1.1. KHÁI QUÁT CHUNG VỀ CÂY CỎ MỰC 2
1.1.1. Đặc điểm hình thái và phân bố 2
1.1.2. Thành phần hóa học 3
1.1.3. Tác dụng dược lý 3
1.2. KHÁI QUÁT CHUNG VỀ BỆNH SUY GIẢM MIỄN DỊCH
3
1.2.2.1. Suy giảm miễn dịch bẩm sinh 3
1.2.2.2. Suy giảm miễn dịch mắc phải 4
1.2.3.1. Biểu hiện lâm sàng 5
1.2.3.4. Kiểm tra sự thiếu hụt tế bào B (kháng thể) 6
1.2.3.5. Kiểm tra sự thiếu hụt tế bào T 7
1.2.3.7. Kiểm tra sự thiếu hụt tế bào bổ thể 9
1.3.1. Khái niệm viêm gan…………………………………………………9
1.3.3. Bệnh học…………………………………….………………………10
1.3.4. Bệnh sinh……………………………………………………………10
1.3.4.1. Cơ chế phát sinh xơ hóa ở gan 10
1.3.4.2. Các tế bào tiềm năng phát sinh xơ hóa khác 11
1.3.6. Chẩnđoán - xét nghiệm 12
1.3.6.1. Xét nghiệm sinh hóa 12
1.3.6.2. Sinh thiết - Xét nghiệm mô học…………………………………………….13
1.3.6.3. Các xét nghiệm khác 13
1.3.7. Chữa trị 14
1.3.7.1. Bằng thuốc 14
1.3.7.2. Ghép gan và liệu pháp tế bào 14
1.4. SỬ DỤNG MÔ HÌNH ĐỘNG VẬT TRONG NGHIÊN CỨU Y SINH
14
1.4.1. Ý nghĩa sử dụng mô hình động vật trong nghiên cứu y sinh 14
1.4.2.1. Khái quát chung về cyclophosphamide 15
1.4.2.2. Cơ chế hoạt động của cyclophosphamide 15
1.4.3. Phương pháp gây tổn thương gan bằng carbon tetrachloride trên mô hình động vật 17
1.4.4. Một số chỉ tiêu sinh lý ở chuột…………………………………….19
2.1. VẬT LIỆU, ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 20
3.3. KẾT QUẢ GÂY THỬ NGHIỆM CHUỘT SUY GIẢM MIỄN DỊCH BẰNG CYCLOPHOSPHAMIDE 35
1.1. KHÁI QUÁT CHUNG VỀ CÂY CỎ MỰC
1.1.1. Đặc điểm hình thái và phân bố [23, 26]
Xuất xứ: cây cỏ mực có nguồn gốc từ Ấn Độ. Vị trí phân bố: cây mọc hoang ở những vùng nhiệt đới trên đất ẩm như Brazil, Nam Mỹ, Trung Hoa và một số quốc gia vùng Nam Á. Riêng Việt Nam, cây phân bố chủ yếu ở các tỉnh có nhiều ánh sáng và độ ẩm cao.
Theo từ điển dược học Ấn Độ thì đặc điểm nổi bật của cây là khi ta vò nát cây này có màu đen như mực nên được gọi là cây cỏ mực hay cỏ nhọ nồi.
Tên khoa học: Eclipta alba Linn. Hassk.
Họ khoa học: họ Cúc (Asteraceae).
Phần dùng làm thuốc: cả cây, dùng tươi hay phơi khô.
Mô tả hình thái:
Cỏ mực thuộc loại cây thân thảo hằng niên, mọc bò hoặc gần thẳng đứng. Thân màu lục hay nâu nhạt, có lông trắng. Lá mọc đối, không cuống, phiến lá dài và hẹp, mép lá có răng cưa, hai mặt lá đều có lông. Hoa trắng hợp thành đầu ở nách lá hay đầu cành, các hoa cái hình lưỡi ở ngoài, hoa lưỡng tính hình ống ở giữa. Qủa bế dẹt có 3 cạnh, có cánh dài 3 mm. Rễ hình trụ, màu xám. Thời kỳ trổ hoa từ tháng 2 đến tháng 8.
1.1.2. Thành phần hóa học [18]
1.1.3. Tác dụng dược lý [10]
1.2. KHÁI QUÁT CHUNG VỀ BỆNH SUY GIẢM MIỄN DỊCH
1.2.1. Khái niệm [17]
1.2.2. Phân loại
1.2.3. Chẩn đoán suy giảm miễn dịch [20]
Biểu hiện thường gặp nhất của suy giảm miễn dịch là tình trạng nhiễm trùng thường xuyên, tái diễn nhiều lần, phát triển nặng hoặc dẫn đến biến chứng, đặc biệt ở những bệnh nhân bị thiếu hụt tế bào T và ít gặp hơn bao gồm những bất thường về huyết học (thiếu máu, tan máu tự miễn, giảm bạch cầu, giảm tiểu cầu), rối loạn tự miễn dịch (viêm mạch, viêm khớp, bệnh nội tiết), bệnh thuộc hệ thống thần kinh trung ương (mãn tính, viêm não, chậm phát triển, co giật). Triệu chứng phổ biến khác là tiêu chảy, kém hấp thu và chậm lớn. Nhiễm trùng da, loét miệng và viêm nha chu hay gặp trong rối loạn bạch cầu hạt.
1.2.3.2. Bệnh lý
1.2.3.3. Nghiên cứu sàng lọc trong phòng thí nghiệm
1.2.3.4. Kiểm tra sự thiếu hụt tế bào B (kháng thể)
1.2.3.5. Kiểm tra sự thiếu hụt tế bào T
1.2.3.6. Các thử nghiệm về sự thiếu hụt tế bào thực bào
1.2.3.7. Kiểm tra sự thiếu hụt tế bào bổ thể
1.3. KHÁI QUÁT CHUNG VỀ VIÊM GAN
1.3.1. Khái niệm viêm gan [2]
1.3.2. Bệnh nguyên [1]
1.3.3. Bệnh học [1]
1.3.4.1. Cơ chế phát sinh xơ hóa ở gan
Xơ hóa gan là sự chữa lành các tổn thương lặp đi lặp lại của gan. Sau tổn thương gan cấp tính (như viêm gan siêu vi), các tế bào nhu mô tăng sinh và thay thế các tế bào hoại tử. Nếu tổn thương gan vẫn tiếp diễn, sự tái sinh của gan không đủ để phục hồi, các tế bào gan dần dần bị thay thế bởi lượng lớn chất nền ngoại bào, bao gồm sợi collagen. Trong viêm gan siêu vi và các rối loạn ứ mật mãn tính, mô xơ ban đầu hình thành ở quanh khoảng cửa hoặc quanh tĩnh mạch trung tâm và các xoang mao mạch ở bệnh gan do rượu.
1.3.4.2. Các tế bào tiềm năng phát sinh xơ hóa khác
Viêm gan mãn tính: Bệnh gặp ở những người bị bệnh gan kéo dài, nhu mô gan bị tổn thương làm ảnh hưởng đến chức năng gan, rối loạn chức năng tiêu hóa, nước muối và thần kinh.
Sự hoại tử tế bào gan: gồm có xét nghiệm nồng độ enzyme transaminase: ALT (SGPT), AST (SGOT) và enzyme lactatdehydrogenase (LDH).
AST – Aspartatetransaminase (hay SGOT - Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase) có trong bào tương và ty thể ở tế bào cơ tim, cơ xương, gan, thận, não, tụy.
Chức năng bài tiết: Gồm có các xét nghiệm biliburin (sắc tố mật): biliburin toàn phần, trực tiếp và gián tiếp. Sắc tố biliburin tăng nếu xơ gan phát triển, đặc biệt xơ gan do tắc mật nguyên phát. Xét nghiệm phosphatase kiềm và γ – glutamyltranspeptidase (GGT) tăng cao khi bị ứ mật hoặc tắc mật, do nghiện rượu, sau khi uống các thuốc gây cảm ứng men, gan nhiễm mỡ không do rượu hoặc nguyên nhân khác như suy thận, nhồi máu cơ tim, tiểu đường.
