Bai viet tham khao

1 Giới thiệu Các vi khuẩn gây bệnh khác kháng khuẩn kháng sinh trở thành thách thức lớn thời Hiện nay, nhà nghiên cứu tìm kiếm chất kháng khuẩn Trong kịch nay, vật liệu nano lên chất chống vi khuẩn tỷ lệ bề mặt cao đến khối lượng phức tạp hóa học độc Cơng nghệ nano lĩnh vực phát triển nhanh chóng với mục đích sản xuất vật liệu cấp độ nano Khu vực dự kiến mở tảng để chống lại bệnh tật cách sử dụng vật liệu nano Trong số vật liệu nano có tiềm kháng khuẩn cao nhất, hạt nano kim loại trở thành công cụ thú vị ( Morones et al., 2005, Albrecht cộng sự, 2006 ) Các hạt nano bạc trở thành tâm điểm nghiên cứu sâu rộng hiệu kháng khuẩn tốt chống lại vi khuẩn, vi rút vi sinh vật nhân chuẩn khác ( Gong et al., 2007 ) Các nghiên cứu trước cho thấy Ag NP có khả thực kháng khuẩn hữu hiệu Staphylococcus aureus , Escherichia coli , Vibrio cholera , Pseudomonas aeruginosa Salmonella typhi ( Morones et al., 2005; Moyer cộng sự, 1965, Li et al., 2010) Trong điều trị y tế, bạc nitrat kết hợp với sulfonamide để tạo thành kem bạc sulfadiazine, sử dụng tác nhân kháng khuẩn phổ rộng sử dụng để điều trị bỏng Nó có hiệu cao vi khuẩn E coli , S aureus , Klebsiella sp Và Pseudomonas sp cho thấy hoạt động chống nấm thuốc kháng virut đáng kể ( Fox Modak, 1974 ) Các ứng dụng phụ thuộc mạnh mẽ vào đặc tính lý hố phân NPN sản xuất kích thước hạt hình dạng, phân bố kích cỡ tính tích điện bề mặt ( Soukupov cộng sự, 2008) Các hạt nano tổng hợp cách sử dụng phương pháp khác bao gồm phương pháp hóa học, vật lý sinh học Các hạt nano bạc tổng hợp phương pháp hóa học độc hại cho tế bào bình thường khác dẫn đến sản phẩm phụ khơng thân thiện với mơi trường làm phiền tế bào bình thường Các nồng độ Ag NP phát thấy có tác dụng độc cấp mạnh đến tế bào nuôi khác Chỉ có tiếp xúc với Ag NPs, có độc tính tế bào liều cao gây hình thái tế bào bất thường, hiển thị co lại tế bào thu nhận hình dạng bất thường ( Kawata cộng sự, 2009) Vì vậy, nhu cầu ngày tăng giao thức thân thiện với môi trường, không độc việc tổng hợp hạt nano dẫn đến quan tâm phát triển phương pháp tiếp cận sinh học khơng có sử dụng hóa chất độc hại sản phẩm phụ Các khía cạnh sinh học khác việc chế tạo hạt nano báo cáo đến bao gồm vi khuẩn ( Dickson, 1999, Pum Sleytr, 1999, Joerger cộng sự, 2001, Nair Pradeep, 2002 ), nấm ( Mukherjee et al., 2001; Ahmad et al., 2003 ; Durán et al, 2005 ) thực vật ( Singhal et al, 2011; Huang et al, 2007; Leela Vivekanandan, 2008; Singh et al 2015.) Do nhu cầu ngày tăng hạt nanô sinh thái thân thiện, phương pháp xanh sử dụng để tổng hợp hạt nano kim loại khác Nhưng gần đây, trình chế tạo hạt nano chiết xuất thực vật chứng minh cách thuận lợi so với phương pháp khác Sự tổng hợp hạt trung gian chất chiết xuất từ thực vật trở nên quan trọng đơn giản tính thân thiện với sinh thái ( Awwad and Salem, 2012 ) Các chế NPK ức chế phát triển vi khuẩn chưa rõ ràng Đã có báo cáo kích thước hình dạng NP ảnh hưởng đến hoạt động kháng khuẩn chúng ( Zhou et al., 2012) Các nghiên cứu đề xuất bốn chế giả thiết cho hoạt động kháng khuẩn trước hết tích lũy giải phóng hạt nano màng vi khuẩn thay đổi độ thẩm thấu nó, sau giải phóng phân tử sinh học tế bào khác giải phóng lực đẩy proton qua màng tế bào ( Amro et al , 2000 ) Thứ hai tạo loại oxy phản ứng (ROSs) tế bào NP, với hủy hoại oxy hóa sau cấu trúc tế bào ( Applerot et al., 2012) Thứ ba hấp thu hạt nano / ion kim loại vào tế bào, suy giảm sản xuất ATP tế bào, phá vỡ chép DNA tổn thương DNA, thứ tư hạt nano ion hoạt động liên kết với enzym khác khử hoạt tính chúng, hơ hấp ( Morones et al, 2005 Raffi cộng sự, 2008, Rai cộng sự, 2009) Các hạt nano dính vào màng tế bào xâm nhập vào bên vi khuẩn tạo dạng oxy phản ứng (ROS) Màng tế bào chứa protein có chứa lưu huỳnh hạt nano bạc tương tác với protein tế bào hợp chất chứa phốt DNA Ag NPs gây bất ổn tiềm màng tế bào máu suy giảm mức độ ATP tế bào cách nhắm mục tiêu màng tế bào gây chết tế bào vi khuẩn ( Raffi et al., 2008, Rai cộng sự, 2009 ) Vì vậy, nghiên cứu gần cho thấy tạo loại oxy hoạt tính, enzyme tế bào gây hại (chuỗi hô hấp tế bào), phá vỡ màng tế bào, phá hủy DNA cuối dẫn đến phân li chết tế bào Hoạt tính kháng khuẩn vi khuẩn kháng thuốc chống vi khuẩn chống vi khuẩn thiết lập cần phải nghiên cứu thêm để xác định liệu hạt lựa chọn để điều trị phòng ngừa bệnh nhiễm vi khuẩn kháng thuốc Trong báo này, thiết kế nghiên cứu tổng hợp nhanh chóng nguồn gốc nông nghiệp với phương pháp đơn giản, không độc, hiệu mặt kinh tế thân thiện với môi trường sử dụng chiết xuất Ocimum gratissimum sử dụng tính chất giảm chiết xuất O.gratissimum , hiệu chống lại vi khuẩn gram dương gram âm khác liều thấp Vật liệu phương pháp 2.1 Phương tiện truyền thơng hóa chất Tất phương tiện vi sinh vật hóa chất thu từ HiMedia Laboratories, Ấn Độ, Merck Ltd., SRL Pvt., Ltd., Mumbai Nước Ultrapure Milli Q sử dụng suốt nghiên