Khử hoá một số dẫn chất 1-(3-Nitrophenyl)-1h-Pyrazol-5(4h)-On và khảo sát hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm

Bài viết nghiên cứu tổng hợp thông qua phản ứng khử hoá -benzyliden-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5(4H)-on bằng natri borohydrid. Các sản phẩm tổng hợp được tinh chế và xác định cấu trúc bằng phổ IR, M , 1H-NMR và 13C-NMR. au đó được thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm.

Nghiên cứu Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 KHỬ HOÁ MỘT SỐ DẪN CHẤT 1-(3-NITROPHENYL)-1H-PYRAZOL-5(4H)-ON VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN, KHÁNG NẤM Phan Tiểu Long1, Trần Nguyễn Ngọc Vi1, Nguyễn Thị Hương Giang1, Trương Ngọc Tuyền1 TÓM TẮT Đặt vấn đề: Tiếp nối đề tài trước, hợp chất pyrazol-5-ol nghiên cứu rộng rãi đặc tính quan trọng kháng khuẩn, kháng nấm, kháng ung thư Đây hợp chất dị vòng cạnh chứa dị tố nitơ nhóm hydroxy phân tử Đối tượng – phương pháp nghiên cứu: Dẫn chất 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol tổng hợp thơng qua phản ứng khử hố -benzyliden-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5(4H)-on natri borohydrid Các sản phẩm tổng hợp tinh chế xác định cấu trúc phổ IR, M , 1H-NMR 13C-NMR au thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm Kết quả: 14 dẫn chất 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol tổng hợp qua phản ứng khử hoá với natri borohydrid với hiệu suất giai đoạn khử từ 75– Các sản phẩm tổng hợp cho kết phổ IR, MS, 1H-NMR 13C- MR phù hợp với cấu trúc dự kiến ản phẩm cho kết kháng khuẩn kháng nấm tốt, (3b) có hoạt tính dòng thử nghiệm, đặc biệt tốt taphylococcus aureus đề kháng Methicillin (MIC = μg/m ) Kết luận: 14 dẫn chất 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol tổng hợp thành công Kết thử kháng khuẩn, kháng nấm tương đối tốt, tiền đề để tổng hợp thêm dẫn chất 4-benzyl-3-methyl1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol thử tiếp hoạt tính độc tế bào sản phẩm Từ hóa: 3-nitrophenylhydrazin, 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol, kháng khuẩn, kháng nấm ABSTRACT REDUCTION OF SOME 1-(3-NITROPHENYL)-1H-PYRAZOL-5(4H)-ONE DERIVATIVES AND EVALUATION OF ANTIMICROBIAL-ANTIFUNGAL ACTIVITIES OF THEIR REDUCED PRODUCTS Phan Tieu Long, Tran Nguyen Ngoc Vi, Nguyen Thi Huong Giang, Truong Ngoc Tuyen * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Vol 25 - No - 2021: 44 - 52 Introduction: Following the previous research, 1H-pyrazol-5-ol compounds are widely studied for their important properties such as antibacterial, antifungal, and cytotoxicity properties This is a heterocyclic fivemembered ring compound containing two nitrogen atoms and hydroxy group in structure Method: The 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol derivatives were synthesized through the reduction reaction of 4-benzylidene-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5(4H)-on with sodium borohydride Synthetic compounds were purified and characterized by IR, MS, 1H-NMR and 13C-NMR The antimicrobial and antifungal activity were then evaluated Results: 14 derivatives of 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol were synthesized by the reduction reaction with sodium borohydride with the yield of this step ranging 75-85% The structures of