Bài giảng Công cụ di truyền mới trong chọn tạo giống cây trồng: Chương 7 - TS. Vũ Thị Thúy Hằng

Bài giảng Công cụ di truyền mới trong chọn tạo giống cây trồng: Chương 7 - TS. Vũ Thị Thúy Hằng cung cấp đến học viên các kiến thức về kỹ thuật di truyền, một số khái niệm cơ bản về kỹ thuật di truyền, tách dòng gen, chuyển nạp gen ở thực vật, các quy định về cây biến đổi di truyền,... Mời các bạn cùng tham khảo chi tiết nội dung bài giảng!

Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Kỹ thuật di truyền gì? - Là điều khiển tính trạng sinh vật nhằm tạo thay đổi mong muốn Kỹ thuật di truyền/Genetic engineering: Chương 7: Kỹ thuật di truyền Con người điều khiển DNA từ lâu!  Chọn giống nhân tạo  Tạo giống vật nuôi, trồng để cải thiện lương thực Chọn giống trồng (tiếp) - toàn kĩ thuật cơng nghệ phịng thí nghiệm, dùng làm biến đổi cách học gen sinh vật (thêm, bớt, chỉnh sửa gen), gen nhân lên tái tổ hợp lại tạo thành gen/tổ hợp gen mới, thích ứng với thay đổi môi trường phù hợp với mong muốn người Chọn giống trồng  “Hậu duệ” cải dại  “gia đình cải bắp” Một giới ! Sự tiến hóa ngơ đại từ tổ tiên teosinte https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Các code mã hóa sử dụng tồn cầu  Bởi tất sinh vật sống…  Sử dụng DNA  Sử dụng chung mã hóa  Đọc gen theo cách giống Có thể hỗn hợp gen từ sinh vật sang sinh vật khác? Có! TACGCACATTTACGTACGCGGATGCCGCGACT ATGATCACATAGACATGCTGTCAGCTCTAGTAG Bộ genome người: ACTAGCTGACTCGACTAGCATGATCGATCAGC TACATGCTAGCACACYCGTACATCGATCCTGA 3.2 tỷ cặp bazo CATCGACCTGCTCGTACATGCTACTAGCTACTG ACTCATGATCCAGATCACTGAAACCCTAGATC GGGTACCTATTACAGTACGATCATCCGATCAGA TCATGCTAGTACATCGATCGATACTGCTACTGA TCTAGCTCAATCAAACTCTTTTTGCATCATGAT ACTAGACTAGCTGACTGATCATGACTCTGATCC CGTAGATCGGGTACCTATTACAGTACGATCATC CGATCAGATCATGCTAGTACATCGATCGATACT GCTACTGATCTAGCTCAATCAAACTCTTTTTGC ATCATGATACTAGACTAGCTGACTGATCATGAC TCTGATCCCGTAGATCGGGTACCTATTACAGTA Sản phẩm kỹ thuật di truyền • Cây chuyển gen – Transgenic Plants • Cây trồng biến đổi di truyền (Genetically Modified Plants/Crops – GMP/GMC) • Sinh vật biến đổi di truyền (Genetically Modified Organism – GMO) • Cây trồng cơng nghệ sinh học Green Fluorosceint Protein (GFP) Cây chuyển gen mang gen lạ (ngoại lai) lồng vào hệ gen biểu thành tính trạng Kỹ thuật di truyền – Một số khái niệm  Tách dòng gen (gene cloning) gọi với Tách dòng gen nhiều tên khác nhau: tạo dòng gen, nhân dòng gen, phân lập gen Là tập hợp kỹ thuật nhằm đưa gen, đoạn ADN cần thiết vào tế bào chủ, tạo điều kiện thích hợp để tế bào chủ phân chia, tạo vô số tế bào mang đoạn ADN đưa vào, tạo nên dòng tế bào tái tổ hợp mang gen cần tách dòng https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Enzyme cắt giới hạn  Enzyme cắt liên kết phosphodiester phân Các dạng cắt tử ADN vị trí định tùy enzyme, tạo thành đoạn ADN có đầu hạn chế  Cắt đầu bằng: enzyme cắt tạo thành đoạn ADN đầu  Mỗi enzyme cắt nhận biết đoạn ADN định cắt vị trí định, đoạn ADN thường dài từ 4-6 nucleotit Enzyme cắt đầu dính: tạo đoạn DNA có đầu dính 5’ sợi đơn đầu dính 3’ sợi đơn  Tùy vào enzyme sử dụng, đặc tính hiệu cắt cấu trúc ADN genom mà sau cắt tạo đoạn ADN dài ngắn khác GTAACG AATTCACGCTT CATTGCTTAA GTGCGAA Enzyme nối Vector  Enzyme ADN ligase nối đoạn ADN bị đứt gãy mạch  Trong tự nhiên, ADN ligase sử dụng tái sửa chữa ADN  Enzyme DNA ligase sử dụng nhiều sinh học phân tử cho thí nghiệm tái tổ hợp di truyền  Vector/ Vector tách dòng: phân tử ADN cho phép cài gắn đoạn DNA/gen ngoại lai để đưa vào tế bào chủ nhằm nhân DNA ngoại lai lên với số lượng lớn  Yêu cầu vector Tự tái – có gốc tái bản, có khả tái độc lập thể chủ Có vùng để lồng nhân gen ngoại lai (vị trí nhận biết enzyme cắt giới hạn) Có Promoter (và operator) – hỗ trợ gen (đoạn ADN mới) biểu Vùng có chứa gen thị để chọn lọc Kích thước phù hợp để xâm nhập tế bào chủ ATP Các loại vector Plasmid vectors  Plasmid: - nhân tố di truyền NST, sống tế bào nhiều Vùng để lồng gen ngoại loại vi khuẩn - phân tử ADN kép, dạng vịng, kích thước từ – 200kb, có chứa gen chống kháng sinh, chống kim loại nặng mẫn cảm với tác nhân đột biến - Khi tái sinh, cần khơng cần protein Vùng chứa gen chọn lọc gen - Chuyển nhân đoạn ADNkích thước từ 10-20kb Gốc tái Nhiều loại plasmid nhân tạo (thế hệ 3) tạo nên cách tập hợp đặc tính quý plasmid tự nhiên, gắn thêm thị đoạn đa cắt nối, tạo nên plasmid mạnh https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Các loại vector (tiếp) Plasmid vector  Thực khuẩn thể: dạng virut gây nhiễm tế bào vi khuẩn, sống sử dụng vật chất hệ enzyme tế bào kí chủ để tổng hợp sản phẩm gen mình, sinh sản tế bào chủ, kí sinh tế bào - Thể thực khuẩn có gen DNA mạch đơn hoạc kép, sử dụng làm vector có nhiều loại f1, M13, fd…Các vecor tạo nên từ cải biến gen phage - Chuyển nhân đoạn AND kích thước từ 10-20kb Các loại vector (tiếp) Thực thể khuẩn  Cosmit - Là vectơ lai plasmid đoạn cos phage, mang ưu điểm vectơ - Cấu tạo: gồm có vùng tái bản, vùng nhân gen, gen chọn lọc, vùng cos - Vị trí cos giúp cosmit bám dính vào màng tế bào xâm nhập tế bào chủ - Có khả mang đoạn ADN cài có kích thước lớn 30-50 kb Vector tách dòng NST nấm men nhân tạo (YAC) - Vectơ tạo từ NST nhỏ nấm men cải tiến di truyền - Vectơ NST nấm men nhân tạo mang đoạn cài ADN dài 200-500 kb, > 2000kb Vector tách dòng NST vi khuẩn nhân tạo (BAC)  Được thiết kế từ phần DNA gen vi khuẩn  Cấu trúc BAC gồm: gốc tái bản, gen thị đặc hiệu, đoạn đa cắt nối promoter đặc hiệu  Cài gắn đoạn DNA có kích thước 100 – 300kb https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Kỹ thuật di truyền – Tách dòng gen Khái niệm: - Tách dòng gen (gene cloning) gọi với nhiều tên khác nhau: tạo dòng gen, nhân dòng gen, phân lập gen - Là tập hợp kỹ thuật nhằm đưa gen, đoạn ADN cần thiết vào tế bào chủ, tạo điều kiện thích hợp để tế bào chủ phân chia, tạo vô số tế bào mang đoạn ADN đưa vào, tạo nên dòng tế bào tái tổ hợp mang gen cần tách dòng  Tách dòng gen thực nghiệm: tách dòng gen thực mẫu sinh học (mô tế bào, lơng tóc, dịch sinh học…), mang gen cần tách dòng tổng hợp nhân tạo đoạn gen cần tách dòng  Tách dòng ảo: tổng hợp, phân tích kết tách dịng gen invitro, sở thông tin từ ngân hàng liệu để lựa chọn đoạn DNA gen cần thiết Từ đó, lựa chọn phương án thiết kế vector tái tổ hợp hiệu quả, dự đoán kết tách dịng biểu gen, mức độ thành cơng thực nghiệm - Gồm có 02 phương pháp chủ yếu: tách dòng thực nghiệm (tách dòng invitro) tách dịng ảo (tách dịng silico) Các bước tách dòng invitro Xác định, phân lập gen mục tiêu/gen quan tâm Tạo vector tái tổ hợp Chuyển nạp vector tái tổ hợp vào tế bào chủ để nhân dịng Cơng cụ Enzyme cắt giới hạn Vector nhân dòng Enzyme nối ligase Sàng lọc dịng tái tổ hợp Ni cấy dịng tái tổ hợp thu sinh khối protein tái tổ hợp Bước 1: Phân lập gen mục tiêu Bước 2:Tạo vector tái tổ hợp - Tách ADN chứa gen cần chuyển - Dùng enzyme cắt giới hạn cắt ADN thành nhiều đoạn có kích thước khác - Nhân gen PCR Là đưa gen vào vectơ - Dùng enzyme cắt bước phân lập gen mục tiêu để cắt vectơ - Dùng enzyme nối ADN ligase để nối đoạn cắt ADN vào vector vùng lồng gen ngoại, thu ADN tái tổ hợp https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Bước 3: Chuyển nạp gen vào tế bào * Là đưa vector mang gen ngoại/ gen mục tiêu vào kí chủ để nhân dòng/tái đoạn gen; * Các tế bào chủ sử dụng: - Vi khuẩn - Nấm men - Tế bào thực vật - Tế bào động vật Vi khuẩn E coli – sử dụng dễ ni genome nghiên cứu biết đến rộng rãi Có khả sinh sản nhanh thời gian ngắn nên nhân nhanh dòng AND - -    Sinh vật đơn bào Sinh sản nguyên phân  Dễ nuôi cấy, sinh sản nhanh: sinh sản Nấm men - Saccharomyces cerevisiae  Vi khuẩn sử dụng dễ ni genome nghiên cứu biết đến rộng rãi Thu thập làm dễ dàng 20-30 phút Tế bào thực vật toàn   Có thể biểu thị gen dễ dàng Cây dễ trồng, đánh giá – xuất nhiều tính trạng Tế bào động vật    Có thể biểu thị gen dễ dàng Khó ni Sử dụng y học Các phương pháp chuyển nạp gen Bước 4: Sàng lọc dòng tái tổ hợp Hóa biến nạp Sử dụng hóa chất: lỗ màng tế bào tạo thành tế bào vi khuẩn xử lý CaCl2 Xung điện Sử dụng dịng điện để hình thành lỗ siêu nhỏ màng tế bào tạo điều kiện hấp thụ ADN tái tổ hợp  Sàng lọc cá thể tái tổ hợp nhằm chọn lọc tế bào mang vector tái tổ hợp quần thể Các gen chọn lọc gồm gen chọn lọc kháng sinh gen thị màu  Các gen chọn lọc phổ biến gồm: - Các gen kháng kháng sinh kanamycin, hybromycin, streptomycin Dung hợp tế bào trần - Các gen kháng chất diệt cỏ glyphosate Súng bắn gen bialaphos - Các gen khác: gen pmi chuyển hóa manose thành glucose nên tế bào sống mơi trường khơng có glucose Figure 9.5b https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology  Gen thị: gen có trách nhiệm thông  -  Khi chuyển gen vào tế bào vi khuẩn báo gen cần biến nạp gắn vào hệ gen thực vật bắt đầu hoạt động hay chưa  Các gen thị thường bao gồm:   Đưa gen vào plasmid Đưa plasmid vào tế bào vi khuẩn Tế bào vi khuẩn nhân gen  Vi khuẩn tạo tạo protein tương ứng ß-galactosidase (do gen lacZ tổng hợp) ß-glucuronidase (GUS) gen từ sinh vật khác Alkaline phosphatase Protein phát huỳnh quang xanh lục GFP dẫn xuất Cắt ADN - … Vi khuẩn có plasmid khơng chứa gen cần chuyển Lạc khuẩn có - mang gen – màu trắng - không mang gen – màu xanh Ví khuẩn có plasmid mang gen Vi khuẩn khơng có plasmid Plasmid tái tổ hợp + vector AND ligase plasmid Sàng lọc dùng gen thị Vi khuẩn biến nạp gen Ví dụ Mơi trường ni cấy chứa chất kháng sinh X-Gal (chất hữu chứa galactose) Để qua đêm Chỉ thu nhận lạc khuẩn có plasmid mang gen nạp Bước Ni cấy dịng tái tổ hợp thu sinh khối protein tái tổ hợp Vi khuẩn chuyển gen Gen từ sinh vật khác GFP loại protein phát ánh sáng bước sóng 509nm (màu xanh lục sáng) Là gen phát tách loài sứa Aequorea victoria Plasmid tái tổ hợp + vector plasmid Vi khuẩn Thu nhận làm thu protein https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Chuyển nạp gen thực vật • Khái niệm: Chuyển nạp gen trình đoạn ADN ngoại, mã hóa thơng tin di truyền định chuyển sang di truyền (hay thể sinh vật mới) • Thực vật thể sống bậc cao dễ chuyển nạp • Cả phương pháp sinh học lý học sử dụng cho chuyển gen • Cho đến nay, thể sống chuyển gen ứng Chuyển gen: • Cho phép: sử dụng biến dị giới động vật thực vật, khơng phải nội lồi chi • Chuyển gen có độ xác cao phương pháp truyền thống • Nhưng tuân thủ hai giai đoạn chọn giống: tạo biến dị di truyền, sau chọn lọc dụng rộng rãi thực vật Tỷ lệ ứng dụng (%) trồng CNSH toàn cầu (triệu ha, triệu mẫu), 2012 Triệu mẫu 445 180 395 160 346 140 296 120 247 100 198 80 148 60 99 40 49 20 0 159 Thông thường CNSH 100 31 30 81% Đậu tương 81% 35% Ngô 30% Cải dầu Nguồn: Clive James, 2013 Ứng dụng chuyển gen Hoa Kỳ Mục đích chuyển nạp gen: 80  Nghiên cứu làm sáng tỏ chức gen Tỉ lệ diện tích Bơng quan tâm hay phần gen 60  Làm thay đổi mức độ biểu gen nội bào Đậu tương 40 20 tế bào để thu nhận tính trạng tế bào chuyển gen: gen kháng bệnh, gen chịu hạn, gen kháng thuốc trừ cỏ, gen tính trạng chất lượng Ngô 1996 1997 1998 1999  Chuyển gen quy định tính trạng mong muốn vào 2000 https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Chuyển nạp gen gián tiếp vi khuẩn Agrobacterium  Agrobacterium loài vi khuẩn xâm nhập vào nơi bị tổn thương thực vật kích thích tạo khối u Ti-plasmid  Phân tử AND kép dạng vịng, kích thước khoảng 200 kb - Vùng T-DNA: chứa gen tổng hợp opine, auxin, cytokinin, phytohormone; bờ trái bờ phải  Ngoài NST, vi khuẩn chứa Ti-plasmid - Vùng vir: vùng gây độc - Gốc tái T-DNA Ti-plasmid  Trong vùng T-DNA có: + gen tổng hợp axit amin opine nguồn dinh dưỡng để nuôi vi khuẩn; Khi vi khuẩn chứa Ti-plasmid xâm nhập vào cây, tế bào bị nhiễm tổng hợp lên axit amin opines lại không sử dụng chúng + gen tổng hợp auxin (gen iaaM iaaH) phytohormone (gen iptZ) làm cho tế bào phân chia mạnh auxA auxB LB cyt ocs RB LB, RB – bờ trái, bờ phải (chứa đoạn lặp) auxA + auxB – enzymes sản sinh auxin cyt – enzyme sản sinh cytokinin • Mục đích: tăng hàm lượng hocmoon kích thích tế bào phân chia Sự tăng kích thước khối u Ocs – sản sinh octopine, tín hiệu để gen hoạt động Vùng gen gây độc – vùng Vir Vùng vir: tạo protein giúp cho trình chuyển nạp làm tăng cường q trình tái tổ hợp với tế bào ký chủ Chuyển T-DNA vào tế bào thực vật Chất Acetosyringone (AS) (a flavonoid) tiết từ tế bào bị thương kích hoạt vùng gen vir Gồm có nhóm gen virA,B,C,D,E,F,G , chiếm kích thước 30 kb Ti-plasmid Cơ chế  Gen gây nhiễm vir hoạt động tế bào vi khuẩn nhờ hóa chất sinh từ tế bào thực vật bị thương, thúc đẩy trình sinh nhiều T-DNA đơn  Sau đoạn T-DNA tự cắt rời khỏi DNA Ti plasmide kề hai bên sườn T-DNA có hai đoạn lặp lại (25bp) gọi sườn biên có chức liên quan đến việc cắt T-DNA  Quá trình chuyển sợi đơn T-DNA từ tế bào vi khuẩn vào tế bào thực vật tương tự trình tiếp hợp vi khuẩn  Một gen vir khác tạo protein có chức việc chuyển nạp sợi T-DNA đơn vào nhân kết gắn vào DNA NST tế bào thực vật Thường có nhiều đoạn copy TDNA kết gắn vào vị trí ngẫu nhiên NST thực vật, nhiên chế chưa rõ https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Mơ hình vận chuyển T-DNA vào genom trồng  Như vậy, vi khuẩn không chuyển DNA vào tế bào mà đoạn chuyển T-DNA Tiplasmid sống tế bào vi khuẩn  T-DNA gắn cách ổn định trở thành phận DNA NST Gen nội T-DNA có chứa gen ngoại mang thơng tin di truyền mong muốn hoạt hóa tạo lên tính trạng đột biến cho sinh vật Các bước thực phương pháp chuyển gen nhờ Agrobacterium Thiết kế vector mang gen biến nạp: gen gắn vào đoạn T-DNA, đoạn nằm vị trí nhân gen plasmid, plasmid tái vi khuẩn E.coli chứa gen NPTII kháng kháng sinh kanamycin dùng để chọn lọc (ví dụ pBR322) Lây nhiễm Agrobacterium mang vector chứa gen biến Nhân tách dòng vector nhờ vi khuẩn E.coli Tái sinh mô (tế bào) biến nạp thành công Chuyển vector mang gen biến nạp từ vi khuẩn E.coli sang Agrobacterium cách tiếp hợp nạp với tế bào (mơ) thực vật để tiến hành q trình chuyển gen biến nạp sang mơ (tế bào đích) Chọn lọc tế bào (mô) biến nạp thành công Tế bào thực vật tái tổ hợp chứa T-DNA kháng kanamycin chứa gen ngoại thành biến nạp hoàn chỉnh (và đánh giá biểu gen biến nạp) Vector mang gen biến nạp https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home 10 Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Ưu nhược điểm phương pháp chuyển gen gián tiếp Các phương pháp chuyển nạp gen trực tiếp  Súng bắn gen  Chuyển gen nhờ xung điện  Chuyển gen nhờ PEG  Phương pháp vi