Nghiên cứu quy trình điều chế cao chiết giàu baicalin từ vỏ thân cây núc nác quy mô phòng thí nghiệm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ THỊ BẢO NGỌC NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH ĐIỀU CHẾ CAO CHIẾT GIÀU BAICALIN TỪ VỎ THÂN CÂY NÚC NÁC QUY MƠ PHỊNG THÍ NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ THỊ BẢO NGOC NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH ĐIỀU CHẾ CAO CHIