dịch huyền phù tế bào competen cell đƣơc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ml, thêm 0.5µl DNA plasmid vào, ... agarose nồng độ 0.8% 30 phút để xem kết chiết tách 5.2 Đề nghị Tiếp tục hồn thiện quy trình theo điều kiện phòng thí nghiệm, chuyển đoạn DNA từ sản phẩm cắt vào tế bào, chuyển gen hoàn chỉnh vào tế ... Wolgang Schumann, 1995, Genetic Enginereering Techniques Các website http://faculty.plattsbuggh.edu/donald-slysh/transformation.html 12.http://www.mun.ca/Biochem/course/4103/topic/transrormation.html...
- 8
- 284
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 7 pdf
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... đầu cho đoạn DNA enzym Klenow Fragment không kiểm tra đƣợc phƣơng pháp điện di gel agarose, kết đƣợc kiểm tra chèn vào plasmid (đã đƣợc cắt tạo đầu bằng) biến nạp vào vi khuẩn Kết diện di (hình ... phản ứng nối 4.6 Kết biến nạp plasmid tái tổ hợp Thực phản ứng blunt-end sản phẩm PCR, tinh sản phẩm phản ứng blunt-end, nối đoạn sản phẩm PCR vào plasmid ta đƣợc plasmid tái tổ hợp Biến nạp plasmid ... plasmid enzym cắt giới hạn EcoRV EcoRV DC1 DC2 DC3 DNA plasmid 3.0kb Hình 4.12 Kết điện di sản phẩm cắt plasmid EcoRV gel agarose 0.8% (EcoRV) sản phẩm cắt enzym EcoRV plasmid tách chiết từ tỉ lệ biến...
- 8
- 333
- 2
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 6 doc
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... 4.2 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 4.2.1 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 60µg/ ml a b c DC Hình 4.3 Kết cấy vi khuẩn biến nạp sốc nhiệt 90 giây (a) biến nạp ... 4.2.2 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 100µg/ ml Hình 4.5 Kết cấy vi khuẩn biến nạp đối chứng Biến nạp có tế bào khả nạp khơng có plasmid ( thể tích 30μl tế bào khả nạp) phục hồi ... sau : DNA genome DNA plasmid 3.0kb 10 11 12 13 14 15 Hình 4.9 Sản phẩm tách chiết plasmid gel agarose 0.8% (lần 1) Mẫu số 1, 2, 3, 4, : sản phẩm tách chiết plasmid từ khuẩn lạc thu biến nạp tỉ lệ...
- 8
- 339
- 1
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 5 pot
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... lygase unit Thêm nƣớc 10µl Ủ phản ứng 220c giờ, tinh trực tiếp sản phẩm cách sử dụng cột tinh GFX thu lại 3μl elution buffer 3.3.11 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coly DH5 α khả nạp (theo ... lygase giảm xuống không ngừng xếp sản phẩm nối, nối bên ngồi phân tử đƣợc ngăn chặn, 36 có phản ứng nối vector- DNA insert phản ứng nối vector- vector xảy Cơ sở để tính tỉ lệ lƣợng vector DNA insert ... thêm vào cột lƣợng wash buffer với lƣợng capture buffer cho vào trên, ly tâm 10000 vòng /phút 30 giây 40C Bƣớc 6: Lấy cột đặt vào eppendoft 1.5ml Bƣớc 7: Hút elution buffer nhỏ vào cột GFX, tùy vào...
- 8
- 308
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 4 pps
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... plasmid ,kiểm tra Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5 α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn Ecoly DH5 α Khả nạp Plasmid Bluescript ... tế bào khả nạp đƣợc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ml, thêm 0.5µl DNA plasmid vào, đảo nhẹ, giữ lạnh đá 20 phút Chuyển nhanh eppendorf vào bồn nhiệt 420C, giữ 90 giây Chuyển nhanh eppendorf vào ... trắng Chiết tách plasmid Phản ứng PCR với primer T3, T7 Cắt plasmid BamHI, HindIII Sơ đồ 3.3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5 α kiểm tra 27 3.3.3 Xác định mật số vi khuẩn cách đo...
