baøi 2 kỹ thuật pcr polymerase chain reaction

... khuôn: 45-60oC, 30-60 giây Phản ứng kéo dài chuỗi: 72oC, 60 giây/1kb bước hình thành chu kỳ Phản ứng PCR tiến hành khoảng 25 -40 chu kỳ Trong kỹ thuật PCR thông thường người ta thực bước biến tính ADN ... chu kỳ Bước thư ờng thực 94-95oC, 2- 3 phút Phản ứng PCR - bước bắt cặp mồi vào sợi khuôn 3 45 - 60C 3 Phản ứng PCR - bước kéo dài chuỗi 3 72C 5 5 Phản ứng PCR - sản phẩm hình thành sau bước ... DNG CA K THUT PCR Nhõn phõn t RNA bng k thut PCR Cn cú cỏc on mi kt hp c vi khuụn RNA, sau ú tng hp cỏc phõn t DNA nh enzyme reverse trancriptase theo k thut PCR Enzyme Tth DNA -polymerase cú...

Ngày tải lên: 08/12/2015, 01:38

... bản, phiên mã dịch mã Trong số tiến kỹ thuật góp phần tạo bùng nổ lĩnh vực sinh học phân tử phải kể tới kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction) Kỹ thuật PCR Kary Mullis đề suất vào năm 1985, ... biệt 21 - Real – Time PCR đánh giá tích lũy sản phẩm định lượng qPCR (quantitative PCR – PCR định lượng) Ngoài số kỹ thuật PCR khác nữa… VIII RT – PCR Như biết, PCR kỹ thuật nhân bội ADN mạch ... transcriptase PCR) gọi RNA – PCR hay RT – PCR RT – PCR nhạy phương pháp khác dùng cho phân tích ARN - RT – PCR cạnh tranh (Competitive RT – PCR) kỹ that thường dùng định lượng loại mARN chuyên biệt 21 -...

Ngày tải lên: 24/04/2013, 15:41

... O1, O2, O4, O5, O6, O18, O 22, O23, O25, O26, O38, O39, O45, O48, O50, O55, O73, O75, O 82, O84, O91, O100, O103, O104, O111, O113, O114, O115, O117, O118, O119, O 121 , O 125 , O 126 , O 128 ab, O1 32, O145, ... (ng) Shiga 1,0 27 VT1 1,0 30 VT2 0,75 VT2vh 2, 7 VT2vp 22 VT2vp 20 55 Ghi : CD50 (ñơn v tính): Li u gây ñ c 50% t bào Vero LD50 (ñơn v tính): Li u gây ch t 50% chu t thí nghi m 1.4 .2. 2 Gen eae (giúp ... Tên b ng Trang 2. 1 Trình t m i dùng ñ xác ñ nh gen VT1, VT2 eae 36 2. 2 Thành ph n ch t ph n ng PCR dùng ñ xác ñ nh gen VT1, VT2 eae 37 2. 3 Các chu kỳ nhi t c a ph n ng PCR dùng ñ xác...

Ngày tải lên: 27/11/2013, 22:18

... BCR-ABL b2a2 19 32, 20 BCR-ABL b3a2 26 44,07 BCR-ABL b2a2 + b3a2 14 23 ,73 83 Bằng kỹ thuật RT -PCR, gen tổ hợp BCR-ABL xuất máu ngoại biên 59/60 bệnh nhân: 19 người mang BCR-ABL b2a2 ( 32, 20%); 26 người ... 82 2 .2. 2 Kỹ thuật xét nghiệm Máu toàn phần trích ly RNA với thuốc thử chuẩn hoá Chomczynski [2] Khuếch đại týp gene tổ hợp BCR-ABL b2a2 b3a2 kỹ thuật RT -PCR (Reverse Transcription -Polymerase Chain ... b2a2 BN.số 58 b2a2 = 29 1.000 copies /ml 3 ,2, 1 DRADNATS Hình M u có phát hi n nhi m s c th Philadelphia v i s chuy n o n v trí b2a2 SUG 2a2b ị đ ể ự ể ắ ễ ệ ẫ Ở hình diện 03 đường chuẩn S1, S2,...