cứu 2.2 Các chủng vi khuẩn sử dụng nghiên cứu Các vi khuẩn E coli ( MC - ) S aureus ( MMC - 20 ) bị phân lập trước phịng thí nghiệm chúng tơi ( Dash et al., 2012, Chakraborty cộng sự, 2011 ) Các chủng nuôi cấy sử dụng suốt nghiên cứu Các chủng kháng với số kháng sinh truyền thống 2.3 Chuẩn bị chiết xuất Lá O gratissimum thu thập từ khu vực trường đại học Vidyasagar, Tây Bengal, Ấn Độ 20 g tươi O.gratissimum thu thập rửa nhẹ nhàng với nước cất đôi để loại bỏ hạt bụi Các cắt nhỏ tiếp xúc với ánh nắng mặt trời chúng hồn tồn khơ Các vật liệu hịa tan nước cất (10 g bụi / 100 ml nước cất kép) lọc giấy lọc Whatman số Bộ lọc thu thập, sấy khô bảo quản nhiệt độ o C sử dụng 2.4 Tổng hợp lọc VQG Ag Tổng hợp Ag NP sử dụng bột khô O gratissimum chiết xuất thực theo phương pháp Sintubin et al., (2011) với số sửa đổi Hạt nano bạc (Ag NPS) tổng hợp cách hòa tan 10 -3 M muối nitrat bạc (Agno ) 100 ml nước cất giải pháp đặt tàu phản ứng 250 ml Có tổng cộng 100 mg chất chiết từ đông khô thêm vào Agno giải pháp nhiệt độ phòng cho trình sinh học giảm Sau thêm chiết xuất lá, giá trị pH dung dịch điều chỉnh đến 10,0 pH dung dịch NaOH 7,7 M Các phản ứng tàu sau rung với tốc độ quay 150 vòng / phút điều kiện bóng tối 30 ° C 48 Dung dịch chứa Ag NPs sau thu thập ly tâm tốc độ 3000 vòng / phút 10 phút để loại bỏ thành phần chiết xuất thừa 2.5 Đặc điểm VQG Nông nghiệp 2.5.1 Quang phổ UV-vis Để quan sát tài sản quang học hạt nhân Ag, mẫu phân tích cho nghiên cứu quang phổ UV-vis (Shimadzu UV / vis 1800 spectrophotometer) nhiệt độ phòng hoạt động độ phân giải nm khoảng 190 1100 nm ( Dash et al., 2014 ) 2.5.2 Quang phổ hồng ngoại biến đổi Fourier Các NPN Ag điều tra quang phổ IR biến đổi Fourier với hệ thống IR IR biến đổi Fourier PerkinElmer Spectrum RX I với tần số từ 500 đến 4000 cm -1 độ phân giải cm -1 Phương pháp viên KBr sử dụng để chuẩn bị mẫu ( Chattopadhyay et al., 2013a ) 2.5.3 Tán xạ ánh sáng động (DLS) tiềm zeta Phân tích DLS thực Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments) theo phương pháp chuẩn với số sửa đổi ( Chattopadhyay cộng sự, 2013a ) Nồng độ NPN nông nghiệp 100 μg / mL sonicated phút, kích thước hạt động đo cách ngưng hai giọt dung dịch nước NPs 10 mL nước Millipore Khi NP phân tán hoàn toàn nước, chúng phân tích máy phân tích DLS Các thí nghiệm lặp lại nhiều lần để có kích thước trung bình NP Tiềm zeta NPN Nông nghiệp đo cách sử dụng Zetasizer-Nano ZS (Malvern, Malvern Hills, Anh) mg / ml Dung môi Ag NP chuẩn bị nước Milli-Q Sau đó, tạm ngưng sử dụng cho thử nghiệm ( Dash cộng sự, 2014 ) 2.5.4 Quét kính hiển vi điện tử Kích thước hạt cấu trúc vi mơ nghiên cứu kính hiển vi điện tử quét độ phân giải cao (SEM, dụng cụ Nikon, Nhật Bản) ( Chattopadhyay et al., 2013a ) Nói tóm lại, NPN nơng nghiệp bị ngâm nước khử ion nồng độ mg / ml sau sonic sử dụng bồn sonicator mẫu tạo thành hệ thống treo đồng Đối với phép đo kích thước, dung dịch phân giải nước tiểu NPN Ag (1 mg / mL) pha loãng 20 lần Sau đó, giọt dung dịch nước sonicated lấy kính làm khơ Sau đó, mẫu tráng vàng hình ảnh chụp SEM sử dụng để mô tả đặc điểm kích cỡ hình dạng NPN Nơng nghiệp 2.5.5 Siêu âm điện tử truyền Kích thước hạt cấu trúc vi mơ nghiên cứu kính hiển vi điện tử truyền qua độ phân giải cao JEOL 3010, Nhật Bản, hoạt động 200 kV theo phương pháp Chattopadhyay cộng sự, (2012) với số sửa đổi Nói tóm lại, NPN Ag bị đình nước khử ion với nồng độ mg / mL sau mẫu sonicated cách sử dụng bồn sonicator mẫu tạo thành hệ thống treo đồng Đối với phép đo kích thước, dung dịch mẫu sonicated tất NPN Ag (0.5 mg / mL) pha loãng 20 lần TEM sử dụng để mơ tả đặc điểm kích thước hình dạng VQG Ag Một giọt dung dịch Ag NPs nước đặt lên lưới đồng phủ cacbon điều làm khơ khơng khí để có hình ảnh TEM 2.5.6 Nghiên cứu nhiễu xạ tia X Sự phân tán trạng thái rắn NPN nông nghiệp đánh giá nhiễu xạ tia X Các mẫu nhiễu xạ thu cách sử dụng thiết bị chiết xuất XPERT-PRO (PANalytical Ltd., Hà Lan) với bán kính 240 mm Các xạ Cu Kα (Kα 1.54060 Å) lọc Ni Một hệ thống phân chia nhận khe tương ứng ° 0,1 mm, sử dụng Các mẫu thu thập với 40 kV điện áp ống 30 mA ống quét qua θ loạt 10-90 ° 2.5.7 Nghiên cứu EDX Kỹ thuật xác định thành phần nguyên tố mẫu Trong nghiên cứu này, sử dụng để xác nhận diện bạc hạt để phát thành phần nguyên tố khác hạt Bên cạnh việc xác định yếu tố có mẫu cách sử dụng EDX ước lượng nồng độ chúng Dung dịch hạt pha loãng 100 lần nước giọt dung dịch pha loãng 10 μl đặt đầu cịn carbon khơng khí khô Phổ EDX thu điện áp tăng tốc 20 kV thu thập 19 S Việc lập đồ hoàn thành cách sử dụng màu giả để đại diện cho phân bố không gian hai chiều lượng phát thải lượng nguyên tố hóa học có mẫu Phân tích thực cách sử dụng JEOL JSM 6360 trang bị máy phân tích X-quang phân tán EDX ( Majumdar cộng sự, 2013 ) 2.6 Phép thử kết hợp protein huyết tương Xét nghiệm gắn kết protein huyết tương thực cách sử