... cáo thực hành 8 SVTH: Phan Thị Thảo Hiếu
Công nghệ tếbào thực vật GVHD: Huỳnh Văn Kiệt
Bài 1: LÀM QUEN PHÒNG THÍ NGHIỆM NUÔICẤYMÔTẾBÀO THỰC
VẬT VÀ PHA CHẾ DUNG DỊCH MẸ.
I. Giới thiệu ... ion
Tủ sấy 60-600
0
C
Nồi hấp môi trường (Autoclave)
1.2. Phòng cấy vô trùng
Laminar
Quạt thông gió
Bộ dụng cụ cấy gồm dụng cụ cấy và bộ khử trùng
1.3. Phòng nuôi
Các giàn đèn huỳnh quang ... bị.
+ Môi trường chuẩn bị sẵn, bật đèn cồn. Khử trùng đĩa petri, đĩa inox, panh cấy.
+ Lấy hạt từ bình lắc ra đĩa inox. Dùng panh cấy gắp từng hạt cấy vào môi trường
thạch. Lượng hạt cấy vào...
... trong thời gian thực tập
Các kỹ thuật cơ bản phòng thí nghiệm nuôicấymô và tếbào thực. vật
(chuẩn bị làm môi trường, nuôicấycây trong ống nghiệm, trồng cây
ngoài vườn ươm …).
3. Các ... cho mô t lít môi trường nuôi cấy và phụ thuộc vào cách ta
sẽ lấy 1ml hay 5 hoặc 10ml stock cho mô t lít môi trường nuôi cấy.
Ví dụ: lượng CaCl
2
.2H
2
O cần thiết cho mô t ... 31.1. Mục đích
Giúp học sinh nắm vững phương pháp pha một số hóa chất cần thiết
sử dụng trong nuôicấymô và tếbào tực vật như: MS, các chất kích
thích sinh trưởng…
3.1.2. Nguyên lý
Hóa chât...
... vô tính.
- Nuôicấytếbào đơn và tách tếbào trần.
- Tạo cây có biến dị soma.
Tế bào - Tạo đột biến ỏe mức độ tế bào.
- Tạo tếbào trần để lai vô tính.
- Biến nạp gen.
- Nuôicấytếbào đơn.
Đỉnh ... cao
nhưng lại mang giá trị kinh tế cao cho người trồng.
1.2. Kĩ thuật nuôicấymôtếbào thực vật và ứng dụng
1.2.1. Lược sử phát triển
Kĩ thuật nuôicấymôtếbào thực vật đã trải qua hơn 100 ... đã phát triển kĩ thuật nuôicấytếbào đơn lên
một bước mới là tạo được khối mô sẹo từ một tếbào đơn bằng kĩ thuật gieo
trải tếbào thực vật trên đĩa thạch như trải tếbào vi sinh vật. Cũng...
... của tếbào (Vũ Văn Vụ, 1994).
Quá trình phát sinh hình thái trong nuôicấy mô, tếbào thực vật thực chất là
kết quả của quá trình phân hoá và phản phân hoá tế bào. Kỹ thuật nuôicấy mô, tế
bào ... nuôicấymô và nhân giống cây Lâm nghiệp 3
1.3. Cơ sở khoa học của phƣơng pháp nuôicấymôtếbào 4
1.3.1. Tính toàn năng của tếbào thực vật 4
1.3.2. Sự phân hoá và phản phân hoá của tếbào ... quá trình nhân giống bằng nuôicấymôtếbào 6
1.4.1. Môi trường nuôicấy 6
1.4.2. Các chất điều hoà sinh trưởng 8
1.4.3. Môi trường vật lý 10
1.4.4. Vật liệu nuôicấy 11
1.4.5. Điều kiện...