synthesized products that characterized by IR, MS, 1H-NMR and 13C-NMR spectrum These compounds had good antimicrobial and antifungal activity results, of which (3b) was active all among tested strains, and was Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: PGS.TS.DS Trương Ngọc Tuyền ĐT: 0903330604 44 Email: truongtuyen@ump.edu.vn B - Khoa học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu particularly good against Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MIC = μg/m ) Conclusion: 14 derivatives of 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol were successfully synthesized The results of this study will be a promise for further synthesis of pyrazol-5-one/ol derivatives towards testing some biological activities such as antimicrobial, antifungal and cytotoxic activities of these compounds The results of antimicrobial and antifungal tests are relatively good, which would be a prerequisite for further synthesis of derivatives of 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol and further testing the cytotoxicity of these products Keywords: 3-nitrophenylhydrazine, 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol, antimicrobial, antifungal activity ĐẶT VẤNĐỀ Phổ IR đo máy IRAffinity-1S mơn Hóa Hữu Cơ, Khoa Dược, Đại Học Y Tình trạng đề kháng kháng sinh ngày Dược TP Hồ Chí Minh Phổ khối lượng MS gia tăng hệ luỵ việc lạm dụng kháng sinh cách mức Báo cáo “Phân tích đo máy LC-MS Shimadzu Viện thực trạng sử dụng kháng sinh kháng Kiểm Nghiệm Thuốc TP Hồ Chí Minh Phổ H-NMR 13 C-NMR đo máy cộng kháng sinh Việt Nam” (GARP – Hợp tác toàn cầu kháng sinh) vào năm 2010 cảnh báo báo hưởng từ hạt nhân Bruker Avance 500 NMR tình trạng đề kháng kháng sinh Việt Nam Spectrometer Viện Hóa học - Viện Hàn mức báo động(1) Lâm Khoa học Việt Nam Pyrazolon dẫn xuất tương đồng Phương pháp nghiên cứu báo cáo với nhiều hoạt tính sinh học Phương pháp tổng hợp đáng ý kháng khuẩn, kháng nấm(2), kháng ung thư(3,4), kháng viêm(5) Những Từ sản phẩm 4-benzyliden-3-methyl-1nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn cho (3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5(4H)-on (2a–2n) thấy kết đầy hứa hẹn nghiên cứu trước(6), khử hoá tác khung 3-methyl-1-(4-nitrophenyl)-1H-pyrazolnhân natri borohydrid dung môi EtOH 5(4H)-on(6) 3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1Hđể tạo dẫn chất 4-benzyl-3-methyl-1-(3pyrazol-5(4H)-on(7) Trên sở đó, dẫn chất nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3a–3n) (Hình 1) 4-benzyliden-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1HQuy trình tổng hợp pyrazol-5(4H)-on tiếp tục khử hoá tạo dẫn chất 4-benzyl-3-methyl-1-(3Hoà tan sản phẩm (2) (1 mmol) vào 10 mL nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol hướng tới thử EtOH tuyệt đối làm lạnh đến 0–5 °C Thêm nghiệm hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm NaBH4 (1 mmol), khuấy 15–30 phút Sau trung hồ HCl 10% đến pH = lọc ĐỐI TƯỢNG-PHƯƠNG PHÁP NGHIÊNCỨU lấy sản phẩm thô Sản phẩm kết tinh lại Đối tượng nghiên cứu EtOH Đối tượng nghiên cứu đề tài Các hệ dung môi dùng cho TLC: hệ (A): dẫn chất 4-benzyl-3-methyl-1-(3hexan:ethyl acetat (1:1); hệ (B): hexan:aceton nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3a–3n) Các (2:1); hệ (C): petroleum ether:ethyl acetat hóa chất dung môi