... vector táitổhợp gọi là dòng tái tổ hợp. Dòng táitổhợp đƣợc phân lập để lƣu trữ DNAtáitổhợp hoặc dùng cho các thao tác trên gen. Toàn bộ quá trình trên gọi là tạo dòng DNA hay DNA cloning. ... biến nạp DNAtáitổhợp vào một tế bào thích hợp sẽ cho phép vector có khả năng tồn tại ổn định và sao chép độc lập với bộ gen của tế bào. Tế bào có khả năng tiếp nhận vector táitổhợp gọi ... DNA μg DNA = fmole DNA x x Từ lượng của vector DNA tính ra lượng của DNA chèn (ng )DNA chèn = Căn cứ vào tỉ lệ về số mol giữa vector và DNA chèn rồi dựa vào đó để tính ra lƣợng DNA...
... bath).II. Các enzyme trùng hợp 1. DNA polymerase (DNA- dependent DNA polymerase) DNA polymerase được dùng để tổng hợpDNA trong cơ thể hoặc trong điều kiện in vitro.1.1. DNA polymerase I của E. ... tạo ra đoạn DNA tổng hợp thông qua nhiều vòng khuếch đại PCR. Khả năng tạo ra DNA tổng hợp có nhiều ứng dụng tùy thuộc vào thiết kế của chúng ta. Người ta có thể thiết kế một gen tổng hợp cóchứa ... RNA :DNA mà không cắt DNA hoặc RNA không ở trong thể lai, enzyme này thường được dùng để phá hủy khuôn mẫu RNA saukhi tổng hợp sợi cDNA thứ nhất bằng phiên mã ngược, để tiếp tục tổng hợp sợi cDNA...
... cho kỹ thuật DNAtáitổhợp sau này. Nối sai Nối sai DNA sẽ được xen vào DNA được cắt vớiEcoRICác đầu dính Tái tổhợpDNA + DNA ligase DNA tái tổ hợp Hình 10.3 Hai phân tử DNA khác nhau ... dụng trong kỹ thuật di truyền 2.1. DNAtáitổhợp là gì? DNAtáitổhợp (recombinant DNA) là phân tử DNA được tạo ra trong ống nghiệm bằng cách kết hợp các DNA từ các nguồn (loài) khác nhau, ... phân tử DNAtáitổhợp in vitro 263 D.Kaiser (1972), và D.Jackson và P.Berg (1972) II. Tạo dòng gene hay DNAtáitổhợp 1. Nguyên tắc chung Về nguyên tắc, kỹ thuật DNAtáitổhợp hay...
... mapping). 2. Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA Đoạn DNA được tổng hợp dựa trên khuôn mẫu mRNA được gọi là cDNA (complementary DNA) . banhư sau: - .- - 2 (Mg2+. - . mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th E. ... DNA) dùng trong kỹ thuật táitổhợp DNA. 2. Các vector được dùng để tạo dòng các đoạn DNA in vitro5’-PO4. . Trong thực tế, các đoạn DNA được gắn với nhau để tạo ra phân tử DNA táitổ ... đúng plasmid táitổ hợp. Vì vậy, việc xác định đúng các dòng vi khuẩn chứa plasmid táitổhợp phải mất nhiều công sức. Có ba phương thức chính để xác định các dòng DNA táitổhợp là lai khuẩn...
... mapping). 2. Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA Đoạn DNA được tổng hợp dựa trên khuôn mẫu mRNA được gọi là cDNA (complementary DNA) . banhư sau: - .- - 2 (Mg2+. - . mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th E. ... đúng plasmid táitổ hợp. Vì vậy, việc xác định đúng các dòng vi khuẩn chứa plasmid táitổhợp phải mất nhiều công sức. Có ba phương thức chính để xác định các dòng DNA táitổhợp là lai khuẩn ... khuẩn thích hợp hơn cho mục đích này và có thể thu được hiệu suất 109 thể biến nạp/µg plasmid. IV. Chọn dòng mang DNAtáitổhợp Trong thí nghiệm tạo vector táitổ hợp, hỗn hợp vector và...
... phân tử DNA khác nhau được cắt bởi cùng một enzyme giới hạn EcoRI tạo ra các đầu dính bổ sung nhau, bằng cách đó có thể khâu nối thành phân tử DNAtáitổhợp in vitro nhờ xử lý với DNA ligase. ... như thế sẽ được nối với nhau bởi DNA ligase của vi khuẩn. Cơ sở của phương pháp kết hợp DNA này được thực hiện lần đầu tiên giữa DNA của virus SV40 với DNA của phage l bởi L.Lobban và D.Kaiser ... và D.Jackson và P.Berg (1972) S.Cohen đã tạo ra được phân tử DNAtái tổ hợp gồm vector là plasmid nhỏ pSC101 của E. coli và DNA ''ngoại lai'' là một plasmid khác. Chính...