dụng huyết tương người theo Chattopadhyay cộng sự, (2013b) Mẫu huyết tương người thu thập từ 10 người khoẻ mạnh theo chấp thuận quan sinh học Hai miligam mililít nanosilver trộn với mL 50 mM PBS 0.5 mL huyết tương người (8 mg / mL) thêm vào với khuấy mạnh lồng ấp lắc 24 37 ° C Các hạt nano ly tâm tốc độ 10000 vòng / phút 10 phút sử dụng bề mặt để xác định nồng độ protein cách làm theo phương pháp Lowry cộng sự, (1951) Plasma khơng có NPs sử dụng kiểm sốt để đảm bảo khơng có lượng mưa protein (Lowry cộng sự, 1951 ) 2.7 Xác định hoạt tính kháng khuẩn 2.7.1 Xác định MIC MBC MIC MBC xác định phương pháp pha loãng, sử dụng Luria canh (Hi-phương tiện truyền thông, Ấn Độ) Chế phẩm 2,5 × 10 CFU / mL Nói tóm lại, lọai vi khuẩn bổ sung 10 μL (2,5 x 10 CFU / mL) cho ml nước dùng chất dinh dưỡng (NB) Các nồng độ khác hạt thử nghiệm (sự huyền phù tinh thể hạt hình thành sonication hoạt động dung dịch hòa tan phản ánh xác lượng bạc có dung dịch để hoạt động vi sinh vật) thêm vào ống nghiệm có chứa mẫu thử nghiệm Sau 24 h ủ bệnh, giá trị MIC thu cách kiểm tra độ đục phát triển vi khuẩn Giá trị MIC tương ứng với nồng độ ức chế 99% phát triển vi khuẩn ( Dash et al., 2012 ) Giá trị nồng độ diệt khuẩn (MBC) tối thiểu hạt xác định theo phương pháp chuẩn ( Dash et al., 2012 ) Các giá trị MBC xác định cách nhân pha lỗng MIC vào đĩa thạch Muller Hinton vơ trùng ủ 37oC 24 Nồng độ thấp hạt nano giết chết hoàn toàn vi khuẩn kiểm tra ghi nhận lập bảng theo mức MBC Giá trị MBC tương ứng với nồng độ 100% phát triển vi khuẩn bị bắt, so với kiểm soát dương (không điều trị) Tất xét nghiệm thực tủ an toàn sinh học 2.7.2 Mức độ cho phép Mức độ khoan dung chủng vi khuẩn NPN nông nghiệp xác định theo phương pháp May cộng sự, (2006) sử dụng cơng thức sau: Lịng khoan dung=MBC/MIC 2.7.3 Phun đĩa thạch (DAD) Tính nhạy cảm vi khuẩn kháng đa kháng khác tế bào AG Ag tổng hợp xác định kỹ thuật khuếch tán thạch đĩa (DAD) theo Bauer cộng sự, (1966) Các vi khuẩn thử nghiệm lấy từ văn hóa qua đêm (tiêm từ thuộc địa nhất) tươi trồng h có 10 CFU / mL chuẩn chống lại tiêu chuẩn McFarland Với văn hoá này, bãi cỏ vi khuẩn chuẩn bị thạch MuellerHinton Lọc đĩa giấy có kích thước 6-mm sử dụng để quan sát mơ hình nhạy cảm với thuốc chống vi khuẩn vi khuẩn Ag thu tổng hợp Các hạt nano bạc đĩa giấy lọc AgNO chuẩn bị cách hấp thụ 10 μL mg / ml Ag NP AgNO 3giải pháp tương ứng Đường kính khu vực ức chế tăng trưởng vi khuẩn xung quanh đĩa (kể đĩa) đo ( Dash et al., 2012, Bauer cộng sự, 1966 ) 2.7.4 Giết chết động học Xét nghiệm động học diệt chủng E coli S aureus nghiên cứu chống lại nguồn nước nông nghiệp theo phương pháp Guggenbichler cộng sự, (1985) Sự phát triển vi khuẩn sau điều trị (theo giá trị MBC tương ứng) đo cách xác định số lượng tế bào tồn thời điểm 0, 2, 4, 8, 12, 18 24 sau ấp trứng với nồng độ Ag NP Tỷ lệ ức chế tăng trưởng đạt kiểm soát dương Khả tồn tế bào vi khuẩn đo phương pháp quang phổ phương pháp quang phổ Shimadzu UV / vis 1800 2.7.5 Ức chế hình thành màng sinh học Yếu tố nguy hình thành màng sinh học đo theo phương pháp Stepanovic et al với số sửa đổi ( Stepanovic et al, 2004 ) 20 μL (2,5 x 10 CFU / mL) chủng vi khuẩn bổ sung riêng lẻ vào mL nước dung môi (NB) Các nồng độ khác hạt thử tinh thể chủng (bằng sonication) thêm vào ống nghiệm có chứa mẫu thử nghiệm Các tế bào vi khuẩn xử lý NPP Ag NP nuôi cấy qua đêm mơi trường LB sau chuẩn hóa với mật độ giống dựa OD 600 μL tiêm vào 500 μL nước dùng LB 10 mL ống thủy tinh borosilicate Các ống ủ trạng thái tĩnh 30oC 22 h Các ống rửa nước cất, ủ với 600 μl 0,1% tinh thể tím 30 phút, rửa lại nước cất Sau thêm 1.0 mL dimethyl sulphoxide, ống vortex để 10 phút, mật độ quang học đo quang phổ kế UV Shimadzu UV / vis bước sóng 570 nm 2.7.6 Nghiên cứu khả sinh sôi tế bào vi khuẩn Khả sống sót tế bào vi khuẩn thực sau 12 điều trị với NPN phương pháp bromide 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5diphenyltetrazolium (MTT) theo phương pháp chuẩn ( Mosmann, 1983 ) Các vi khuẩn điều trị thuốc ly tâm 1000 g 10 phút ° C, sau rửa nhiều lần hai lần với PBS vơ trùng (pH 7,4) Sau đó, mơi trường thay RPMI tươi (khơng có phenol đỏ FBS) chứa 0,5 mg / mL MTT Sau thêm ủ 37 ° C, thêm dung dịch HCl-isopropanol sau 15 phút ủ nhiệt độ phòng, độ hấp thụ sản phẩm formazan hòa tan đo máy quang phổ Shimadzu UV / vis 1800 bước sóng 570 nm 2.7.7 Số lượng tế bào sống máy dò sét kích hoạt huỳnh quang Rh123 vết bẩn mà làm mờ ty thể tế bào sống, chúng tơi sử dụng vết bẩn tồn ( Mason cộng sự, 1993b ) Các vi khuẩn có tiềm màng ngăn cấm thuốc nhuộm xâm nhập, vi khuẩn sống với màng khử cực cho phép chúng xâm nhập vào tế bào Các tế bào vi khuẩn nuôi cấy ly tâm tốc độ 1800 vòng / phút 10 phút ° C, rửa hai lần với dung dịch muối phosphate (pH 7,4), thay dung dịch đệm tương tự hạt nano bạc gắn nhãn Rh123 theo nồng độ yêu cầu (nồng độ MIC tương ứng) đặt 37 ° C 