cần thiết mua từ (4:1) Merck, Acros, Aldrich, AKSci, Trung Quốc Phương pháp thử hoạt tính kháng khuẩn, Việt Nam Các chất kiểm tra độ tinh kháng nấm khiết sắc ký lớp mỏng (TLC: ThinCác chủng vi khuẩn vi nấm sử dụng Layer Chromatopraphy), đo điểm chảy (mp) gồm: Escherichia coli ATCC 25922, B - Khoa học Dược 45 Nghiên cứu Staphylococcus aureus ATCC 29213, Staphylococcus aureus đề kháng methicillin (MRSA) ATCC 43300, Streptococcus faecalis ATCC 29212, Candida albicans ATCC 20254 (C) Các chất thử nghiệm kháng nấm, kháng khuẩn gồm: chất 14 dẫn chất (3a–3n) hòa tan DMSO Thử định tính hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm: Sử dụng phương pháp khuyếch tán qua giếng đĩa thạch Các đĩa thạch cấy vi khuẩn, vi nấm thử nghiệm đục lỗ thạch đường kính khoảng mm Các chất pha DMSO nồng độ 1024 µg/mL Chất thử nhỏ lỗ khoảng 60 µL Tiến hành song song với chứng âm nhỏ 60 µL DMSO 10% 60 µL chứng dương (Ciprofloxacin 10 µg/mL Fluconazol 10 µg/mL) Để yên khoảng 15 phút cho chất thử nghiệm khuếch tán Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 vào lớp thạch Sau ủ hộp thạch tủ ấm 30–37 °C 24 đọc kết Các chất có vịng kháng khuẩn nồng độ 1024 µg/mL tiếp tục xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) chất có tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm: phương pháp pha loãng bán định lượng (Semi – quantitative dilution test) Thử nghiệm 11 nồng độ (pha loãng lần giai mẫu): 1024 µg/mL; 512 µg/mL; 256 µg/mL; 128 µg/mL; 64 µg/mL; 32 µg/mL; 16 µg/mL; µg/mL; µg/mL; µg/mL; µg/mL Mỗi nồng độ chất thử nuôi cấy lượng vi khuẩn định nuôi cấy 18–24 MIC nồng độ tối thiểu nồng độ khả ức chế vi khuẩn Hình Phản ứng tổng hợp 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol ppm): 11,12 (brs, 1H, HOH); 8,67 (s, 1H, H7); 8,22 KẾT QUẢ (d, 1H, J = 7,5 Hz, H9); 8,03 (dd, 1H, J = 8,0 Hz; 1,5 Tổng hợp hóa học Hz, H11); 7,72 (t, 1H, J = 8,0 Hz, H10); 7,32 (d, 2H, J 4-(4-Clorobenzyl)-3-methyl-1-(3= 8,5 Hz, H15, H19); 7,25 (d, 2H, J = 8,0 Hz, H16, nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3a) H18); 3,63 (s, 2H, H13); 2,09 (s, 3H, H12) 13C-NMR C17H14ClN3O3 Bột mịn màu đỏ cam, (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 157,3; 153,4; 148,1; khơng tan nước, tan EtOH, tan 139,7; 138,7; 135,8; 132,2; 130,5; 130,4; 129,9; 128,2; tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu 119,4; 112,8; 26,6; 13,2 suất: 81,63% Mp: 230 –232 °C TLC (Rf): 0,79 4-(2-Clorobenzyl)-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)(A); 0,52 (B); 0,27 (C) IR (ν, cm-1): 3130,5 (=C1H-pyrazol-5-ol (3b) H); 1685,8 (C=O); 1612,5 (C=C); 1523,8 (NO 2) C17H14ClN3O3 Bột mịn màu đỏ cam, không MS (ESI) m/z: [M-H]- dự kiến 342,0645; tìm tan nước, tan EtOH, tan tốt thấy 342,0612 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  46 B - Khoa học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: tìm thấy 324,0951 1H-NMR (500 MHz, DMSO- 84,21% Mp: 191–193 °C TLC (Rf): 0,73 (A); 0,54 (B); 0,21 (C) IR (ν, cm-1): 3090,8 (=C-H); 1622,1 (C=C); 1525,7 1344,4 (NO2) MS (ESI) m/z: [MH]- dự kiến 342,0645; tìm thấy 342,0612 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  ppm): 11,50 (brs, 1H, HOH); 8,68 (t, 1H, J = 2,0 Hz, H7); 8,23 (dd, 1H, J = 8,5 Hz; 1,5 Hz, H9); 8,02 (dd, 1H, J = 8,5 Hz; 2,0 Hz, H11); 7,73 (t, 1H, J = 8,5 Hz, H10); 7,42 (dd, 