Chức năng tổng hợp: Bệnh xơ gan làm giảm albumin huyết thanh, tăng globulin huyết thanh, thời gian đông máu kéo dài cho thấy sự suy yếu và rối loạn chức năng tổng hợp gan.
1.3.6.2. Sinh thiết - Xét nghiệm mô học
Sinh thiết gan là phương pháp chuẩn để đánh giá mức độ xơ hóa gan. Xét nghiệm mô học ứng dụng trong việc xác định nguyên nhân bệnh, đánh giá mức độ viêm – hoại tử và giai đoạn tiến triển của xơ hóa với các phương pháp nhuộm phổ biến bao gồm: Nhuộm mô Hematoxylin và Eosin (H – E) thường sử dụng trong cả thực nghiệm lẫn lâm sàng, do chi phí thấp và cho biết nhiều thông tin bệnh lý (sự xơ hóa, sự thâm nhập của tế bào viêm, hoại tử tế bào, thoái hóa tế bào,…). Nhuộm Massontrichrome được dùng để đánh giá mức độ xơ hóa nhờ vào các sẹo collagen do đó xác định được giai đoạn tiến triển xơ hóa, giúp phân biệt suy thoái cấu trúc gan cấp tính với xơ hóa gan tiến triển. Nhuộm Sirius red cho thấy rõ các thành phần protein chất nền ngoại bào. Nhuộm Reticulin làm nổi bật các sợi reticulin mỏng xung quanh cấu truc xoang mao mạch gan, hỗ trợ trong việc phân biệt các nốt u nhỏ tái sinh (ít hơn độ dày 3 lớp tế bào) và ung thư tế bào gan nguyên phát (nhiều hơn độ dày 3 lớp tế bào). Nhuộm Periodicacidschiff (PAS) cho thấy rõ màng cơ bản của biểu mô ống mật, tích tụ glycogen, glycoprotein. Ngoài ra còn có nhiều phương pháp nhuộm hóa mô khác được dùng để phát hiện sự tích tụ các chất khoáng trong tế bào gan hay các tế bào cư trú khác trong gan.
1.3.7. Chữa trị
1.3.7.1. Bằng thuốc
Việc ngừng uống rượu, ngừng dùng thuốc độc đối với gan hay loại bỏ chất độc ngoài môi trường sẽ dừng tiến triển xơ gan. Các bệnh viêm ga B và C có thể điều trị bằng interferon và các thuốc kháng virus. Sử dụng corticodteroid, prednisone phối hợp với azathioprine (Imuran) có hiệu quả đối với viêm gan tự miễn. Các loại thuốc như ursodiol (Actigall) làm chậm tiến triển của xơ gan do tắc mật nguyên phát và bệnh viêm xơ chai đường mật.
1.3.7.2. Ghép gan và liệu pháp tế bào
Ghép gan là cách chữa trị hiệu quả cao trong xơ gan giai đoạn cuối, bệnh gan cấp tính (như trúng độc, siêu vi gan bộc phát), bệnh gan bẩm sinh mạn tính (như rối loạn chu trình ure, rối loạn quá trình tổng hợp glycogen type I) hay mắc phải (bệnh gan nhiễm mỡ không do rượu siêu vi gan mạn tính) giai đoạn cuối. Ngoài ra, liệu pháp tế bào bao gồm cấy ghép các tế bào gan, tế bào gốc từ gan và không thuộc gan cũng cho nhiều kết quả khả quan.
1.4. SỬ DỤNG MÔ HÌNH ĐỘNG VẬT TRONG NGHIÊN CỨU Y SINH
1.4.1. Ý nghĩa sử dụng mô hình động vật trong nghiên cứu y sinh [15]
1.4.2.1. Khái quát chung về cyclophosphamide [12]
1.4.2.2. Cơ chế hoạt động của cyclophosphamide
1.4.3. Phương pháp gây tổn thương gan bằng carbon tetrachloride trên mô hình động vật [9]
2.2.3.1. Theo dõi trọng lượng
2.2.3.2. Theo dõi tổng lượng hồng cầu
3.3. KẾT QUẢ GÂY THỬ NGHIỆM CHUỘT SUY GIẢM MIỄNDỊCH BẰNG CYCLOPHOSPHAMIDE