bài 1 công nghệ dna tái tổ hợp

... 5 .1 Các loại đệm dùng phản ứng cắt DNA : - (H) - (M) - (L) Công nghệ DNA tái tổ hợp ( o - -20 o 1. 2 NaCl MgCl2 Dithiothreitol (mM) (mM) (mM) (mM) 10 10 50 10 10 10 0 Cao Tris.HCl pH 7,5 50 10 ... BstXI : 1Công nghệ DNA tái tổ hợp o /50 C XbaI /37oC EcoRI /37oC 10 mM L( - - hai -20oC (hoặc -80oC (ice bath) II Các enzyme trùng hợp DNA polymerase (DNA- dependent DNA polymerase) DNA polymerase ... Exonuclease 5’ pNOH dsDNA lai RNA :DNA + 5’pN(pN)npNOH + ssDNA Mg2+ làm mẫu dò E coli 3’ 5’ Công nghệ DNA tái tổ hợp ) C 5’ 3’ DNA polymerase DNA enzyme DNAOH + ndNTP DNA- (pdN)n + nPPi 2+ Mg...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... Lời nói đầu Công nghệ DNA tái tổ hợp (còn gọi kỹ thuật di truyền hay kỹ thuật gen) phận quan trọng công nghệ chìa khóa (key technology) lĩnh vực công nghệ sinh học Công nghệ DNA tái tổ hợp đời sở ... sinh học phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp giúp sinh viên tiếp cận thêm lĩnh vực khác công nghệ sinh học thông qua ... cân hợp dNTP Công ngh DNA tái t h.p đầu 3’ + Tổng hợp sợi thứ hai cDNA tạo dòng cDNA + Tổng hợp DNA sợi đôi từ khuôn mẫu sợi đơn phát sinh đột biến in vitro 1. 3 DNA...

Ngày tải lên: 31/03/2013, 23:31

... Lời nói đầu Công nghệ DNA tái tổ hợp (còn gọi kỹ thuật di truyền hay kỹ thuật gen) phận quan trọng công nghệ chìa khóa (key technology) lĩnh vực công nghệ sinh học Công nghệ DNA tái tổ hợp đời sở ... sinh học phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp giúp sinh viên tiếp cận thêm lĩnh vực khác công nghệ sinh học thông qua ... bacteriophage λ Công nghệ DNA tái tổ hợp (DNA recombinant technology) Hệ thống phương pháp phòng thí nghiệm cho phép cắt đoạn DNA từ sinh vật để ghép nối vào DNA sinh vật khác tạo phân tử DNA tái tổ hợp...

Ngày tải lên: 16/08/2013, 21:56

... thương mại phát triển công nghệ DNA tái tổ hợp dược phẩm dùng điều trị bệnh rối loạn người Năm 19 79, Tổ hợp Eli Lilly bắt đầu sản xuất thương mại insulin người công nghệ DNA tái tổ hợp Trước thời điểm ... thời gian dài trước dùng kết phát tín hiệu lai nhanh 32 VI Các ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp có nhiều ứng dụng đời sống Các ứng dụng bao gồm sản xuất dược phẩm loại ... phage Genome tái tổ hợp phage λ sau đóng gói vỏ protein bổ sung vào E coli Các phage λ gây xâm nhiễm DNA tái tổ hợp chúng vào tế bào vật chủ, nơi tái Chỉ đoạn DNA có kích thước thích hợp mang gen...

Ngày tải lên: 05/10/2013, 19:20

... truyền 2 .1 DNA tái tổ hợp gì? DNA tái tổ hợp (recombinant DNA) phân tử DNA tạo ống nghiệm cách kết hợp DNA từ nguồn (loài) khác nhau, theo quy trình kỹ thuật định, gọi kỹ thuật tái tổ hợp DNA Thông ... trường hợp đó, tế bào chuyên sản xuất insulin trì tái sử dụng với hiệu kinh tế cao IV Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp với việc nghiên cứu gene Việc tách dòng tái tổ hợp ... bảng 10 .1) đoạn DNA nối đầu dính đầu dính đầu dính + DNA ligase DNA tái tổ hợp Hình 10 .1 Enzyme giới hạn (EcoRI) cắt DNA khác nhau, nhờ kiến tạo phân tử DNA tái tổ hợp in vitro (bắng enzyme DNA...