12 điều kiện tối Các tế bào khơng có Rh123 dùng làm kiểm sốt âm Sau ủ, tế bào rửa hai lần PBS, phân tích phép đo dịng chảy (Model: FACS calibur flow cytometer, Becton Dickinson) 2.7.8 Nghiên cứu hấp thu nội bào RhB thuốc nhuộm cation nhạy cảm với điện áp, nạp vào vi khuẩn có nguồn lượng nhờ vào tiềm điện hóa xuyên màng (bên âm) màng tế bào Các NPG nông nghiệp dán nhãn với Rhodamine B theo Mason et al (1993) Đối với việc ghi nhãn này, thuốc nhuộm Rh-B ( 20mg / mL nước vô trùng) thêm vào Ag NP nồng độ vết bẩn 0.2 mg / mL giữ 37oC bóng tối Các vi khuẩn vi khuẩn tươi ly tâm 1000 g ° C 10 phút, rửa hai lần với PBS (pH 7,4), thay đệm cho nồng độ Ag bắt buộc Rh-B theo nồng độ yêu cầu đặt 37 ° C bóng tối 12 h Các tế bào khơng có Rh-B kiểm sốt âm Sau 12 ủ, tế bào rửa treo lại PBS, giọt huyền phù kiểm tra với pha nghiên cứu Olympus tương phản với kính hiển vi huỳnh quang (Model: CX41; Olympus Singapore Pvt., Ltd., Valley Point Office Tower, Singapore) Hình ảnh huỳnh quang thu với laser 540 nm cho kính hiển vi tương phản chênh lệch tạp laser 625 nm cho kích thích phát xạ Rh-B 2.7.9 Thế hệ ROS nội bào Sản xuất ROS nội bào đo cách sử dụng diacetate 2,7dichlorofluorescein (DCFH -DA) ( Dash et al., 2014 ) Q trình oxy hóa DCF huỳnh quang khơng huỳnh quang với huỳnh quang 20,70dichlorofluorescein (DCF) mang lại kiểm định định lượng hình thành ROS DCFH -DA thụ động nhập vào tế bào phản ứng với ROS để tạo thành hợp chất huỳnh quang cao 2,7-dichlorofluorescein Tóm lại, 10 mM DCFH giải pháp -DA chứng khốn (trong methanol) pha lỗng môi trường nuôi cấy để tạo 100 mM giải pháp làm việc Khi tiếp xúc với NP, tế bào vi khuẩn thu hoạch rửa ba lần với PBS Các viên tế bào thu thập hệ thống treo đồng thực PBS lên đến mL Sau đó, tế bào ủ với 1,5 ml dung dịch DCFH làm việc -DA 37 ° C 30 phút Các tế bào lysed dung dịch kiềm ly tâm tốc độ 2200 vòng / phút Một mililit nước bề mặt chuyển sang cuvette, huỳnh quang đo 520 nm với quang phổ huỳnh quang (Hitachi F-1700) sử dụng kích thích 485 nm khác chuẩn bị theo cách tương tự để phân tích cytometry dịng chảy Các giá trị biểu diễn dạng cường độ huỳnh quang phần trăm so với giếng đối chứng Các xạ huỳnh quang chụp kính hiển vi tương phản pha Sự tạo ROS nội bào xác nhận phân tích FACs 2.7.10 Hành động hạt nano bạc cấu trúc tế bào vi khuẩn Các thể tích mơi trường nuôi cấy khác nhau, dung dịch Ag NP tế bào vi khuẩn thêm vào 10 ml nuôi cấy, kết nồng độ cuối giá trị MIC tương ứng nồng độ 10 CFU / mL tế bào vi khuẩn Kiểm soát thí nghiệm tiến hành trường hợp khơng có VQG Ag Các mơi trường ni cấy 37 ± ° C với lắc tốc độ 198 rpm 12 Sau ủ, nuôi cấy vi khuẩn ly tâm loại bỏ chất siêu phủ Pallet vi khuẩn cố định với 50 μl 2,5% glutaraldehyde phút 37oC rửa ba lần với 1X PBS 50 μl PBS thêm vào pallet để tạo thành hệ thống treo Một giọt pallet cố định lấy kính làm khơ Sau mẫu bọc vàng sử dụng để quan sát kính hiển vi điện tử quét (SEM, Hitachi S-3000N) 2.8 Phân tích thống kê Các liệu biểu diễn giá trị trung bình ± sai số chuẩn trung bình ( n = 6) Sự so sánh phương tiện kiểm sốt nhóm đối xử thực cách phân tích chiều phương sai (sử dụng gói thống kê Xuất xứ 6.1, Lab gốc, Northampton, MA, USA) với nhiều kiểm tra so sánh t p < 0,05 giới hạn tầm quan trọng kết thảo luận 3.1 Tổng hợp Ags NP Sau trình giảm sinh học, màu sắc bình phản ứng màu nâu tối Sự xuất màu nâu sẫm bình phản ứng dấu hiệu hình thành Ag NP Cường độ màu tăng theo thời gian giảm Ag + Việc giảm ion bạc rõ ràng rõ ràng từ thay đổi màu sắc liên kết với Hình cho thấy số AgNO 3giải pháp (A), màu sắc thay đổi trước (B) sau (C) trình giảm tiền thân chúng chuyển đổi thành VQG Nơng nghiệp sau thời kỳ lão hóa khác q trình bảo quản điều kiện mơi trường xung quanh Sau bổ sung sinh khối vào dung dịch bạc nitrate, dung dịch chuyển từ màu không màu sang màu nâu tối Sinh khối khơ tìm thấy đóng vai trị quan trọng việc tổng hợp NPN Nông nghiệp Người ta biết thay đổi màu sắc giải pháp kích thích rung động Plasmon bề mặt với NPN Ag ( Mulvaney, 1996 ) Tải xuống hình ảnh có độ phân giải cao (139KB) Tải hình ảnh kích thước đầy đủ Hình Thay đổi màu sắc cho thấy hình thành NPN Nông nghiệp Ở đây, A: Agno 3giải pháp, B: Agno + hương nhu trắng chiết xuất h, C: Agno + hương nhu trắng chiết xuất 48 h Màu tím đậm hình thành NPN Nơng nghiệp 3.2 Đặc tính hạt nano 3.2.1 Quang phổ UV-vis Phổ hấp thụ NPN Ag thể hình Mẫu cho thấy plasmon bề mặt đặc trưng NPN Nông nghiệp Các VQG Nơng nghiệp có dải hẹp với tối đa 415 nm Phổ hấp thụ NPN tam giác Ag cho thấy đỉnh cao 420 450 nm với dịch chuyển màu xanh đỏ kích thước hạt giảm tăng tương ứng ( Pal cộng sự, 2007, Jana cộng sự, 1999 ) Các tính chất vật lý kích thước hạt, hình dạng tính tích điện bề mặt, đóng vai trò quan trọng việc hấp thụ hạt nano Sự hấp thu cellulose hạt nano thực theo trình gồm hai bước: bước đầu tiên, bước gắn màng tế bào thứ hai, bước internalization