Bai 6: Ứng dụng nuôi cấy mô...

KHÁI NIỆM VỀ PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TBNuôi cấy mô tế bào là phương pháp tách rời tế bào, nuôi cấy trong môi trường thích hợp và vô trùng để chúng tiếp tục phân bào, biệt hóa thành mô,

BÀI 6:

ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO TRONG NHÂN GIỐNG CÂY TRỒNG

NÔNG, LÂM NGHIỆP

Hoa lan

I KHÁI NIỆM VỀ PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TB

Nuôi cấy mô tế bào là phương pháp tách rời tế bào,

nuôi cấy trong môi trường thích hợp và vô trùng

để chúng tiếp tục phân bào, biệt hóa thành mô, cơ quan

để phát triển thành cây mới.

Tế bào (rễ, thân, lá)

Nuôi cấy

Cây hoàn chỉnh

Tạo mô sẹo từ thân cây Tạo mô sẹo từ lá

Môi trường thạch

Môi trường dinh dưỡng:

Nguyên tố đa lượng: N, S, Ca, K, P Nguyên tố vi lượng: Fe, B, Mo, I, Cu Đường: Glucozơ, Saccarozơ

Chất điều hòa sinh trưởng: Auxin, Cytokinin

Thành tựu của nuôi cấy mô tế bào

TÕ b µo th

ùc vË t

II CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA PHƯƠNG

PHÁP NUÔI CẤY MÔ TB

- Tính toàn năng của TB

- Khả năng phân hóa, phản phân hóa

1 Tính toàn năng của tế bào

TB chứa hệ gen qui định loài đó, mang toàn bộ lượng thông tin của loài.

Có thể sinh sản vô tính khi nuôi cấy trong môi trường thích hợp

Sơ đồ thể hiện tính toàn năng TBTV

Quá trình phân hóa

Tế bào phôi sinh Tế bào chuyên hóa

Quá trình phản phân hóa

(Rễ, Thân, Lá)

2 Khả năng phân hóa và phản phân hóa

 Phân hóa TB: là quá trình từ tế bào phôi sinh biến đổi thành TB chuyên hóa đảm bảo các chức năng khác nhau

 Phản phân hóa TB: Là quá trình chuyển tế bào

chuyên hóa về TB phôi sinh và phân chia mạnh

mẽ.

Tế bào chuyên hóa

Cây hoàn chỉnh

TB phôi sinh

TB chuyên hóa

Cây hoàn chỉnh

Tế bào hợp tử Tế bào phôi sinh

Quá trình phân hóa Quá trình phản phân hóa

b2

b6

b4 b3

b5

Qui trình công nghệ nuôi cấy mô TB

Chọn vật liệu nuôi cấy

Tạo chồi Khử trùng

Tạo rễ Cấy cây vào môi trường thích hợp

Sơ đồ qui trình công nghệ nhân giống bằng nuôi cấy mô TB

Trồng cây trong vườn ươm

Bước 1

III QUI TRÌNH CÔNG NGHỆ NHÂN

GIỐNG BẰNG NUÔI CẤY MÔ TB

Bước 2 Bước 3 Bước 4 Bước 5 Bước 6

 Có mẫu tốt, không bị nhiễm bệnh

 Cách làm: + Chọn cây mẹ khoẻ, sạch bệnh

+ Chọn mô phân sinh đỉnh chồi , đỉnh rễ, bộ phận non

+ Trồng trong buồng cách li.

Tại sao vật liệu nuôi cấy thường là đỉnh chồi, đỉnh rễ?

B1: Chọn vật liệu nuôi cấy

- Đỉnh chồi, đỉnh rễ là bộ phận non, dễ tham gia vào quá trình phân hoá và phản phân hoá tạo nên cơ thể mới.

- Th-ường ít nhiễm bệnh.

Nếu vật liệu nuôi cấy là đoạn thân, lá, rễ già

có đ-ược không?

Có thể phát sinh hình thái như-ng chậm, mẫu cấy bị

thối nhiều và cây dễ bị nhiễm bệnh

B2 Khử trùng

Buồng khử trùng

Khử trùng

 Mẫu và dụng cụ đ-ược tẩy rửa khử trùng.

 Cắt đỉnh sinh tr-ưởng thành phần tử nhỏ, tẩy

rửa, khử trùng ở buồng vô trùng.

B3 Tạo chồi

 Để cây có thể phát triển thân cành

 Cắm vật liệu nuôi cấy trong môi trường dinh dưỡng

có bổ sung thêm xytokinin hoạt hoá tạo chồi

Tạo chồi

B4 Tạo rễ

-Khi cây đạt tiêu chuẩn về chiều cao, số lá thì chuyển sang MT tạo rễ Đó là MT dinh dưỡng thích hợp bổ sung chất KT auxin, IBA…

Tạo rễ

B5 Cấy cây vào môi trường thích ứng

 Chuyển cây sang MT thích ứng gần giống với MT

B7 Trồng cây trong vườn ươm

 Khi cây đủ chiều cao, thân lá thì chuyển cây ra vườn ươm.

 Ưu điểm:

- Nhân với số lượng lớn, trên quy mô CN

- Sản phẩm sạch bệnh và đồng nhất về di truyền

- Hệ số nhân giống cao

 VD: 1 củ khoai tây sau 8 tháng nhân giống thu được 2

tỷ mầm giống đủ trồng cho 40 ha

1 chồi dứa sau 1 năm tạo được 116.649 cây

 Nhược điểm:

- Tốn kém kinh phí, công sức

- Đòi hỏi trình độ kĩ thuật cao

- Đòi hỏi trình độ kĩ thuật cao

2 Ý nghĩa