tiêm Ưu- nhược điểm phương pháp bắn súng gen Súng bắn gen Ưu điểm Nhược điểm - Có thể áp dụng với hầu hết loại - Nhiều gen biến mô, tế bào; q trình chuyển gen nạp chuyển vào nhanh, đơn giản mặt kỹ thuật; lúc, gây khó khăn cho phân tích biểu - Có thể xử lý lượng mẫu lớn gen thời gian ngắn - Hiệu chuyển gen thấp - Các vectơ mang gen tái tổ hợp có cấu tạo đơn giản, khơng địi hỏi cấu - Địi hỏi thiết bị đắt tiền trúc kiểu gen T-ADN - Chỉ cần lượng nhỏ plasmid ADN - Biểu tạm thời gen biến nạp quan sát thấy vòng vài ngày sau biến nạp Chuyển gen xung điện Chuyển gen nhờ PEG (polyethylene glycol)  Được sử dụng cho việc chuyển gen tế bào trần  Thường sử dụng để chuyển gen vào tế bào  Sử dụng dịng điện có điện cao phát xung thời gian cực ngắn 5-6/1000 giây để tạo bề mặt tế bào trần lỗ nhỏ 30nm để ADN thâm nhập vào  Ưu điểm: hiệu chuyển gen cao, ổn định  Nhược điểm:Hệ thống tái sinh tế bào trần nhiều lồi cịn gặp khó khăn nên chưa áp dụng nhiều trần  Ở nồng độ cao, PEG làm cho ADN cần biến nạp khơng trạng thái hịa tan mà kết dính màng sinh chất thâm nhập vào tế bào trần  Ưu điểm: hiệu cao, ổn định; khơng địi hỏi thiết bị đắt tiền  Nhược điểm: Q trình biến nạp khó điều khiển, tần số biến nạp thành công biến động thí nghiệm; dễ dẫn đến tượng dung hợp tế bào trần; đòi hỏi hệ thống tái sinh tế bào trần https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home 11 Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Chuyển gen vi tiêm Ưu- nhược điểm phương pháp vi tiêm Là phương pháp sử dụng thiết bị hiển vi máy vi nhu động để chuyển gen trực tiếp vào tế bào Ưu điểm Nhược điểm - Lượng ADN biến nạp - Mỗi lần biến nạp đưa tùy ý xác định ADN vào tế bào nhất, nên phương pháp tốn nhiều thời gian công sức - ADN đưa vào đứng vị trí mong muốn, chí vào - Chỉ thực kỹ nhân tế bào thuật viên có kỹ cao Đến nay, tế bào sử dụng phương pháp để chuyển gen gồm tế bào trần, tế bào tiền phôi hợp tử hay hạt phấn - Có thể áp dụng với tế bào có kích thước nhỏ bé, hạt phấn, phơi non mà kỹ - Đòi hỏi thiết bị đắt tiền thuật khác không thực Các quy định biến đổi di truyền  Các quy định biến đổi di truyền  Nếu trồng/sản phẩm trồng sử dụng làm thực Quy định phóng thích có tính trạng môi trường phẩm  Sản phẩm phải đáp ứng Quy định thực phẩm  Phê chuẩn thử nghiệm đồng ruộng  Một thực phẩm là: thực phẩm có nguồn gốc từ thực  Phê chuẩn phóng thích sinh vật BĐDT vật, động vật hay vi sinh vật biến đổi di truyền,  Cây trồng, vật nuôi hay vi sinh vật thể đặc điểm trước khơng có trồng, vật ni hay vi sinh vật  Cây trồng, vật ni hay vi sinh vật khơng cịn biểu đặc điểm trước có trồng, vật ni hay vi sinh vật  Một hay nhiều đặc điểm trồng, vật nuôi hay vi sinh vật khơng cịn nằm khỏang chấp nhận trồng, vật ni hay vi sinh vật  Phê chuẩn nhập có tính trạng  Hướng dẫn đánh gía an tồn mơi trường Đánh giá an toàn Nguyên tắc: so với thực phẩm truyền