Việc gắn hạt nano vào màng tế bào dường bị ảnh hưởng nhiều tích điện bề mặt hạt Sự biến đổi lượng bề mặt hạt kiểm soát liên kết với tế bào đưa NP trực tiếp vào khoang tế bào Phản ứng huỳnh quang Rh-B thay đổi với tiềm màng tế bào Màng tế bào vi khuẩn có tính điện âm cao Ag NP tương đối tiêu cực (phí gần trung tính) Vì hai tế bào vi khuẩn có điện tích bề mặt âm tính cao, đại lượng Ag NP cho thấy tăng lên tối đa kích thước nhỏ với điện tích bề mặt gần trung hòa, lưu ý ổn định thuốc đóng vai trị quan trọng khác việc hấp thụ tế bào Trong bước thứ hai, trình internalization hạt nano xảy đường bào mòn (endocytosis pathway)Zhang cộng sự, 2008 ) Trong trình endocytosis, tế bào dễ dàng hấp thụ vật liệu nanô cách xâm lấn phần nhỏ màng plasma bề mặt tạo túi bào nội bào xung quanh chất để vận chuyển bên tế bào ( Cooper, 2000 ) 3.3.8 Thế hệ ROS nội bào Việc tạo Loài oxy phản ứng chứng minh góp phần gây cytotoxicity gây Ag NP vi khuẩn Trong nghiên cứu này, chúng tơi đo lồi ơxy phản ứng tế bào (ROS), 2,7-dichlorofluorescin-diacetate (DCFH -DA) sử dụng nội bào ROS-chỉ thị cho tế bào điều trị Ag NP Sau tiếp xúc với hạt nano, vi khuẩn nhuộm với DCFH DA 30 phút Chúng phát NP Ag điều trị E coli S aureus vi khuẩn trở thành DCF +, ROS tạo tham gia Ag NP qua trung gian tế bào chết ( 15a Hình) Ngược lại, sau quy trình tương tự mà khơng có NPN Ag, khơng tìm thấy tế bào huỳnh quang, cho thấy khơng hệ ROS Sản lượng ROS cường độ huỳnh quang DCF không thay đổi đáng kể hai loại vi khuẩn Sự phát ROS tế bào dòng chảy cho thấy hạt nano bạc tăng cường tạo ROS tế bào E coli S aureus tương ứng 85,68% 89,36% ( Hình 15b ) Vì vậy, chúng tơi tin khả chống vi trùng VQG Nông nghiệp liên quan đến việc tạo ROS nội bào Mức độ ROS nội bào tăng cao trung gian ứng cử viên cho chết tế bào Việc sản xuất ROS vận chuyển điện tử cản trở dọc theo chuỗi hô hấp màng plasma bị hỏng ( Su cộng sự, 2009) Các chế việc sản sinh ROS tế bào xử lý Ag NP nghiên cứu sâu Tải xuống hình ảnh có độ phân giải cao (109KB) Tải hình ảnh kích thước đầy đủ Hình 15a Hình ảnh vi mơ hình thành ROS nội bào tế bào vi khuẩn E coli S aureus đa kháng Tải xuống hình ảnh có độ phân giải cao (123KB) Tải hình ảnh kích thước đầy đủ Hình 15b Sự tạo ROS nội bào ROS vi khuẩn E.coli S aureus kháng nhiều nấm phát phương pháp Flow cytometry Đáp : Kiểm soát E coli ; B : E coli điều trị; C: Kiểm soát S aureus ; D : S aureus Điều trị 3.3.9 Hành động hạt nano bạc cấu trúc tế bào vi khuẩn Các đồ thị vi điện tử SEM E.coli tế bào S aureus xử lý không điều trị với nồng độ Ag NP thể Hình 16 Các hạt nano bạc màng vi khuẩn bên quan sát kính hiển vi điện tử Kính hiển vi điện tử xác định phân bố vị trí hạt nano bạc, hình thái học vi khuẩn sau xử lý hạt nano bạc Micrograph SEM cho thấy bề mặt tế bào vi khuẩn nhóm chứng (khơng điều trị) trơn tru cho thấy đặc trưng điển hình bề mặt tế bào địa, mịn màng nguyên vẹn, số sợi xung quanh tế bào rõ ràng, tế bào điều trị với Ag NPs bị tổn thương nghiêm trọng Một số tế bào cho thấy rị rỉ lớn, người khác bị méo mó phân mảnh Nhiều lỗ hổng khoảng trống xuất ảnh vi mô, màng tế bào chúng bị phân mảnh Hình ảnh SEM tế bào vi khuẩn xử lý với NPN Ag cho thấy khoảng trống lớn xuất màng tế bào, vi khuẩn không tổ chức thành nhiều phần cho thấy nhiều vi khuẩn phân tán Cơ chế mà hạt nano có khả xâm nhập vào vi khuẩn khơng hiểu hồn toàn, nghiên cứu cho thấy tế bào vi khuẩn điều trị bạc, thay đổi diễn hình thái màng nó, làm tăng đáng kể độ thẩm thấu ảnh hưởng đến vận chuyển thích hợp qua plasma màng, để lại tế bào vi khuẩn khơng có khả điều hồ vận chuyển thơng qua màng tế bào, dẫn đến tử vong tế bào Các hạt nano bạc xâm nhập bên vi khuẩn gây thiệt hại cách tương tác với hợp chất chứa phốt lưu huỳnh DNA, enzyme điều chỉnh ( Cơ chế mà hạt nano có khả xâm nhập vào vi khuẩn khơng hiểu hồn tồn, nghiên cứu cho thấy tế bào vi khuẩn điều trị bạc, thay đổi diễn hình thái màng nó, làm tăng đáng kể độ thẩm thấu ảnh hưởng đến vận chuyển thích hợp qua plasma màng, để lại tế bào vi khuẩn khơng có khả điều hồ vận chuyển thông qua màng tế bào, dẫn đến tử vong tế bào Các hạt nano bạc xâm nhập bên vi khuẩn gây thiệt hại cách tương tác với hợp chất chứa phốt lưu huỳnh DNA, enzyme điều chỉnh ( Cơ chế mà hạt nano có khả xâm nhập vào vi khuẩn khơng hiểu hồn tồn, nghiên cứu cho thấy tế bào vi khuẩn điều trị bạc, thay đổi diễn hình thái màng nó, làm tăng đáng kể độ thẩm thấu ảnh hưởng đến vận chuyển thích hợp qua plasma màng, để lại tế bào vi khuẩn khơng có khả điều hồ vận chuyển thơng qua màng tế bào, dẫn đến tử vong tế bào Các hạt nano bạc xâm nhập bên vi khuẩn gây thiệt hại cách tương tác với hợp chất chứa phốt lưu huỳnh DNA, enzyme điều chỉnh ( thay đổi diễn hình thái màng nó, làm tăng đáng kể độ thẩm thấu ảnh hưởng đến vận chuyển thích hợp qua màng tế bào, khiến tế bào vi khuẩn không điều chỉnh vận chuyển thông qua màng tế bào dẫn đến