Ngày tải lên: 23/07/2014, 00:21

... 32. 768 18 65.536 19 131.0 72 4 20 26 2.144 21 524 .28 8 16 22 1.048.567 32 23 2. 097.1 52 64 24 4.194.304 128 25 8.388.608 10 25 6 26 16.777 .21 6 11 5 12 27 33.544.4 32 12 1. 024 28 67.108.864 13 2. 048 29 ... khỏc nh PCR t (Nested -PCR) , ADN nhỏnh (Branch-DNA), PCR a thnh phn (multiplex -PCR) , PCR ngc (Reverse -PCR) , RAPD -PCR vv nhng tt c u da trờn nguyờn tc ca phn ng PCR PCR t: t c mc nhy cm cao PCR, ... K THUT PCR (Polymerase Chain Reaction) I M U: K thut PCR (vit tt t ch Polymerase Chain Reaction) , hay cũn gi l phn ng tng hp dõy chuyn nh polymerase hoc phn ng chui tng...

Ngày tải lên: 26/07/2014, 17:20

... SMN TLN % SMN TLN % Thành phố Huế (50 mẫu) SMN TLN % 12 24 12 14 28 15 30 10 9 20 18 12 18 12 24 12 10 16 12 22 19 12 15 44 38 24 18 30 10 12 18 SMN: số mẫu nhiễm 38 TLN: tỷ lệ nhiễm Chúng nhận ... giản PCR chép lặp lại nhiều lần đoạn chuỗi ADN kép với tham gia hai mồi xuôi ngược giúp nhận diện có mặt ADN xúc tác Taq polymerase/ MgCl2, loại dNTP [31] 2. 10 .2 Nguyên tắc kỹ thuật PCR Tất ADN polymerase ... trùng phân lập - Sử dụng kỹ thuật PCR (polymerase chain reaction) để phát số loài cầu trùng có phân gà 3 .2 Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu 3 .2. 1 Nguyên liệu nghiên cứu 3 .2. 1.1 Mẫu bệnh phẩm Oocysts...

Ngày tải lên: 01/10/2014, 16:59

... bản, phiên mã dịch mã Trong số tiến kỹ thuật góp phần tạo bùng nổ lĩnh vực sinh học phân tử phải kể tới kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction) Kỹ thuật PCR Kary Mullis đề suất vào năm 1985, ... chuyên biệt - Real – Time PCR đánh giá tích lũy sản phẩm định lượng qPCR (quantitative PCR – PCR định lượng) Ngoài số kỹ thuật PCR khác nữa… B RT – PCR Như biết, PCR kỹ thuật nhân bội ADN mạch ... phận tỏa nhiệt thiết bị có ảnh hưởng lớn đến trình khuyếch đại V Nguyên tắc kỹ thuật PCR Kỹ thuật PCR (polymerase chain reaction) phương pháp tổng hợp DNA dựa mạch khuôn trình tự đích DNA ban đầu,...

Ngày tải lên: 26/06/2015, 08:29

... bản, phiên mã dịch mã Trong số tiến kỹ thuật góp phần tạo bùng nổ lĩnh vực sinh học phân tử phải kể tới kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction) Kỹ thuật PCR Kary Mullis đề suất vào năm 1985, ... Nguyễn Bá Lộc - Real – Time PCR đánh giá tích lũy sản phẩm định lượng qPCR (quantitative PCR – PCR định lượng) Ngoài số kỹ thuật PCR khác nữa… RT – PCR Như biết, PCR kỹ thuật nhân bội ADN mạch kép ... dụng kỹ thuật PCR 19 8.1 PCR việc chẩn đoán bệnh di truyền 19 8.1.1 Đột biến xen/mất đoạn .19 8.1 .2 Đột biến điểm 20 8 .2 Tách dòng sản phẩm PCR 21 RT – PCR ...