... của nuôicấymô - tếbào thực vật trong nhân giống
và bảo tồn nguồn gen một số cây trồng
Nuôi cấymôtếbào thực vật được hình thành và phát triển từ những
năm 80 của thế kỉ XX và được ứngdụng ... Phƣơng pháp nghiên cứu nuôicấymô - tếbào
2.2.1.1. Phƣơng pháp pha môi trƣờng nuôicấy
- Nguyên tắc: Pha môi trường đặc với thành phần và nồng độ các chất
phù hợp. Môi trường là WPM có đầy ... trên môi trường cấy gây
được chuyển sang môi trường nuôicấy đối chứng (không bổ sung chất kích
thích sinh trưởng, chỉ có WPM + đường sucrose 25g/l + agar 8,5g/l + nước
dừa 200 ml/l) và môi...
... hiện đại. Đó chính là công
nghệ nuôicấymôtếbào thực vật. Chỉ tính riêng ở Hà Lan hàng năm đã sản xuất
15 triệu cây giống hoa đồng tiền bằng nuôicấymôtếbào để cung cấp cho sản
xuất, Mấy ... không sâu bệnh.
- Các thiết bị, dụng cụ và hoá chất trong nuôicấy mô, tếbàobao gồm:
+ Thiết bị và dụng cụ: nồi hấp khử trùng, bình tam giác, đèn cồn, box cấy vô
trùng.
+ Hoá chất: dung dịch ... đưa vào môi trường nuôicấy có khả năng bật chồi ngay cả trong
điều kiện môi trường cơ bản không chưa chất điều tiết sinh trưởng.Tuy nhiên số
chồi tạo ra thấp và sinh trưởng kém.
Ở môi trường...
... bị nuôicấymô
Các dụng cụ và hoá chất cần thiết để thực hiện quá trình nuôicấy do
phòng Công nghệ tế bào, khoa Sinh - KTNN, trường Đại học Sư phạm Thái
Nguyên cung cấp.
* Dụng cụ
Buồng cấy ... trên môi trường cấy gây
được chuyển sang môi trường nuôicấy đối chứng (không bổ sung chất kích
thích sinh trưởng, chỉ có WPM + đường sucrose 25g/l + agar 8,5g/l + nước
dừa 200 ml/l) và môi ...
1.2. Vai trò của cây dẻ
1.3. Một số thành tựu của nuôicấymô - tếbào thực vật trong nhân
giống và bảo tồn nguồn gen một số cây trồng
1.4. Ứngdụng của kỹ thuật RAPD trong đánh giá mối quan hệ...
... của nuôicấymô - tếbào thực vật trong nhân giống
và bảo tồn nguồn gen một số cây trồng
Nuôi cấymôtếbào thực vật được hình thành và phát triển từ những
năm 80 của thế kỉ XX và được ứngdụng ...
0,5mg/l cho tếbào soma phát sinh đồng đều; cả BAP, NAA và 2,4-D đều có
tác dụng kích thích tăng tếbào soma và môi trường thích hợp nhất cho nuôi
cấy tăng sinh tếbào soma là môi trường LV ... Phƣơng pháp nghiên cứu nuôicấymô - tếbào
2.2.1.1. Phƣơng pháp pha môi trƣờng nuôicấy
- Nguyên tắc: Pha môi trường đặc với thành phần và nồng độ các chất
phù hợp. Môi trường là WPM có đầy...
... thu được
tế bào trần.
tế bào trần.
KHÁI NIỆM
KHÁI NIỆM
Nuôi cấy mô- tếbào thực vật là kĩ thuật cho
Nuôi cấy mô- tếbào thực vật là kĩ thuật cho
phép nuôicấy dễ dàng những tếbào thực ... xứng là chuỗi
PolyRinu
C
C
Ơ SỞ SINH LÍ CỦA CÔNG NGHỆ
Ơ SỞ SINH LÍ CỦA CÔNG NGHỆ
NUÔI CẤY MÔ- TẾ BÀO
NUÔI CẤY MÔ- TẾ BÀO
TÍNH TOÀN NĂNG
TÍNH TOÀN NĂNG
:
:
Là khả năng của 1 tế ... 1khối tế bào( phân hóa) mô cơ
: 1 tếbào 1khối tế bào( phân hóa) mô cơ
quan hệ cơ quan.
quan hệ cơ quan.