tử vong tế bào Các hạt nano bạc xâm nhập bên vi khuẩn gây thiệt hại cách tương tác với hợp chất chứa phốt lưu huỳnh DNA, enzyme điều chỉnh ( thay đổi diễn hình thái màng nó, làm tăng đáng kể độ thẩm thấu ảnh hưởng đến vận chuyển thích hợp qua màng tế bào, khiến tế bào vi khuẩn không điều chỉnh vận chuyển thông qua màng tế bào dẫn đến tử vong tế bào Các hạt nano bạc xâm nhập bên vi khuẩn gây thiệt hại cách tương tác với hợp chất chứa phốt lưu huỳnh DNA, enzyme điều chỉnh (Morones cộng sự, 2005 ) Bạc có xu hướng có lực cao để phản ứng với hợp chất Những tượng cho thấy chế kháng khuẩn có nhờ Ag NPs ức chế phát triển vi khuẩn, phản ứng tế bào việc điều trị Ags Dựa nghiên cứu tại, mơ hình hành động VQG Nơng nghiệp mô tả VQG NP phá vỡ độ thẩm thấu màng trước tiên, dẫn đến rò rỉ vật liệu tế bào Ag NPs nhập vào màng sản sinh ROS, ức chế phát triển tế bào Đồng thời, Ag NP ảnh hưởng đến số thành phần tế bào gây sụp đổ màng tế bào, dẫn đến phân hủy tế bào tử vong cuối ( Li cộng sự, 2010 ) Tải xuống hình ảnh có độ phân giải cao (275KB) Tải hình ảnh kích thước đầy đủ Hình 16 Hành động VQG Nông nghiệp tế bào E coli S aureus quan sát SEM Đáp: Kiểm soát E coli ; B: E coli điều trị; C: Kiểm soát S aureus ; D: S aureus Điều trị Phần kết luận Nghiên cứu đại diện cho phương pháp tổng hợp thành công NPN Nông nghiệp thông qua tuyến đường màu xanh cách sử dụng chiết xuất O.gratisimum chất làm sinh học Các phép đo vật lý cho thấy hạt nano tổng hợp có kích thước nhỏ tinh khiết tự nhiên, sản phẩm thực vật protein thực vật chất phytochemicals đóng vai trị chất hạn chế Hoạt tính kháng khuẩn hạt kiểm tra chủng E.coli S aureus kháng nhiều thuốc Nó thể Ag NPS cho thấy hoạt động chống vi khuẩn hiệu cao tìm thấy chống lại E coli Các NPG Nông nghiệp tìm thấy chất ức chế hiệu hình thành màng sinh học hai loại chủng Cơ chế giết vi khuẩn làm hư màng tế bào theo sau tạo ROS Vật liệu nano lựa chọn khác để điều trị nhiễm khuẩn vi khuẩn đa kháng Vì vậy, vi sinh vật sử dụng để điều trị siêu vi khuẩn phạm vi rộng lĩnh vực y tế Lời cảm ơn Các tác giả thể biết ơn Đại học Vidyasagar, Midnapore CRNN, Đại học Calcutta việc cung cấp phương tiện để thực nghiên cứu Chúng chân thành cảm ơn ơng Joydeep Adhikari, Khoa Hóa học, Đại học Calcutta, 92, Đường APC, Kolkata - 700 009, Ấn Độ, để đo EDX Phụ lục A Tài liệu bổ sung Tải tài liệu Word (3MB)Trợ giúp với tệp docx Dữ liệu bổ sung Tài liệu tham khảo Ahmad cộng sự, năm 2003 A Ahmad , S Senapati , MI Khan , R Kumar , R Ramani , V Srinivas , M Sastry Sựtổng hợp nội bào hạt nano vàng chất actinomycete có tính alkalotolerant, lồi Rhodococcus Cơng nghệ nano , 14 ( 2003 ) , trang 824 - 828 CrossRefXem Nội dung Scopus Albrecht cộng sự, 2006 MA Albrecht , CW Evan , CLHóa học xanhRastonvà hàm ý sức khoẻ hạt nano Hóa học Xanh , ( 2006 ) , trang 417 - 432 CrossRefXem Nội dung Scopus Amro cộng sự, 2000 NA Amro , LP Kotra , K Wadu-Mesthrige , A Bulychev , S Mobashery , G LiuCác nghiên cứu kính hiển vi điện tử có độ phân giải cao màng Escherichia coli : cấu trúc sở tính thấm Langmuir , 16 ( 2000 ) , trang 2789 - 2796 CrossRefXem Nội dung Scopus Applerot cộng sự, 2012 G Applerot , J Lellouche , A Lipovsky , Y Nitzan , TR Lubar , A Gedanken , E BaninHiểu chế kháng khuẩn hạt nano CuO: tiết lộ đường stress oxy hóa gây Nhỏ , ( 2012 ) , trang 3326 - 3337 CrossRefXem Nội dung Scopus Awwad Salem, năm 2012 AM Awwad , NM SalemGreen tổng hợp hạt nano bạc chiết xuất dâu Nanosci Công nghệ nano , ( 2012 ) , trang 125 - 128 Xem hồ sơ Scopus Bauer cộng sự, 1966 AW Bauer , WMM Kirby , JC Sherris , M Turchkháng sinh nhạy cảm thử nghiệm phương pháp đĩa đơn tiêu chuẩn hóa Là J Clin Pathol , 45 ( 1966 ) , trang 493 - 496 Xem hồ sơ Scopus Chakraborty cộng sự, 2011 SP Chakraborty , S KarMahapatra , M Bal , S RoyCách ly nhận dạng Staphylococcus aureus kháng vancomycin từ mẫu mủ sau phẫu thuật Al Ameen J Med Khoa học , ( 2011 ) , trang 152 - 168 Xem hồ sơ Scopus Chattopadhyay cộng sự, 2012 S Chattopadhyay , SP Chakraborty , D Laha , R Baral , P Pramanik , S RoyCác hạt nano oxit coban oxit biến đổi bề mặt: hội để phát triển thuốc chống ung thư Ung thư Nano , ( 2012 ) , trang 13 - 23 CrossRefXem Nội dung Scopus Chattopadhyay cộng sự, 2013a S Chattopadhyay , SK Dash , T Ghosh , D Das , P Pramanik , S RoyThay đổi bề mặt hạt nano oxit coban axit phosphonomethyl iminodiacetic, sau axit folic: loại chất tương thích sinh học để phân phối thuốc chống ung thư Ung thư Nano , ( 2013 ) , trang 103 - 116 CrossRefXem Nội dung Scopus Chattopadhyay cộng sự, 2013b S Chathopadhyay , SK Dash , T Ghosh , S Das , S Tripathy , D Mandal , D Das , P Pramanik , S Roy Tácnhân chống lại ung thư đóng vai trị miễn dịch kháng nguyên khối u có chứa hạt nano cobalt oxide J Biol Inorg Chem ( 2013 ) , 10.1007 / s00775-013-1044-y Cooper, 2000 GM CooperCác tế bào: Một cách tiếp cận phân tử ( ấn thứ hai ) , ASM