... 72oC, 60 giây/1kb bước hình thành chu kỳ Phản ứng PCR tiến hành khoảng 25 -40 chu kỳ Trong kỹ thuật PCR thông thường người ta thực bước biến tính ADN trước bước vào chu kỳ Bước thư ờng thực 94- 95oC, ... (DNA cDNA) Các mồi (Oligonucleotide primers) DNA polymerase chịu nhiệt (Taq) dNTPs Dung dịch đệm Ion Mg++ III TIN HNH PHN NG Biến tính ADN: 94- 95oC, 30-60 giây Bắt cặp mồi vào sợi khuôn: 45 -60oC, ... bước vào chu kỳ Bước thư ờng thực 94- 95oC, 2- 3 phút Phản ứng PCR - bước bắt cặp mồi vào sợi khuôn 3 45 - 60C 3 Phản ứng PCR - bước kéo dài chuỗi 3 72C 5 5 Phản ứng PCR - sản phẩm hình thành sau...
Ngày tải lên: 08/12/2015, 01:38
... -6/(6 ,4 x 109 x 650) = 2 ,4. 10-19 mol Vì ADN người chứa khoảng 6 ,4 x 10 bp khối lượng phân tử trung bình cặp bazơ 650 Da nên µ g ADN người tương với 2 ,4 x 10-19mol x x 1 023 (số Avogadro) = khoảng 144 .000 ... + Xuất sản phẩm phụ ức chế phản ứng + Các vừa tổng hợp không kết hợp với mồi mà lại bắt cặp với Số lượng sau n chu kỳ a x 2n (a số đoạn khuôn) VI Thu nhận kết Thông thường sau thực phản ứng PCR, ... hay Pfu, phân lập từ Archaea có chế sửa sai (cơ chế kiểm tra lỗi sai) làm giảm cách đáng kể số đột biến xảy chuỗi ADN chép Ngày nay, kết hợp Taq Pfu cung cấp độ tin cậy cao lẫn nhân xác ADN I...
Ngày tải lên: 24/04/2013, 15:41
Luận văn xây dựng quy trình xác định vi khuẩn verotoxigenic escherichia coli trong thịt bằng kỹ thuật PCR (polymerase chain reaction
... O2, O4, O5, O6, O18, O 22, O23, O25, O26, O38, O39, O45, O48, O50, O55, O73, O75, O 82, O 84, O91, O100, O103, O1 04, O111, O113, O1 14, O115, O117, O118, O119, O 121 , O 125 , O 126 , O 128 ab, O1 32, O 145 , ... (ng) Shiga 1,0 27 VT1 1,0 30 VT2 0,75 VT2vh 2, 7 VT2vp 22 VT2vp 20 55 Ghi : CD50 (ñơn v tính): Li u gây ñ c 50% t bào Vero LD50 (ñơn v tính): Li u gây ch t 50% chu t thí nghi m 1 .4. 2. 2 Gen eae (giúp ... (K- 12) - E coli FV 847 a F4/STa/STb/LT E coli FV 228 9 F18/STa/STb/VT2v E coli FV2586 F4/STb/LT E coli FV2593 ð i F18/STa/STb/VT2v ch ng S typhymurium (FD675) - S suis (HN -25 ) - S aureus (FD231)...
Ngày tải lên: 27/11/2013, 22:18
Báo cáo nghiên cứu khoa học: " ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION) ĐỂ PHÁT HIỆN NHIỄM SẮC THỂ PHILADELPHIA TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƯ BẠCH CẦU MÃN TÍNH DÒNG HẠT (CHRONIC MYELOID LEUKEMIA )" pptx
... người mang BCR-ABL b2a2 ( 32, 20%); 26 người mang BCRABL b3a2 (44 ,07%) 14 người mang dạng kết hợp b2a2 + b3a2 (23 ,73%) 3 .2. 2 Hình ảnh mẫu gen bình thường khảo sát RT-PCR 3 ,2, 1 DRADNATS SUG ng (không ... Philadelphia Mẫu nghiệm dương tính với BCR-ABL (N = 59) Số lượng phát Tỷ lệ % BCR-ABL b2a2 19 32, 20 BCR-ABL b3a2 26 44 ,07 BCR-ABL b2a2 + b3a2 14 23 ,73 83 Bằng kỹ thuật RT-PCR, gen tổ hợp BCR-ABL xuất ... Độ tuổi B ng M i t Số lượng Tỷ lệ % < 30 12 / 60 20 ,00 30 - 40 11 / 60 18,33 41 - 50 12 / 60 20 ,00 51 - 60 17 / 60 28 ,33 61 - 74 08 / 60 13,33 Những kết ghi nhận cho thấy đa số bệnh nhân CML độ...