1H, J = 7,5 Hz; 1,5 Hz, H19); 7,27-7,19 (m, 3H, H16, H17, H18); 3,34 (s, 2H, H13); 2,05 (s, 3H, H12) 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 155,2; 149,7; 148,1; 139,0; 137,4; 135,8; 132,8; 130,4; 129,9; 129,0; 127,7; 127,1; 124,3; 118,6; 112,7; 25,1; 12,0 d6,  ppm): 11,01 (brs, 1H, HOH); 9,11 (s, 1H, 4-(3,4-Diclorobenzyl)-3-methyl-1-(3nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3c) C17H13Cl2N3O3 Bột mịn màu đỏ cam, khơng tan nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 82,13% Mp: 277–278 °C TLC (Rf): 0,75 (A); 0,56 (B); 0,24 (C) IR (ν, cm-1): 3076,5 (=C-H); 2908,7 (C-H); 1525,7 1344,4 (NO2) MS (ESI) m/z: [MH]- dự kiến 376,0256; tìm thấy 376,0237 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  ppm): 11,25 (brs, 1H, HOH); 8,66 (s, 1H, H7); 8,22 (d, 1H, J = 8,5 Hz, H9); 8,03 (dd, 1H, J = 8,0 Hz; 1,5 Hz, H11); 7,73 (t, 1H, J = 8,5 Hz, H10); 7,53 (d, 1H, J = 8,0 Hz, H19); 7,48 (s, 1H, H15); 7,23 (d, 1H, J = 8,0 Hz, H18); 3,64 (s, 2H, H13); 2,12 (s, 3H, H12) 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 154,2; 148,2; 148,1; 138,1; 137,2; 135,2; 133,2; 130,7; 130,5; 130,4; 129,9; 128,5; 128,4; 118,7; 113,2; 26,4; 12,1 4-(4-Hydroxybenzyl)-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)1H-pyrazol-5-ol (3d) C17H15N3O4 Bột mịn màu đỏ cam, khơng tan nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 76,63% Mp: 205–206 °C TLC (Rf): 0,79 (A); 0,47 (B); 0,31 (C) IR (ν, cm-1): 3074,6 (=C-H); 2900,9 (C-H); 1583,6 (C=C); 1521,8 1344,4 (NO2) MS (ESI) m/z: [M-H]- dự kiến 324,0984; B - Khoa học Dược HOH); 8,67 (s, 1H, H7); 8,21 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H9); 8,01 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H11); 7,72 (t, 1H, J = 8,5 Hz, H10); 7,01 (d, 2H, J = 7,5 Hz, H15, H19); 6,65 (d, 2H, J = 8,5 Hz, H16, H18); 3,47 (s, 2H, H13); 2,08 (s, 3H, H12) C-NMR (125 MHz, 13 DMSO-d6,  ppm): 156,3; 151,2; 148,2; 139,8; 138,7; 135,2; 133,3; 130,1; 130,0; 129,8; 128,7; 118,9; 113,1; 24,5; 12,3 4-(2-Hydroxybenzyl)-3-methyl-1-(3nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3e) C17H15N3O4 Bột màu đỏ cam, khơng tan nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 81,63% Mp: 197–198 °C TLC (Rf): 0,77 (A); 0,45 (B); 0,31 (C) IR (ν, cm-1): 3105,4 (=C-H); 1583,2 (C=C); 1518,0 1342,5 (NO2) MS (ESI) m/z: [MH]- dự kiến 324,0984; tìm thấy 324,0951 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  ppm): 10,50 (brs, 1H, HOH); 9,30 (s, 1H, HOH); 8,68 (t, 1H, J = 2,0 Hz, H7); 8,23 (dd, 1H, J = 8,0 Hz; 1,5 Hz, H9); 8,03 (dd, 1H, J = 8,0 Hz; 1,5 Hz, H11); 7,72 (t, 1H, J = 8,5 Hz, H10); 7,01-6,98 (m, 2H, H17, H19); 6,77 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H16); 6,69 (t, 1H, J = 7,5 Hz, H18); 3,52 (s, 2H, H13); 2,12 (s, 3H, H12) 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 153,1; 149,1; 148,7; 139,2; 138,2; 134,1; 133,2; 131,1; 129,2; 129,1; 128,6; 128,0; 125,2; 119,1; 111,3; 23,4; 12,6 4-(4-Methoxybenzyl)-3-methyl-1-(3nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3f) C18H17N3O4 Bột mịn màu đỏ cam, khơng tan nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 81,33% Mp: 198–200 °C TLC (Rf): 0,78 (A); 0,48 (B); 0,29 (C) IR (ν, cm-1): 3120,8 (=C-H); 2908,7 (C-H); 1614,4 (C=C); 1521,0 1322,2 (NO2) MS (ESI) m/z: [M-H]- dự kiến 338,1141; tìm