thống Có lịch sử sử dụng an tồn Đánh giá an toàn Đánh giá dinh dưỡng Thành phần Nồng độ dinh dưỡng/độc chất Sản phẩm chế biến Người tiêu thụ tiềm Hệ khác với sản phẩm truyền thống This image cannot currently be display ed Đánh giá dị ứng Dị ứng thực phẩm: Phản ứng xấu với thực phẩm Protection https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home 12 Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Đánh giá an toàn Chuyển gen vào trồng họ hàng Những vấn đề giải nhờ chuyển gen Đánh giá độc chất Phân giải đất háo khí Đánh giá protein ảnh hưởng môi trường Khả chịu hạn trồng Cải dầu sử dụng phân đạm 50% SOURCE: Rivero, R.M., Kojima, M., Gepstein, A., Sakakibara, H., Mittler, R., Gepstein, S and Blumwald, E 2007 Delayed leaf senescence induces extreme drought tolerance in a flowering plant Proceedings of the National Academy of Sciences USA 104: 19631-19636 Nho với gốc ghép kháng virut hình quạt SOURCE: http://www.democratandchronicle.com/apps/pbcs.dll/article?AID=/20080806/BUSINESS/808060336/1001 SOURCE: http://archives.foodsafety.ksu.edu/agnet/2007/4-2007/agnet_april_10.htm#story0 Thay đổi gen vận chuyển cà rốt tạo lượng can xi dễ hấp thụ nhiều SOURCE: Morris, J., Hawthorne, K.M., Hotze, T., Abrams, S.A and Hirschi, K.D 2008 Nutritional impact of elevated calcium transport activity in carrots PNAS 10.1073/pnas.0709005105 https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home 13 Lớp Học Phần VNUA - Khoa Nông Học - Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Division Ave High School Ms Foglia Regents Biology Ngơ có hàm lượng Lysine cao cho gia súc – giảm thiểu bổ sung Lysine Cây dương chuyển gen loại bỏ ô nhiễm mơi trường qua rễ khơng khí Removal of carbon tetrachloride SOURCE:February 2006, BIOSPACE http://www.biospace.com/news_story.aspx?StoryID=8883 &full=1 SOURCE: Doty, S.L., James, C.A., Moore, A.L., Vajzovic, A., Singleton, G.L., Ma, C., Khan, Z., Xi, G., Kang, J.W., Park, J.Y., Meilan, R., Strauss, S.H., Wilkerson, J., Farin, F and Strand S.E 2007 Enhanced phytoremediation of volatile environmental pollutants with transgenic trees Proceedings of the National Academy of Sciences USA 104:16816-16821 Hết chương VII https://sites.google.com/site/lophocphank57vnua/home 14 ... phẩm kỹ thuật di truyền • Cây chuyển gen – Transgenic Plants • Cây trồng biến đổi di truyền (Genetically Modified Plants/Crops – GMP/GMC) • Sinh vật biến đổi di truyền (Genetically Modified Organism... tế bào chủ - Có khả mang đoạn ADN cài có kích thước lớn 3 0-5 0 kb Vector tách dòng NST nấm men nhân tạo (YAC) - Vectơ tạo từ NST nhỏ nấm men cải tiến di truyền - Vectơ NST nấm men nhân tạo mang... khuẩn chứa Ti-plasmid - Vùng vir: vùng gây độc - Gốc tái T-DNA Ti-plasmid  Trong vùng T-DNA có: + gen tổng hợp axit amin opine nguồn dinh dưỡng để nuôi vi khuẩn; Khi vi khuẩn chứa Ti-plasmid xâm