Press , Washington, DC ( 2000 ) Dash cộng sự, 2012 SK Dash , SP Chakraborty , D Mandal , S RoyCách ly đặc trưng Escherichia coli kháng nấm đa kháng thuốc mẫu nước tiểu bệnh nhân bị nhiễm trùng đường tiểu Int J Khoa học sống Pharm Res , ( 2012 ) ISSN: 2250-0480 Dash cộng sự, 2014 SK Dash , T Ghosh , S Roy , S Chattopadhyay , D DasKẽm hạt nano sulfide chọn lọc gây độc tế bào hiệu ứng genotoxic tế bào bạch cầu: tham gia lồi ơxy phản ứng hoại tử khối u alpha yếu tố J Appl Toxicol , 34 ( 2014 ) , tr 1130 - 1144 CrossRefXem Nội dung Scopus Dick son, 199 DPE DicksonTừ tính nano cấu trúc hệ thống sống J Magn Magn Mater , 203 ( 1999 ) , trang 46 - 49 Bài báoPDF ( 129KB )Xem ghi Scopus Dur án cộn g sự, nă m 200 N Durán , PD Marcato , CV Alves , GIH De-Souza , E Espositokhía cạnh học sinh tổng hợp hạt nano bạc số oxysporum Fusarium chủng J Nanobiotechnol , ( 2005 ) , tr số CrossRefXem Nội dung Scopus Fayaz cộng sự, 2010 AM Fayaz , K Balaji , M Girilal , R Yadav , PT Kalaichelvan , R VenketesanSự tổng hợp sinh học hạt nano bạc hiệu hiệp đồng với kháng sinh: nghiên cứu vi khuẩn Gram dương Gram âm Nanomed Công nghệ nano Biol Med , ( 2010 ) , trang 103 - 109 Bài báoPDF ( 842KB ) Fox Modak, năm 1974 CL Fox , SM ModakCơ chế hoạt động bạc sulfadiazine vết thương vết bỏng vết thương Antimicrob Đại lý Chemother , ( 1974 ) , trang 582 - 588 CrossRefXem Nội dung Scopus Gong cộng P Gong , H Li , X Ông , K Wang , J Hu , W Tan , S ZhangHoạt tính chuẩn bị kháng khuẩn Fe O @Ag hạt nano Công nghệ nano , 18 ( 2007 ) , trang 604 - 611 Xem hồ sơ Scopus Guggenbichler JP Guggenbichler , E Semenitz , P König Chạyđộng học mơ hình tái phát vi khuẩn tiếp xúc với nồng độ kháng sinh mô người quan sát thấy thể J Antimicrob Chemother , 15 ( 1985 ) , trang 139 - 146 CrossRefXem Nội dung Scopus Hồng cộn SH Hong , J Jeong , S Shim , H Kang , S Kwon , KH Ahn , J YoonẢnh hưởng dòng điện lên phân bào không hoạt động vi khuẩn Biotechnol Bioeng , 100 ( 2008 ) , trang 379 - 386 CrossRefXem Nội dung Scopus Huang cộng s J Huang , Q Li , D Sun , Y Lu , Y Su , X Yang , H Wang , Y Wang , W Shao , N He , J Hong , C ChenBiosynthesis bạc hạt nano vàng tiểu thuyết quế Cinnamomum camphoraleaf Công nghệ nano , 18 ( 2007 ) , 10.1088 / 0957-4484 / 18/10/105104 Huang cộng s NM Huang , HN Lim , S Radiman , PS Khiew , WS Chiu , R Hashin , CH ChiaSucrose ester micellar trung gian tổng hợp hạt nano Ag tính chất kháng khuẩn Colloids Surf , 353 ( 2010 ) , trang 69 - 76 Bài báoPDF ( 1MB )Xem ghi Scopus Jana cộng NR Jana , TK Sau , T PalTrồng hạt bạc nhỏ làm chất xúc tác redox J Phys Chem B , 103 ( 1999 ) , trang 115 - 121 CrossRefXem Nội dung Scopus Joerger cộng R Joerger , T Klaus , CG GranqvistSinh học sản xuất vật liệu composite bạc-cacbon cho lớp phủ màng mỏng chức quang học Adv Mater , 12 ( 2001 ) , trang 407 - 409 Kawata cộng K Kawata , M Osawa , S OkabeĐộc tính in vitro hạt nano bạc liều không theo toxox với tế bào gan hepatoma người HepG2 Môi trường Khoa học Technol , 43 ( 2009 ) , trang 6046 - 6051 CrossRefXem Nội dung Scopus Leela Vivekan A Leela , M VivekanandanKhai thác nguồn tài nguyên thực vật chưa khai thác để tổng hợp hạt nano bạc Afr J Biotechnol , ( 2008 ) , trang 3162 - 3165 Xem hồ sơ Scopus Li cộng sự, 20 WR Li , XB Xie , QS Shi , HY Zeng , YS OU-Yang , YB ChenHoạt tính kháng khuẩn chế hạt nano bạc Escherichia coli Appl Microbiol Biotechnol , 85 ( 2010 ) , trang 1115 - 1122 CrossRefXem Nội dung Scopus Lowry cộng OH Lowry , NJ Rosebrough , AL Farr , RJ RandallĐo lượng protein với chất thử phenol Folin J Biol Chem , 193 ( 1951 ) , trang 265 - 275 Xem hồ sơ Scopus Macdonald Sm IDG Macdonald , WE SmithĐịnh hướng cytochrome c hấp thụ bề mặt colloid bạc làm thành citrate Langmuir , 12 ( 1996 ) , trang 706 - 713 CrossRefXem Nội dung Scopus Majumdar cộn R Majumdar , Túi BG , N MaityKeo nilotica(Babool) trích xuất chất trung gian tổng hợp nhanh hạt nano vàng nghiên cứu hoạt động xúc tác Int Nano Lett , ( 2013 ) , p 53 Xem hồ sơ Scopus Mason cộng s D Mason , R Allman , D LloydSử dụng thuốc nhuộm nhạy tiềm màng với vi khuẩn D Lloyd (Ed.) , Phương pháp đo khối lượng vi sinh học , Springer , London ( 1993 ) , trang 67 - 82 CrossRef May cộng sự, J tháng , K Shannon , A Vuaglycopeptide khoan dung Staphylococcus aureus J Antimicrob Chemother , 42 ( 2006 ) , trang 189 - 197 CrossRef Morones JR Morones , JL Elechiguerra , A Camacho , JT RamirezTác dụng diệt khuẩn hạt nano bạc Công nghệ nano , 16 ( 2005 ) , trang 2346 - 2353 CrossRefXem Nội dung Scopus Mosmann, 1983 T Mosmann Khảo sátmàu sắc nhanh cho tăng trưởng tế bào sống còn: áp dụng cho xét nghiệm tăng sinh cytotoxicity J Immunol Phương pháp , 65 ( 1983 ) , trang 55 - 63 Bài báoPDF ( 437KB )Xem ghi Scopus Moyer cộng s CA Moyer , L Brentano , DL Gravens , HW Margraf , WW Monafo Jr.