thấy 338,1116 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  ppm): 11,05 (brs, 1H, HOH); 8,67 (s, 1H, H7); 8,10 (d, 1H, J 47 Nghiên cứu = 8,0 Hz, H9); 8,02 (dd, 1H, J = 8,5 Hz; 1,5 Hz, H11); 7,72 (t, 1H, J = 8,5 Hz, H10); 7,14 (d, 2H, J = 8,5 Hz, H15, H19); 6,83 (d, 2H, J = 8,5 Hz, H16, H18); 3,70 (s, 3H, H20); 3,55 (s, 2H, H13); 2,08 (s, 3H, H12) 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 157,4; 151,2; 148,1; 139,7; 138,1; 135,0; 134,2; 130,6; 130,5; 129,2; 129,0; 118,5; 113,7; 55,0; 26,3; 14,1 4-(3-Methoxybenzyl)-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)1H-pyrazol-5-ol (3g) C18H17N3O4 Bột màu đỏ cam, không tan nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 84,67% Mp: 158–159 °C TLC (Rf): 0,80 (A); 0,51 (B); 0,31 (C) IR (ν, cm-1): 3076,4 (=C-H); 1604,8 (C=C); 1521,8 1344,4 (NO2) MS (ESI) m/z: [MH]- dự kiến 338,1141; tìm thấy 338,1116 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  ppm): 11,32 (brs, 1H, HOH); 8,67 (s, 1H, H7); 8,22 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H9); 8,02 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H11); 7,72 (t, 1H, J = 8,0 Hz, H10); 7,18 (t, 1H, J = 8,0 Hz, H18); 7,02-6,64 (m, 3H, H15, H17, H19); 3,71 (s, 3H, H20); 3,57 (s, 2H, H13); 2,14 (s, 3H, H12) 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 157,2; 149,1; 148,1; 138,9; 138,1; 135,2; 134,3; 130,6; 130,5; 130,0; 129,3; 128,2; 127,8; 118,7; 113,1; 54,9; 26,4; 14,2 4-(2,4-Dimethoxybenzyl)-3-methyl-1-(3nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3h) C19H19N3O5 Bột màu đỏ cam, khơng tan nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 83,43% Mp: 194–196 °C TLC (Rf): 0,78 (A); 0,47 (B); 0,30 (C) IR (ν, cm-1): 3203,8 (=C-H); 1527,6 1346,3 (NO 2) MS (ESI) m/z: [M-H]dự kiến 368,1246; tìm thấy 368,1192 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  ppm): 11,19 (brs, 1H, HOH); 8,67 (s, 1H, H 7); 8,21 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H9); 8,01 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H11); 7,72 (t, 1H, J = 8,0 Hz, H 10); 6,66 (d, 1H, J = 8,5 Hz, H 19); 6,52 (s, 1H, H16); 6,42 (dd, 1H, J = 8,5 Hz; 1,5 Hz, H 18); 3,80 (s, 3H, H 20); 3,72 (s, 3H, H 21); 3,31 (s, 2H, H 13); 2,08 (s, 3H, H 12) 13C-NMR 48 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 158,9; 157,7; 148,1; 138,7; 138,2; 135,1; 134,8; 131,0; 130,8; 130,4; 129,2; 128,4; 128; 118,1; 113,2; 55,2; 55,1; 26,6; 14,0 4-(3,4-Dimethoxybenzyl)-3-methyl-1-(3nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3i) C19H19N3O5 Bột màu đỏ cam, khơng tan nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 80,50% Mp: 208–210 °C TLC (Rf): 0,77 (A); 0,45 (B); 0,32 (C) IR (ν, cm-1): 3088,0 (=C-H); 2918,3 (C-H); 1525,7 1344,4 (NO2) MS (ESI) m/z: [M-H]- dự kiến 368,1246; tìm thấy 368,1192 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6,  ppm): 11,05 (brs, 1H, HOH); 8,66 (s, 1H, H7); 8,22 (d, 1H, J = 8,0 Hz, H9); 8,02 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H11); 7,72 (t, 1H, J = 8,5 Hz, H10); 6,85 (d, 1H, J = 9,0 Hz, H19); 6,83 (s, 1H, H15); 6,72 (t, 1H, J = 7,5 Hz, H18); 3,71 (s, 3H, H20); 3,70 (s, 3H, H21); 3,31 (s, 2H, H13); 2,09 (s, 3H, H12) 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 155,2; 148,6; 148,1; 138,6; 138,22; 135,8; 133,1; 130,5; 130,1; 129,9; 