Ngày tải lên: 23/10/2013, 16:20

... dòng mang DNA tái tổ hợp Trong thí nghiệm tạo vector tái tổ hợp, hỗn hợp vector lượng lớn phân tử DNA cắt enzyme hạn chế gắn lại với enzyme DNA ligase Kết quả, hỗn hợp có plasmid tái tổ hợp lẫn ... Nhập môn Công nghệ sinh học 32 (physical mapping) Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA Đoạn DNA tổng hợp dựa khuôn mẫu mRNA gọi cDNA (complementary DNA) ba sau: - (Mg2+ - mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th ... mang đoạn DNA ngoại lai (foreign DNA) dùng kỹ thuật tái tổ hợp DNA Các vector dùng để tạo dòng đoạn DNA in vitro 5’-PO4 Trong thực tế, đoạn DNA gắn với để tạo phân tử DNA tái tổ hợp thường...

Ngày tải lên: 11/12/2013, 15:15

... dòng mang DNA tái tổ hợp Trong thí nghiệm tạo vector tái tổ hợp, hỗn hợp vector lượng lớn phân tử DNA cắt enzyme hạn chế gắn lại với enzyme DNA ligase Kết quả, hỗn hợp có plasmid tái tổ hợp lẫn ... Nhập môn Công nghệ sinh học 32 (physical mapping) Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA Đoạn DNA tổng hợp dựa khuôn mẫu mRNA gọi cDNA (complementary DNA) ba sau: - (Mg2+ - mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th ... mang đoạn DNA ngoại lai (foreign DNA) dùng kỹ thuật tái tổ hợp DNA Các vector dùng để tạo dòng đoạn DNA in vitro 5’-PO4 Trong thực tế, đoạn DNA gắn với để tạo phân tử DNA tái tổ hợp thường...

Ngày tải lên: 13/12/2013, 01:16

... truyền 2 .1 DNA tái tổ hợp gì? DNA tái tổ hợp (recombinant DNA) phân tử DNA tạo ống nghiệm cách kết hợp DNA từ nguồn (loài) khác nhau, theo quy trình kỹ thuật định, gọi kỹ thuật tái tổ hợp DNA Thông ... trường hợp đó, tế bào chuyên sản xuất insulin trì tái sử dụng với hiệu kinh tế cao IV Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp với việc nghiên cứu gene Việc tách dòng tái tổ hợp ... bảng 10 .1) đoạn DNA nối đầu dính đầu dính đầu dính + DNA ligase DNA tái tổ hợp Hình 10 .1 Enzyme giới hạn (EcoRI) cắt DNA khác nhau, nhờ kiến tạo phân tử DNA tái tổ hợp in vitro (bắng enzyme DNA...

Ngày tải lên: 25/01/2014, 19:20

... DNA tái tổ hợp dùng để thiết lập ngân hàng gen, cDNA tổng hợp protein, enzyme, hormone, Hình 1. 1 Cấu tạo phân tử DNA tái tổ hợp 1. 3 Quy trình tạo DNA tái tổ hợp Quy trình công nghệ tạo DNA tái ... phân tử DNA tái tổ hợp từ loài khác nhau, có nhiều ưu điểm biến nạp tế bào chủ Và từ đây, công nghệ DNA tái tổ hợp đời Hình 2 .1 Quy trình tạo phân tử DNA tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp thành ... v.v… nhờ kỹ thuật ADN tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp thành tựu đạt 2 .1 Khái niệm DNA tái tổ hợp phân tử DNA nhỏ, lắp ráp từ đoạn DNA lấy từ thể truyền gen cần chuyển Năm 19 73, Staley Cohen...

Ngày tải lên: 22/03/2014, 17:40

... dòng mang DNA tái tổ hợp Trong thí nghiệm tạo vector tái tổ hợp, hỗn hợp vector lượng lớn phân tử DNA cắt enzyme hạn chế gắn lại với enzyme DNA ligase Kết quả, hỗn hợp có plasmid tái tổ hợp lẫn ... Nhập môn Công nghệ sinh học 32 (physical mapping) Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA Đoạn DNA tổng hợp dựa khuôn mẫu mRNA gọi cDNA (complementary DNA) ba sau: - (Mg2+ - mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th ... Chương Công nghệ DNA tái tổ hợp I Mở đầu Công nghệ DNA tái tổ hợp hình thành từ năm 19 70 nhờ phát triển phương pháp kỹ thuật dùng nghiên cứu...