Ngày tải lên: 23/07/2014, 00:21
KỸ THUẬT PCR (Polymerase Chain Reaction) ppt
... 131.0 72 4 20 26 2. 144 21 5 24 . 28 8 16 22 1. 048 .567 32 23 2. 097.1 52 64 24 4.1 94. 3 04 128 25 8.388.608 10 25 6 26 16.777 .21 6 11 5 12 27 33. 544 .43 2 12 1.0 24 28 67.108.8 64 13 2. 048 29 1 34. 21 7. 728 14 4.096 ... 33. 544 .43 2 12 1.0 24 28 67.108.8 64 13 2. 048 29 1 34. 21 7. 728 14 4.096 30 26 8 .43 5 .45 6 15 8.1 92 31 536.870.9 12 16 19.3 84 32 1.073. 741 .8 24 III CCH TIN HNH MT PHN NG DY CHUYN TNG HP ADN: PCR l mt k thut ... t hp 40 phỳt 50-75 MgCl2 - AmpliTaq AmpliTag minus 80 phỳt 75-80 MgCl2 - 20 phỳt 55-75 MnCl2 - Tag nc núng Stoffel 28 9 N-terminal aa Tỏi t hp Thermus Sui nc (RT), núng thermophilus MgCl2 (PCR)...
Ngày tải lên: 26/07/2014, 17:20
ứng dụng kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction) để chẩn đoán bệnh cầu trùng gà
... TLN % SMN TLN % Thành phố Huế (50 mẫu) SMN TLN % 12 24 12 14 28 15 30 10 9 20 18 12 18 12 24 12 10 16 12 22 19 12 15 44 38 24 18 30 10 12 18 SMN: số mẫu nhiễm 38 TLN: tỷ lệ nhiễm Chúng nhận thấy ... Recobinant Subunit Vaccine and Cytokine Genes, (20 04) , Infection and Immunity, December 20 04; 72( 12) : 6939 – 6 944 44 49 .Yun, C H., Lillehoj, H S., Lillehoj E P., (20 00), Intestinal immune responses to ... (mỗi ống 2, 5mL), 27 cho thêm ống 12, 5mL nước cất ly tâm 140 00 vòng/phút phút, thu kết tủa Kết tủa rửa lại nhiều lần với nước cất vô trùng bảo quản – 20 ºC 3 .2. 2.3 Phương pháp tách ADN tổng số ADN...
Ngày tải lên: 01/10/2014, 16:59
Tiểu luận môn Sinh Học Phân Tử KỶ THUẬT PCR (Polymerase Chain Reaction)
... -6/(6 ,4 x 109 x 650) = 2 ,4. 10-19 mol Vì ADN người chứa khoảng 6 ,4 x 10 bp khối lượng phân tử trung bình cặp bazơ 650 Da nên 1g ADN người tương với 2 ,4 x 10 -19mol x x 1 023 (số Avogadro) = khoảng 144 .000 ... đại = m x 2n m: Là số chuỗi mã hóa n: Là số chu kỳ Như vậy, qua chu kỳ nhiệt, DNA đích nhân thành hai sao; chu kỳ lặp lặp lại liên tục 30 đến 40 lần từ DNA đích nhân thành 23 0đến 24 0 sao, tức ... ổn định 30 – 40 phút nhiệt độ phòng Rút lược khỏi khuôn Đặt khay gel vào bể điện di sau đổ TAE lần tới ngập mặt gel khoảng 2mm - Tra mẫu: Mẫu trộn theo tỷ lệ µ 2 l ADN + 1§l đệm tra mẫu 10X +...
Ngày tải lên: 26/06/2015, 08:29
Tiểu luận môn Sinh Học Phân Tử SỬ DỤNG KỸ THUẬT PCR POLYMERASE CHAIN REACTION
... sản phẩm PCR 21 RT – PCR .23 10 REAL – TIME PCR 25 Phần III: KẾT LUẬN 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO 26 HVTH : Hồ Thị Hương Giang K 22 Lớp: LL&PPDH Bộ Môn ... -6/(6 ,4 x 109 x 650) = 2 ,4. 10-19 mol Vì ADN người chứa khoảng 6 ,4 x 10 bp khối lượng phân tử trung bình cặp bazơ 650 Da nên µ g ADN người tương với 2 ,4 x 10-19mol x x 1 023 (số Avogadro) = khoảng 144 .000 ... MỤC LỤC TRANG Phần I: MỞ ĐẦU 02 Lịch sử 02 Phần II: NỘI DUNG 03 Khái niệm chung 04 Nguyên lý . 04 Các điều kiện phản ứng PCR . 04 3.1...