129,7; 128,0; 127,2; 119,8; 112,3; 55,6; 55,4; 26,8; 14,0 3-Methyl-4-(3-nitrobenzyl)-1-(3nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3j) C17H14N4O5 Bột màu đỏ cam, không tan nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 85% Mp: 230–232 °C TLC (Rf): 0,79 (A); 0,54 (B); 0,31 (C) IR (ν, cm-1): 3105,4 (=C-H); 2870,1 (C-H); 1568,1 (C=C); 1523,8 1346,3 (NO2) MS (ESI) m/z: [M-H]- dự kiến 353,0886; tìm thấy 353,0843 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  ppm): 10,95 (brs, 1H, HOH); 8,66 (s, 1H, H7); 8,22 (dd, 1H, J = 8,0 Hz; 1,0 Hz, H 9); 8,09 (s, 1H, H 15); 8,06 (dd, 1H, J = 8,0 Hz; 1,5 Hz, H11); 8,03 (dd, 1H, J = 8,0 Hz; 1,5 Hz, H17); 7,75-7,71 (m, 2H, H18, H19); 7,58 (t, 1H, J = 8,0 Hz, H10); 3,79 (s, 2H, H13); 2,14 (s, 3H, H 12) 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 157,3; 149,7; 148,1; 142,1; 142,1; 137,1; B - Khoa học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu 136,2; 130,6; 130,5; 130,5; 129,1; 128,3; 127,4; 118,7; 114,9; 27,1; 14,6 135,1; 133,3; 130,5; 130,2; 130,0; 129,6; 128,3; 4-(Benzo[1,3]dioxol-5ylmethylen)-3-methyl1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3k) 4-(4-Hydroxy-3-methoxybenzyl)-3-methyl1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3m) C 18H15N3O5 Bột màu đỏ cam, không tan nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 82,15% Mp: 170– 172 °C TLC (Rf): 0,83 (A); 0,46 (B); 0,34 (C) IR (ν, cm-1): 3055,2 (=C-H); 2895,1 (C-H); 1531,5 1348,2 (NO 2) MS (ESI) m/z: [M-H]- dự kiến 352,0933; tìm thấy 352,0911 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d 6,  ppm): 11,15 (brs, 1H, H OH); 8,67 (s, 1H, H 7); 8,22 (dd, 1H, J = 8,5 Hz; 1,5 Hz, H 9); 8,01 (dd, 1H, J = 8,5 Hz; 2,0 Hz, H 11); 7,72 (t, 1H, J = 8,0 Hz, H 10); 6,80-6,78 (m, 2H, H 15 , H19); 6,69 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H 18); 5,94 (s, 2H, H 20); 3,48 (s, 2H, H 13); 2,10 (s, 3H, H 12) 13 C-NMR (125 MHz, DMSO-d 6,  ppm): 155,4; 148,2; 147,7; 145,0; 135,3; 133,2; 131,2; 130,5; 130,1; 129,7; 128,1; 120,3; 119,1; 114,8; 113,2; 102,7; 26,8; 14,1 C18H17N3O5 Bột màu đỏ cam, không tan nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 86,63% Mp: 206–208 °C TLC (Rf): 0,74 (A); 0,48 (B); 0,29 (C) IR (ν, cm-1): 3093,8 (=C-H); 1595,1 (C=C); 1514,1 1344,4 (NO2) MS (ESI) m/z: [M-H]- dự kiến 354,1090; tìm thấy 354,1099 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  ppm): 11,00 (brs, 1H, HOH); 8,67 (s, 1H, HOH); 8,65 (s, 1H, H7); 8,23 (d, 1H, J = 8,5 Hz, H9); 8,02 (dd, 1H, J = 8,0 Hz; 1,5 Hz, H11); 7,72 (t, 1H, J = 8,5 Hz, H10); 6,81 (s, 1H, H15); 6,66 (d, 1H, J = 8,0 Hz, H19); 6,59 (d, 1H, J = 8,0 Hz, H18); 3,70 (s, 3H, H20); 3,52 (s, 2H, H13); 2,09 (s, 3H, H12) 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 156,2; 148,1; 147,4; 144,6; 135,2; 133,3; 131,5; 130,5; 130,0; 129,2; 128,5; 120,2; 118,6; 115,4; 112,6; 55,6; 26,8; 14,1 4-(3-Hydroxy-4-methoxybenzyl)-3-methyl1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3l) 4-(4-Methylthiobenzyl)-3-methyl-1-(3nitrophenyl)-1H-pyrazol-5-ol (3n) 127,3; 118,5; 115,5; 112,4; 55,8; 26,5; 14,0 C18H17N3O5 Bột màu đỏ cam, không tan C18H17N3O3S Bột màu đỏ cam, khơng tan nước, tan EtOH, tan tốt trong nước, tan EtOH, tan tốt EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: EtOAc, DCM, DMSO DMF Hiệu suất: 