Ngày tải lên: 09/07/2014, 06:20

... vật (công nghệ sinh học ) Theo nghĩa phổ biến trình sản xuất sử dụng giống sinh vật mới, tạo công nghệ DNA tái tổ hợp (công nghệ sinh học ) Trong công nghệ sinh học Công nghệ DNA tái tổ hợp ( ... để tổng hợp mRNA từ khuôn mẫu DNA Phiên mã ngược (reverse transcription) Quá trình tổng hợp DNA từ khuôn mẫu mRNA nhờ enzyme phiên mã ngược (reverse transcriptase) Công nghệ DNA tái tổ hợp 19 3 ... viện cDNA (cDNA library) xây DNA khuôn mẫu (template DNA) (sao chép) khuếch đại DNA (PCR) mẫu DNA polymerase Công nghệ DNA tái tổ hợp 18 1 Năm 19 59, hai nhà khoa học người Mỹ Kornberg Ochoa nhận...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... cm - DNA ( >1  : 1. 1 .1 Công nghệ DNA tái tổ hợp : 37 - -acrylamide) - 1 TBE - 10 % ammonium persulphate silicon lúc để miếng đệm 2.4) 35  3,5% 5,0% 8,0% 12 ,0% 20,0% 11 ,6 16 ,6 26,6 40,0 66,6 ... đoạn DNA nhỏ (500-800 bp) không hiệu đoạn lớn ( >15 kb) liên kết với hạt thủy tinh khác sợi DNA bị phá vỡ suốt chu kỳ rửa Công nghệ DNA tái tổ hợp 32 Cho 1% type- - 10 0 mL 0,5 60o : DNA (1 g /1 ... phân tách tốt gel 1% , đoạn nhỏ thích hợp với gel 2% Công nghệ DNA tái tổ hợp 27 A B C 2 Hình 2.3 Điện di mẫu DNA giống nồng độ agarose khác A: 1% , B: 1, 5% C: 2% - - Nhìn chung, DNA plasmid mạch...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... 10 20-200 Enzyme Taq pol pol 1- 2,5 unit cho 10 0 0,5 unit/25 pol pol pol pol - 0 ,1% (v/v) Triston X -10 0 57 0 ,1 20-mer) 25 : gia DNA Thông thường, nồng độ DNA khuôn mẫu sử dụng khoảng từ 10 -10 0 ... mẫu RNA thành sợi DNA thứ nhất, sau dùng sợi làm khuôn mẫu để tổng hợp sợi DNA thứ hai (tương tự giai đoạn thứ thứ hai trình tổng hợp cDNA-xem chương 6) Giai đoạn thứ hai Dùng DNA sợi đôi làm khuôn ... phần sau: Đệm 10 PCR 4,5 L ) L Primer-F (10 pmol/ L) 2,5 L Primer-R (10 pmol/ L) 2,5 L Thêm H2 40 L pol: 10 L Taq pol (5 units/ L) L Thêm H2 20 L 10 .3 Bổ sung L DNA khuôn mẫu (10 0 ng) vào 40...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... CM + IPTG Khuẩn lạc trắng-thể tái tổ hợp Khuẩn lạc xanh-thể không tái tổ hợp Bảo quản riêng rẽ dòng tái tổ hợp Hình 4 .16 Tạo dòng BAC vector Công nghệ DNA tái tổ hợp 97 - BAC vector cắt enzyme ... đoạn DNA ngoại lai Những phân tử đóng gói in vitro đầu phage , chúng gây nhiễm sau thêm phần đuôi Công nghệ DNA tái tổ hợp 87 A B λ DNA DNA Đuôi Đầu cos Hình 4 .10 Phân tử DNA phage A: Tự tái DNA ... vector tái tổ hợp vào vi khuẩn/tế bào vật chủ Sau tạo vector tái tổ hợp mang gen ngoại lai, việc biến nạp vào tế bào vật chủ Trong trường hợp tế bào vật chủ thường Công nghệ DNA tái tổ hợp 82...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... LuriaBertani broth Công nghệ DNA tái tổ hợp 10 8 nucleic acid quan tâm (mẫu dò) , thường 32 5.2) (smear) gel (Hình 5.3) (2 -10 Hind - Southern blot Công nghệ DNA tái tổ hợp 10 9 A B E E C E E E ... (%f ) - 500/n (1) thể lai RNA -DNA: Tm (oC) = 79,8oC + 18 ,5 (log10M) + 0,58 (%G + C) - 11 ,8 (%G + C)2 - 0,56 (%f ) - 820/n hóa + (2) ) (%f n Công nghệ DNA tái tổ hợp (theo base) 11 3 ba Tm sung ... kỹ DNase I (tụy bò): enzyme xúc tác phản ứng thủy phân liên kết nằm sau pyrimidine chuỗi DNA Trong trưởng hợp DNA sợi đôi, chỗ cắt xảy hay hay sợi (xem chương 1) Công nghệ DNA tái tổ hợp 11 9...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... thư viện cDNA sau: bỏ 27 Công nghệ DNA tái tổ hợp 15 1 bacteriophage 10 6 hóa bacte u , gt 11, - ZAP dephosphoryl hóa E coli - chèn cDNA mười hai hoàn hoàn hóa Công nghệ DNA tái tổ hợp 15 2 hóa ... hoàn Công nghệ DNA tái tổ hợp 75 13 3 bốn loại 200-250 + + + - hóa 2+ Mg2+ hoàn 6 -10 mM 1. 5 cDNA hoàn HCl H E coli (hairpin loop )1 (primer) E coli 6.4) M Công nghệ DNA tái tổ hợp 13 4 , cho ... (complementary DNA) tổng hợp cDNA Q cDNA qua ba reverse transcriptase (2) Biến tính c Công nghệ DNA tái tổ hợp enzyme -cDNA 13 2 nhiệt enzyme RNase H E coli khuôn mẫu cDNA thứ nhờ DNA polymerase...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... promoter bacteriophage T7 Promoter PL Promoter PL (31oC), promoter PL Công nghệ DNA tái tổ hợp 16 1 gen c L L như: pPLa 2 311 , pPLa pKC30 EcoRI HindIII 6000 10 00 Amp r PL PL nutL N pKC30 HpaI (6,4 kb) ... protein hòa tan không hòa tan E coli Công nghệ DNA tái tổ hợp 17 1 1. 2 Phương pháp hòa tan thể vùi 1. 2 .1 Làm tan tế bào Ly tâm thu tiểu thể tế bào E coli, tái huyền phù tiểu thể phenylmethylsulfonylfluoride ... Kiểm tra khuẩn lạc đơn mang đoạn DNA ngoại lai mong muốn cách tách chiết DNA (DNA miniprep) plasmid vector, Công nghệ DNA tái tổ hợp 15 9 sau cắt enzyme hạn chế thích hợp điện di kiểm tra agarose...