Ngày tải lên: 26/06/2015, 08:29

Ngày tải lên: 21/06/2016, 21:52

Ngày tải lên: 04/12/2016, 19:29

... trường 30 T T 2. 1 .2. 1.Hoá chất 30 T T 2. 1 .2. 2.Môi trường 32 T T 2. 1.3.Nguyên vật liệu 33 T T 2. 2.PHƯƠNG PHÁP 34 T T 2. 2.1.Phương pháp thu xử ... 34 T T 2. 2 .2. Pha loãng mẫu 34 T T 2. 2.3.Đồng mẫu 34 T T 2. 2.4.Xác định mẫu âm tính 35 T T 2. 2.5.Định lượng Clostridium perfringens 35 T T 2. 2.6.Phương ... 2. 2.10.Điều kiện phản ứng PCR 39 T T 2. 2.11.Phân tích sản phẩm PCR điện di gelagarose 39 T T 2. 2. 12. Khảo sát điều kiện tối ưu phản ứng PCR 39 T T 2. 2.13.Khảo sát thời gian tăng...

Ngày tải lên: 02/12/2015, 17:33

... tia UV bước sóng phù hợp 2. 2 .2 Quy trình phân tích mẫu kỹ thuật PCR phương pháp truyền thống 2. 2 .2. 1 Qui trình phân tích mẫu kỹ thuật PCR a Kiểm Salmonella - Đồng 25 g mẫu 22 5ml mơi trường tăng sinh ... năm 20 01 đến 20 06 thống kê sau: Bảng 1.4 Thống kê tình hình ngộ độc thực phẩm TP HCM từ năm 20 01 đến 20 06 Thống kê Năm thống kê Tình hình ngộ độc thực phẩm TP HCM 20 01 20 02 2003 20 04 20 05 20 06 29 ... 2. 2 .2. 2 Quy trình phân tích mẫu phương pháp truyền thống a Kiểm Salmonella: theo TCVN 4 829 :20 01 - Đồng 25 g mẫu 22 5ml mơi trường tăng sinh, ủ 37oC từ 18 - 22 Chuyển sang mơi trường RV, ủ 42oC /24 ...

Ngày tải lên: 16/03/2013, 09:26

... Hà nội, Năm 20 04 PCR (Polymerase chain reaction) I Những kiến thức PCR PCR từ viết tắt cụm từ Polymerase Chain Reaction tiếng Anh Có nhiều cách dịch cho cụm ... ví dụ sau 32 chu kỳ số lợng ADN PCR 1.073.741. 824 IV Cách tiến hành phản ứng PCR PCR kỹ thuật phòng thí nghiệm tơng đối dễ làm, kỹ thuật đa ứng dụng rộng rãi Vật liệu khởi đầu cho PCR ADN có ... Mẫu Marker Marker 1018 1018 545 481 529 529 497 449 449 497 433 517 506 517 506 396 344 29 8 22 0 20 1 154 134 396 334 29 8 27 PCR sức khoẻ ngời dự án hệ gen ngời PCR nhanh chóng trở thành công cụ...

Ngày tải lên: 19/02/2014, 10:05

... polymerase Các dạng khác PCR: - RT PCR (reverse transcriptase PCR) : RNA  cDNA  DNA - RT – PCR (Realtime PCR – PCR định lượng): xác định hàm lượng sản phẩm PCR tạo thời điểm Nguyên tắc: xác ... 2 Phản ứng PCR:  Thành phần phản ứng: - DNA mẫu - Mồi xuôi mồi ngược - dNTP (gồm loại: dATP, dGTP, dTTP, dCTP) - MgCl2 - Enzyme polymerase (Taq polymerase, Pfu…) - Dung ... ứng: dNTP: thường sử dụng nồng độ 20 -20 0 µM loại Mg2+:  hiệu nhân giảm nhiều  tạo sản phẩm không đặc hiệu  Số lượng chu kỳ: không vượt 40 Ứng dụng phương pháp PCR - Tạo số lượng lớn DNA  dòng...

Ngày tải lên: 04/07/2014, 03:20