83,63% Mp: 208–210 °C TLC (Rf): 0,75 (A); 80,73% Mp: 189–191 °C TLC (Rf): 0,76 (A); 0,49 (B); 0,28 (C) IR (ν, cm ): 3093,8 (=C-H); 0,46 (B); 0,31 C) IR (ν, cm-1): 3198,0 (=C-H); 1633,1 (C=C); 1521,8 1321,8 (NO 2) MS 2918,3 (C-H); 1523,8 1344,4 (NO2) MS (ESI) (ESI) m/z: [M-H] dự kiến 354,1090; tìm thấy m/z: [M-H]- dự kiến 354,0912; tìm thấy 354,1099.1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  354,0892 ppm): 10,92 (brs, 1H, HOH); 8,77 (s, 1H, HOH); ppm): 11,11 (brs, 1H, OH); 8,67 (s, 1H, H7); 8,21 8,70 (s, 1H, H7); 8,24 (dd, 1H, J = 8,5 Hz; 1,5 (d, 1H, J = 8,0 Hz, H9); 8,02 (dd, 1H, J = 8,0 Hz; Hz, H9); 8,00 (dd, 1H, J = 8,5 Hz; 2,0 Hz, H 11); 1,5 Hz, H11); 7,72 (t, 1H, J = 8,5 Hz, H10); 7,20- 7,71 (t, 1H, J = 8,5 Hz, H10); 6,78 (d, 1H, J = 8,0 7,16 (m, 4H, H15, H16, H18, H19); 3,59 (s, 2H, H13); Hz, H18); 6,63 (s, 1H, H 15); 6,60 (dd, 1H, J = 8,0 2,42 (s, 3H, H20); 2,10 (s, 3H, H12) 13C-NMR (125 Hz; 2,0 Hz, H 19); 3,70 (s, 3H, H 20); 3,48 (s, 2H, MHz, DMSO-d6,  ppm): 155,1; 149,1; 148,1; H13); 2,07 (s, 3H, H 12) 139,2; 138,2; 135,0; 134,3; 131,0; 130,7; 129,7; 128,1; -1 - 13 C-NMR (125 MHz, DMSO-d6,  ppm): 156,1; 148,1; 146,4; 145,9; B - Khoa học Dược H-NMR (500 MHz, DMSO-d6,  118,7; 113,0; 25,1; 13,6; 12,7 (Bảng 1) 49 Nghiên cứu Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Bảng Cấu trúc tổng hợp hiệu suất Chất Hiệu suất (%) Chất 3a 84,21 3h 83,43 3b 82,13 3i 80,05 3c 86,69 3j 85,00 3d 3f 3k 82,15 3e 3g 3l 83,63 3f 3h 3m 86,63 3g 3i 3n 80,73 50 Cấu trúc Cấu trúc Hiệu suất (%) B - Khoa học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu Hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm Bảng Kết thử hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm Chất 3a 3b 3c 3d 3e 3f 3g 3h 3i 3j 3k 3l 3m 3n DMSO Cip Flu E (μg/mL) 16 32 32 32 32 64 64 64 16 64 64 64 nd MS (μg/mL) 16 16 16 32 32 32 32 16 64 64 32 64 64 64 nd MR (μg/mL) 16 16 64 64 64 64 64 64 64 64 64 64 64 nd S (μg/mL) 16 32 32 32 32 64 64 64 64 64 64 64 nd C (μg/mL) 16 32 32 32 32 64 64 64 64 64 64 64 nd 0,25 * (-): khơng có hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm; ** (nd): không thực hiện; Cip: ciprofloxacin; Flu: fluconazol; E: Escherichia coli; MS: Staphylococcus aureus; MR: taphylococcus aureus đề kháng methicillin; S: Streptococcus faecalis, C: Candida albicans kháng nấm tốt trường hợp khơng có Có thể BÀNLUẬN giả thuyết nhóm hydroxy làm tăng tính Tổng hợp hóa học thân nước dẫn chất, giúp chất (3a–3n) Phản ứng khử nối đôi liên hợp tổng hợp dễ tan dung môi DMSO 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazolLiên quan cấu trúc tác dụng dẫn 5-ol (3a–3n) tiến hành nhiệt độ 0–5 °C, chất pyrazol-5-ol diễn êm dịu chọn lọc tốt Hiệu suất tổng Nhóm hydroxy vị trí cần cho hoạt hợp tốt 76–86% Sự khác biệt nhóm tính kháng khuẩn khơng ảnh hưởng đáng kể đến hiệu suất Thế halogen vịng thơm thứ làm tăng phản ứng hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm (3a–3c) Việc Hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm thêm nhóm halogen vào làm tăng tính thân dầu Kết thử nghiệm cho thấy hợp chất 4của phân tử làm tăng khả thấm vào màng benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5tế bào vi khuẩn Thế cloro vị trí số 17 ol (3a–3n) cho hoạt tính kháng khuẩn, kháng có hoạt tính MSSA MRSA (3a có MIC = nấm tốt Sự khác