Ngày tải lên: 05/08/2014, 19:22

... 1. 1 Công nghệ DNA tái tổ hợp gì? Công nghệ DNA tái tổ hợp (còn gọi kỹ thuật di truyền hay kỹ thuật gen) phận quan trọng công nghệ chìa khóa (key technology) lĩnh vực công nghệ sinh học Công nghệ ... 1. 2 Quy trình tạo DNA tái tổ hợp mong muốn 1. 4 MộtTài liệu chiatrình nghiên cứu công nghệ vài công sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn DNA tái tổ hợp - Năm 19 72, phân tử DNA tái tổ hợp tạo trường Đại ... v.v… nhờ kỹ thuật ADN tái tổ hợp Công Tài liệuDNA tái tổ hợp thành nghệ chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn tựu đạt 2 .1 Khái niệm DNA tái tổ hợp phân tử DNA nhỏ, lắp ráp từ đoạn DNA lấy từ thể truyền...

Ngày tải lên: 28/04/2015, 11:40

... chiêu dài lơn han 20 kilobases Gen 14 exon 13 intron, dơ câc intron kỵch thc lơn hom rat nhiêu câc exon (hïnh 1. 1) [ 61] , [63] p l2 r r r w trri 11 1 n in i u Hinh 1. 1 Vi tri câu tao cüa gen tPA i) ... c/l 1- 3C57 MUC LUC Trang D A T VAN D E I T Ơ N G Q U A N 1. 1 Dâc diëm ngn goc, câu trûc vai trơ cüa Alteplase 1. 1 .1 Tên vi tri thong phân loai Enzymcüa Alteplase 1. 1.2 ... nâm 19 93, Viên Tim mach hoc gâp 95 ca, Bênh viên Hûu Nghi gâp 66 ca, Bênh viên Viêt Tiêp 18 gâp 16 ca Ơ Thành Phơ H6 Chi Minh nâm 19 88 313 ca nhung nâm 19 92 (sau nâm) co 639 ca (tâng 10 4%) [ 31] ...

Ngày tải lên: 12/10/2015, 10:48

... 5 .1 Các loại đệm dùng phản ứng cắt DNA : - (H) - (M) - (L) Công nghệ DNA tái tổ hợp ( o - -20 o 1. 2 Cao NaCl Tris.HCl pH 7,5 MgCl2 Dithiothreitol (mM) (mM) (mM) (mM) 10 10 50 10 10 10 0 50 10 ... BstXI : 1Công nghệ DNA tái tổ hợp o /50 C XbaI /37oC EcoRI /37oC 10 mM L( - - hai -20oC (hoặc -80oC (ice bath) II Các enzyme trùng hợp DNA polymerase (DNA- dependent DNA polymerase) DNA polymerase ... Exonuclease 5’ pNOH dsDNA lai RNA :DNA + 5’pN(pN)npNOH + ssDNA Mg2+ làm mẫu dò E coli 3’ 5’ Công nghệ DNA tái tổ hợp ) C 5’ 3’ DNA polymerase DNA enzyme DNAOH + ndNTP DNA- (pdN)n + nPPi 2+ Mg...

Ngày tải lên: 07/12/2015, 00:47