Phản phân hóa
Phản phân hóa
: khi các tếbào đã phân hóa thành các
: khi các tếbào đã...
... những biến dị tếbào soma qua
nuôi cấymô sẹo.
•
Hiện tượng thủy tinh thể:
Trong nuôicấymô cũng thường gặp hiện tượng thủy
tinh thể mẫu nuôi cấy. Khi chuyển ra khỏi bình nuôi cấy,
cây con ... vitro:
•
Nuôi cấymôtếbào thực vật (nuôi cấy in vitro)
là phạm trù khái niệm để chỉ chung cho tất cả
các loại nuôicấy nguyên liệu thực vật hoàn
toàn sạch các vi sinh vật trên môi trường ... nghệ nuôicấymôtếbào thực vật đã được du nhập từ
những năm 1960 tại miền Nam và vào đầu những năm 1970 tại
miền Bắc. Tuy nhiên chỉ từ cuối những năm 1980 trở lại đây công
nghệ mô - tế bào...
... NIỆM VỀ PHƯƠNG PHÁP NUÔICẤYMÔ TB
Nuôi cấymôtếbào là phương pháp tách rời tế bào,
nuôi cấy trong môi trường thích hợp và vô trùng
để chúng tiếp tục phân bào, biệt hóa thành mô, cơ quan
để phát ... chỉnh
Tế bào hợp tử
Tế bào hợp tử
Tế bào phôi sinh
Tế bào phôi sinh
Quá trình phân hóa
Quá trình phản phân hóa
Nuôi
Cấy
Mô
TB
(2)
(2)
(2)
(2)
(2)
(2)
(2)
(2)
Chuyển cây sang MT thích ứng gần ... vật liệu nuôi cấy
Tạo chồi
Khử trùng
Tạo rễ
Cấy cây vào môi trường thích hợp
Sơ đồ qui trình công nghệ nhân giống bằng nuôicấymô TB
Sơ đồ qui trình công nghệ nhân giống bằng nuôicấymô TB
Trồng...
... NIỆM
Nuôi cấy mô- tếbào thực vật là kĩ thuật cho
Nuôi cấy mô- tếbào thực vật là kĩ thuật cho
phép nuôicấy dễ dàng những tếbào thực
phép nuôicấy dễ dàng những tếbào thực
vật hay mô phân ... sau khi cấy.
trước và sau khi cấy.
CÁC HÌNH TH C NUÔI Ứ
CÁC HÌNH TH C NUÔI Ứ
C Y MÔẤ
C Y MÔẤ
•
Nuôi c y mô th c v tấ ự ậ
Nuôi c y mô th c v tấ ự ậ
•
Nuôi c y mô b ng t ấ ằ ế
Nuôi c y mô b ... SINH LÍ CỦA CÔNG NGHỆ
NUÔI CẤY MÔ- TẾ BÀO
NUÔI CẤY MÔ- TẾ BÀO
TÍNH TOÀN NĂNG
TÍNH TOÀN NĂNG
:
:
Là khả năng của 1 tế
Là khả năng của 1 tế
bào hình thành 1 cây
bào hình thành 1 cây
hòa...
... công nghệ tếbào
là công nghệ nuôicấymô - tế bào.
1. Nguyên tắc của phương pháp
nuôi cấymô - tếbào
Nuôi cấymô - tếbào dựa trên hai
nguyên tắc sau:
1.1. Tính toàn năng của tế bào:
... kỹ thuật nuôicấymô - tếbào
thực vật
Nuôi cấy mô- tếbào thực vật - công
nghệ hiện đại trong nhân giống vô
tính ở thực vật
Mục đích chung của nuôicấymô M-
tế bào thực vật là sử dụng các ... cấy phù hợp
là việc nghiên cứu đầu tiên trong nuôi
cấy tếbào đơn .
ứng dụngnuôicấytếbào đơn cho
các mục đích;
các nghiên cứu cơ bản như chọn dòng
tế bào, đột biến soma.
2.2 Nuôi cấy...