biệt dẫn chất so với 16 µg/mL MRSA) nghiên cứu trước(7) phần chất tan Thế nhóm đẩy điện tử (hydroxy, tốt dung mơi thử nghiệm hơn, dẫn đến methoxy) vòng thơm thứ mở rộng phổ việc khuếch tán vào đĩa thạch tốt tất chủng thử nghiệm, hoạt Khi so sánh với nghiên cứu “Tổng hợp tính đạt mức trung bình thử hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm KẾT LUẬN dẫn chất vị trí 3-methyl-1-(3nitrophenyl)-1H-pyrazol-5(4H)-on” (6), nhận thấy Nhóm nghiên cứu tổng hợp 14 hợp chất có nhóm hydroxy vị trí số dẫn chất 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)của vịng pyrazol cho hoạt tính kháng khuẩn, 1H-pyrazol-5-ol (3a–3n) Hiệu suất tương đối B - Khoa học Dược 51 Nghiên cứu cao với thời gian tổng hợp ngắn, tinh chế dễ dàng Hầu hết dẫn chất (3a–3n) cho hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm dòng vi khuẩn, vi nấm thử nhiệm mức tốt (MIC ≤ 64 µg/mL) Đặc biệt có sản phẩm (3b) có hoạt tính mạnh tất dịng thử nghiệm tốt MRSA (MIC = µg/mL) Kết tiền đề để tổng hợp thêm dẫn chất 4-benzyl-3-methyl-1-(3-nitrophenyl)1H-pyrazol-5-ol hướng tới hoạt tính sinh học khác dẫn chất TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Văn Kính, nhóm nghiên cứu quốc gia GARPVietnam (2010) Phân tích thực trạng sử dụng kháng sinh kháng kháng sinh Việt Nam, pp.63 CDDEP, Việt Nam Vijesh A, Isloor AM, Isloor S, et al (2011) Synthesis of some new pyrazolone derivatives as potent antimicrobial agentes Der Pharma Chemica, 3(4):454-463 52 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Gouda MA, Eldien HF, Girges MM, et al (2016) Synthesis and antitumor evaluation of thiophene based azo dyes incorporating pyrazolone moiety Journal of Saudi Chemical Society, 20(2):151-157 Dube PN, Bule SS, Ushir YV, et al (2015) Synthesis of novel 5methyl pyrazol-3-one derivatives and their in vitro cytotoxic evaluation Medicinal Chemistry Research, 24(3):1070-1076 Abbady MS, Youssef MSK (2014) Synthesis and biological activity of some new pyridines, pyrans, and indazoles containing pyrazolone moiety Medicinal Chemistry Research, 23(7):3558-3568 Nguyễn Thanh Thanh Hằng, Trần Thị Mỹ Oanh, Phạm Cảnh Em, Phạm Ngọc Tuấn Anh, Trương Ngọc Tuyền (2017) Tổng hợp đánh giá hoạt tính kháng khuẩn số dẫn chất pyrazolon Dược Học, 496:33-37 Phan Tiểu Long, Phan Tuyết Minh, Dương Bằng Vũ, Đào Tiến Phát, Trương Ngọc Tuyền (2021) Tổng hợp thử hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm dẫn chất vị trí 3methyl-1-(3-nitrophenyl)-1H-pyrazol-5(4H)-on Y Học Thành Phố Hồ Chí Minh, 25(2):64-71 Ngày nhận báo: 14/04/2021 Ngày phản biện nhận xét báo: 14/06/2021 gày báo đăng: 20/08/2021 B - Khoa học Dược ... ứng hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm (3a–3c) Việc Hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm thêm nhóm halogen vào làm tăng tính thân dầu Kết thử nghiệm cho thấy hợp chất 4của phân tử làm tăng khả thấm vào... Khoa học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu Hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm Bảng Kết thử hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm Chất 3a 3b 3c 3d 3e 3f 3g 3h 3i 3j 3k 3l 3m 3n... Thế cloro vị trí số 17 ol (3a–3n) cho hoạt tính kháng khuẩn, kháng có hoạt tính MSSA MRSA (3a có MIC = nấm tốt Sự khác biệt dẫn chất so với 16 µg/mL MRSA) nghiên cứu trước(7) phần chất tan Thế nhóm