... 1,0àlTổng thể tích V = 15àlHỗn hợp phản ứng đợc ủ ở 4oC qua đêm.22Hình 12. ảnh điện di sản phẩm cắt plasmid táitổhợp bằng 2 enzym BamHI + SacIGhi chú: 1: Sản phẩm cắt plasmid táitổ hợp; ... táitổhợp mang cấu trúc 35S/GlyP/NOS vào tế bào khả biến E. coli DH5.Vectơ táitổhợp đợc đa vào tế bào E. coli khả biến bằng phơng pháp sốc nhiệt ( mục2.2.7). Khi biến nạp có các trờng hợp ... vaccine táitổ hợp. Vaccine táitổhợp không đợc sản xuất theo cách thông thờng, chúng đợc sản xuất ra từ một loại cơ thể sống có thể đợc xem là hoàn toàn vô hại. Để tạo ra đợc một loại vaccine tái...
... vector táitổhợp pET21a+/SEB vào tế bào khả biến E. coli DH5α Kết quả thu được cho thấy trên đĩa thạch có nhiều khuẩn lạc phát triển, nhưng không biết khuẩn lạc nào mang vector táitổ hợp. ... học hiện đại có khả năng tạo ra các protein táitổhợp ứng dụng trong nhiều lĩnh vực trong đó có y sinh học. Biểu hiện gen seb thành protein tái tổhợp không độc phục vụ nghiên cứu tạo vaccine ... lạc. Ở nhiệt độ cao 94oC đến 95oC, màng tế bào bị phá vỡ, giải phóng plasmid táitổ hợp. Plasmid táitổhợp sẽ làm khuôn cho phản ứng PCR nhân gen bằng cặp mồi đặc hiệu, hoặc mồi vector....
... phóng xạ. Nếu cDNA đã tổhợp đúng với vector thì sẽ thấy dưới băng DNA ở trên vị trí của arm -DNA (DNA đã tổ hợp có khối lượng phân tử bằng tổng khối lượng phân tử của arm -DNA và cDNA còn sót ... lượng cDNA được tổng hợp trong số DNA tổng số. Giả định trong cDNA các loại dNTP được thu nạp một cách đồng đều thì lượng cDNA được tổng hợp là 5 µl × 10 mM × Y/X × 350 × 4; trong đó 5 µl là tổng ... bromide (bên cạnh DNA MW marker).6) Chọn các phân đoạn chứa cDNA có độ lớn thích hợp. 3.9. Tổhợp vào vector1) Xác định trước khối lượng phân tử của cDNA. Làm phản ứng tổhợp vào vector trong...
... cấu tổ chức quản lí: Tổ hợp tác Hồng Hà có một bộ máy tổ chức rất năng động, về bộ máy tổ chức tổhợp tác Hồng Hà hiện có ban quản lí và các thành viên giúp việc.- Ban quản lí gồm :+ 1 tổ ... thị trờng và Maketting.Có thể tóm tắt sơ đồ bộ máy tổ chức sản xuất của tổhợp tác Hồng Hà bằng sơ đồ sau: Sơ đồ3: Bộ máy tổ chức của tổhợp Hồng Hà21Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn ... hàng hoá của tổ hợp. Sau khi đà có tín nhiệm, họ đà cxó các hợp đông mua bán các sản phẩm của tổ hợp. Phơng thức giao hàng và thời hạn thanh toán đợc hai bên thoả thuận rõ trong hợp đồng. Hàng...
... protein táitổhợp MBP-VT2eB. -VT2eB Tiến hành định tính kháng huyết thanh bằng phƣơng pháp kết tủa khuyếch tán trên thạch với kháng nguyên là protein táitổhợp MBP-VT2eB ... gen kháng nguyên kích thích sinh ra. Dựa trên hiện tƣợng này, ngƣời ta tạo ra vacxin DNA bằng cách tái tổ hợp gen kháng nguyên của một plasmid vectơ với một hệ thống promotor mạnh. Loại kháng ... DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN MBP-VT2eB TRÊN HEO” Giáo viên hƣớng dẫn: TS. Nguyễn Ngọc Hải Sử dụng kháng nguyên là protein táitổhợp MBP-VT2eB pha trong keo phèn với liều 50µg/heo và 75µg/heo có lập...