- 8
- 369
- 1
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 3 ppt
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... khuẩn Các phage chứa DNA lạ sinh sản mạnh phá vỡ vi khuẩn Các vi khuẩn sau đƣợc trải thạch hộp petri 2.7 Các nghiên cứu biến nạp DNA Cohen công (1973), thành công biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế ... lyệu làm thí nghiệm Vật lyệu dùng thí nghiệm vi khuẩn E. coly DH5 α plasmid pBluescirpt II SK (+/-), đoạn DNA thu đƣợc từ phản ứng PCR 3.2.1.1 Vi khuẩn E. coly DH5 α Chủng vi khuẩn đột biến, có thiếu ... polymerase (tổng hợp) 5’ exonuclease 5’ 3’, exonuclease (thủy giải) 3’ 5’ 3’ Enzym DNA fragment Klenow enzym DNA polymerase I bị cắt bỏ tiểu đơn vị nhỏ (nhờ protease), phần chịu trách nhiệm exonuclease...
- 8
- 308
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 1 pdf
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... có glucose), lactose ln kết với repressor làm biến đổi hình thể repressor, repressor khơng ln kết với operator: operon Lac mở, RNA polymerase lyên kết với promoter trƣợt dài theo gen operon; mRNA ... DNA có đầu Phản ứng nối vector DNA chèn Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào Kiểm tra thể biến nạp mơi trƣờng có chứa Ampicillyn, X-gal, IPTG Kiểm tra lại kết biến nạp đoạn gen phản ứng cắt, phản ... đổi hoạt tính endonuclease nhằm làm tăng lƣợng plasmid tích luỹ tế bào Thông thƣờng ngƣời ta gây đột biến gen endA (endA-) gen mã hóa cho endonuclease I Vi c endonuclease làm tăng sản lƣợng plasmid...
- 8
- 499
- 1
MỘT SỐ KIẾN NGHỊ VÀ GIẢI PHÁP NÂNG CAO HIỆU QUẢ KIỂM TRA THỐNG KÊ CHẤT LƯỢNG SẢN PHẨM
Ngày tải lên :
23/10/2013, 08:20
... chất lượng sản phẩm, cải tiến nâng cao chất lượng sản phẩm Nâng cao công tác kiểm tra thống kê chất lượng sản phẩm Để kiểm tra thống kê chất lượng sản phẩm tốt, Cơng ty tiến hành thực quản lý chất ... - Cần động vi n người lao động sản xuất để tạo sản phẩm tốt Tạo không khí hăng say làm vi c, sáng tạo dám đưa nhiều phương án sản xuất sản phẩm để tìm quy trình sản xuất, kiểm tra chất lượng ... lượng theo phương pháp quản lý theo quy trình Mơ hình quản lý theo q trình sau1: Mơ hình: Chu trình quản lý theo q trình hoạt động Lập KH kiểmtra T ổchức Lãnh đạo -Lập kế hoạch: dựa vào kế hoạch...
- 8
- 737
- 1
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn ADN vào tế bào vi khuẩn Ecoli DH5a
Ngày tải lên :
07/04/2013, 21:46
... trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5 α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn Ecoly DH5 α Khả nạp Plasmid Bluescript II SK (+/-) Sốc nhiệt Vi khuẩn mang plasmid Bluescript Đoạn DNA Chọn lọc khuẩn ... có glucose), lactose ln kết với repressor làm biến đổi hình thể repressor, repressor khơng ln kết với operator: operon Lac mở, RNA polymerase lyên kết với promoter trƣợt dài theo gen operon; mRNA ... đổi hoạt tính endonuclease nhằm làm tăng lƣợng plasmid tích luỹ tế bào Thông thƣờng ngƣời ta gây đột biến gen endA (endA-) gen mã hóa cho endonuclease I Vi c endonuclease làm tăng sản lƣợng plasmid...
- 74
- 2.7K
- 7