Điều trị bỏng người lớn với giải pháp bạc nitrate 0.5% Arch Surg , 90 ( 1965 ) , trang 812 - 867 CrossRefXem Nội dung Scopus Mukherjee cộ P Mukherjee , A Ahmad , D Mandal , S Senapati , SR Sainkar , MI Khan , R Ramani , R Paris cha , PV Ajayakumar , M Alam , M Sastry , R KumarTái sinh AuCl (4) (-) nấm, Verticillium sp bẫy bề mặt hạt nano vàng hình thành Angew Chem Int Ed Engl , 40 ( 2001 ) , trang 3585 - 3588 CrossRefXem Nội dung Scopus Mulvaney, 1996 P MulvaneyQuang phổ plasmon bề mặt hạt kim loại nano Langmuir , 12 ( 1996 ) , trang 788 - 800 CrossRefXem Nội dung Scopus Nair Pradeep, B Nair , T PradeepSự liên kết hạt nano hình thành tinh thể tiểu micron hỗ trợ dòng Lactobacillus Cryst Tăng trưởng Des , ( 2002 ) , trang 293 - 298 CrossRefXem Nội dung Scopus Pal cộng sự, n S Pal , YK Tak , JM SongLiệu hoạt tính kháng khuẩn hạt nano bạc phụ thuộc vào hình dạng hạt nanô? Một nghiên cứu vi khuẩn Gram âm Escherichia coli Appl Môi trường Microbiol , 73 ( 2007 ) , tr 1712 - 1720 CrossRefXem Nội dung Scopus Pum Sleytr, 19 D Pum , UB SleytrỨng dụng lớp vi khuẩn S công nghệ nano phân tử Xu hướng công nghệ sinh học , 17 ( 1999 ) , tr - 12 Bài báoPDF ( 1MB )Xem ghi Scopus Raffi cộng sự, M Raffi , F Hussain , TM Bhatti , JI Akhter , A Hameed , MM HasanĐặc tính kháng khuẩn hạt nano bạc chống lại E coli ATCC-15224 J Mater Khoa học Technol , 24 ( 2008 ) , trang 192 - 196 Xem hồ sơ Scopus Rai cộng sự, n M Rai , A Yadav , A GadeBạc hạt nano hệ kháng sinh Biotechnol Adv , 27 ( 2009 ) , trang 76 - 83 Bài báoPDF ( 250KB )Xem ghi Scopus Sathyavathi c R Sathyavathi , MB Krishna , SV Rao , R Saritha , DN RaoBiosynthesis hạt nano bạc sử dụng chiết xuất Coriandrum sativum ứng dụng chúng quang học phi tuyến Adv Khoa học Lett , ( 2010 ) , tr - Xem hồ sơ Scopus Singh cộng R Singh , MAM Shushni , A Belkhei Cáchoạt động kháng khuẩn chống oxy hóa Mentha piperita L Ả Rập J Chem , ( 2015 ) , trang 322 - 328 Bài báoPDF ( 1MB )Xem ghi Scopus Singhal cộng G Singhal , R Bhavesh , K Kasariya , AR Sharma , RP SinghBiosynthesis hạt nano bạc chiết xuất Ocimum (Tulsi) sàng lọc hoạt tính kháng khuẩn J Nanopart Res , 13 ( 2011 ) , trang 2981 - 2988 CrossRefXem Nội dung Scopus Sintubin et al., 20 L Sintubin , B De Gusseme , P Van der Meeren , BF Pycke , W Verstraete , N BoonHoạt tính kháng khuẩn bạc sinh học phương thức hành động Appl Microbiol Biotechnol , 91 ( 2011 ) , trang 153 - 162 CrossRefXem Nội dung Scopus Soukupov cộn J Soukupov , L Kvytek , A Panacek , T Nevecna , R ZborilNghiên cứu tồn diện vai trị chất hoạt động bề mặt hạt nano bạc (NPs) điều chế qua trình biến đổi Tollens Mater Chem Phys , 11 ( 2008 ) , trang 77 - 81 Stepanovic cộ CS Stepanovic , ML Cirkoric , L Ranin , AL Svabicviahocic Appl Microbiol , 28 ( 2004 ) , trang 326 - 432 H Su , C Chou , D Hưng , S Lin , I Pao , J Lin , FL Huang , RX Đồng , JJ LinViệc gián đoạn nguyên vẹn màng vi khuẩn thông qua hệ ROS gây nanohybrids bạc đất sét Vật liệu sinh học , 30 ( 2009 ) , tr 5979 - 5987 Bài báoPDF ( 2MB )Xem ghi Scopus J Thiel , L Pakstis , S Buzby , M Raffi , C Ni , DJ Pochan , SI Shah Cáctính chất kháng khuẩn titania pha tạp bạc Nhỏ , ( 2007 ) , trang 799 - 803 CrossRefXem Nội dung Scopus R Varshney , S Bhadauria , MS GaurSự tổng hợp sinh học nano bạc nano cách sử dụng Stevia rebaudiana sundried Adv Mater Lett , ( 2010 ) , trang 232 - 237 CrossRefXem Nội dung Scopus GL Woods , JA WashingtonBác sĩ lâm sàng phịng thí nghiệm vi trùng học G Mandell , J Bennett , R Dolin (biên soạn) , Mandell, Douglas Bennett Các nguyên tắc thực tiễn bệnh truyền nhiễm , Churchill Livingstone , Philadelphia, PA ( 1995 ) , trang 169 - 199 M Yamanaka , K Hara , J Kudo Cáchoạt động diệt khuẩn dung dịch bạc bạc Escherichia coli , nghiên cứu kính hiển vi điện tử truyền qua lọc lượng phân tích proteomic Appl Môi trường Microbiol , 71 ( 2005 ) , trang 7589 - 7593 CrossRefXem Nội dung Scopus Y Zhang , Y Chen , T Wang , J Zhou , Y Zhaotổng hợp tính chất từ nanoporous Co O nanoflowers Microporous Mesoporous Mater , 114 ( 2008 ) , trang 257 - 265 CrossRefXem Nội dung Scopus Y Chu , Y Kông , S Kundu , JD Cirillo , H Lianghoạt động kháng khuẩn hạt nano vàng bạc chống Escherichia coli Bacillus Calmette - Guérin J Nanobiotechnol , 10 ( 2012 ) , tr 19 CrossRefXem Nội dung Scopus Đánh giá đồng nghiệp thuộc trách nhiệm Đại học King Saud ... phương tiện vi sinh vật hóa chất thu từ HiMedia Laboratories, Ấn Độ, Merck Ltd., SRL Pvt., Ltd., Mumbai Nước Ultrapure Milli Q sử dụng suốt nghiên cứu 2.2 Các chủng vi khuẩn sử dụng nghiên cứu Các... nhóm đối xử thực cách phân tích chiều phương sai (sử dụng gói thống kê Xuất xứ 6.1, Lab gốc, Northampton, MA, USA) với nhiều kiểm tra so sánh t p < 0,05 giới hạn tầm quan trọng kết thảo luận... MIC từ 32 lần trở lên, vi khuẩn định nghĩa khoan dung ( Woods Washington, 1995) Tỷ lệ MBC / MIC tham số phản ánh khả diệt khuẩn hợp chất phân tích Trong nghiên cứu chúng tơi, Ag NPs có tác dụng