Ngày tải lên: 26/06/2015, 08:29
xây dựng quy trình phát hiện clostridium perfringens trong thực phẩm bằng kĩ thuật pcr (polymerase chain reaction) và thử nghiệm ứng dụng
... 34 T T 2. 2 .2. Pha loãng mẫu 34 T T 2. 2.3.Đồng mẫu 34 T T 2. 2 .4. Xác định mẫu âm tính 35 T T 2. 2.5.Định lượng Clostridium perfringens 35 T T 2. 2.6.Phương ... 2. 1 .2. 1.Hoá chất 30 T T 2. 1 .2. 2.Môi trường 32 T T 2. 1.3.Nguyên vật liệu 33 T T 2. 2.PHƯƠNG PHÁP 34 T T 2. 2.1.Phương pháp thu xử lí mẫu 34 ... 40 T 2. 2. 14. Xác định tính chuyên biệt cặp mồi PL 40 T T 2. 2.15.Khảo sát độ nhạy phát C perfringens PCR 40 T T 2. 2.16.Xác định giới hạn phất C perfringens 41 T T 2. 2.17.Xác...
Ngày tải lên: 02/12/2015, 17:33
ỨNG DỤNG PHƯƠNG PHÁP PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION) VÀ PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY ĐỂ KHẢO SÁT SỰ NHIỄM VI SINH VẬT GÂY BỆNH TRONG THỰC PHẨM ĐƯỜNG PHỐ
... năm 20 05 20 06 sau: Bảng 1 .2 Tình hình ngộ độc thực phẩm Việt Nam năm 20 05 20 06 Thống kê 20 05 20 06 127 139 3 .41 0 5.5 64 21 49 Số vụ ngộ độc Số người bị ngộ độc Số người tử vong Nguồn: [30] Năm 20 05 ... 2. 2 .2. 2 Quy trình phân tích mẫu phương pháp truyền thống a Kiểm Salmonella: theo TCVN 48 29 :20 01 - Đồng 25 g mẫu 22 5ml mơi trường tăng sinh, ủ 37oC từ 18 - 22 Chuyển sang mơi trường RV, ủ 42 oC/ 24 ... năm 20 01 đến 20 06 thống kê sau: Bảng 1 .4 Thống kê tình hình ngộ độc thực phẩm TP HCM từ năm 20 01 đến 20 06 Thống kê Năm thống kê Tình hình ngộ độc thực phẩm TP HCM 20 01 20 02 2003 20 04 20 05 20 06 29 ...
Ngày tải lên: 16/03/2013, 09:26
pcr (polymerase chain reaction)
... huyết thống Mẹ Con Bố Mẫu Mẫu Marker Marker 1018 1018 545 48 1 529 529 49 7 44 9 44 9 49 7 43 3 517 506 517 506 396 344 29 8 22 0 20 1 1 54 1 34 396 3 34 29 8 27 PCR sức khoẻ ngời dự án hệ gen ngời PCR nhanh ... Tỏi bn ln th (20 00) NXB Giỏo dc, 20 7 trang Phm Thnh H Di truyn hc, Tỏi bn ln th (20 01) NXB Giỏo dc, 613 trang Vừ Th Thng Lan Sinh hc phõn t, Tỏi bn ln th (20 02) NXB HQG H Ni, 2 04 trang Lê Thanh ... bám vào: 94- 95 độ C/ phút + Bớc 2: Bám mồi + Bớc 3: Tổng hợp ADN kéo dài (Các bớc 1 ,2, 3 đợc thực lặp lặp lại 35 -40 chu kỳ) + Bớc kết thúc: (1 chu kỳ), hoàn chỉnh gen ADN cho sản phẩm; 72 độ phút...
Ngày tải lên: 19/02/2014, 10:05
Chương 5: PHƯƠNG PHÁP PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION) potx
... mồi không cách biệt xa Mồi đặc trưng cho trình tự DNA cần khuếch đại không bắt cặp với trình tự khác gen Các thành phần khác phản ứng: dNTP: thường sử dụng nồng độ 20 -20 0 µM loại Mg2+: hiệu ... (đã khử trùng) Các bước phản ứng: Là chuỗi nhiều chu kỳ, chu kỳ gồm bước: Bước 1: Biến tính (denaturation) DNA biến tính nhiệt độ cao, thường 94 – 950C, thời gian 30s – phút Bước 2: Bắt cặp mồi ... loại Mg2+: hiệu nhân giảm nhiều tạo sản phẩm không đặc hiệu Số lượng chu kỳ: không vượt 40 Ứng dụng phương pháp PCR - Tạo số lượng lớn DNA dòng hóa gene, giải trình tự, lập đồ di truyền,...
Ngày tải lên: 04/07/2014, 03:20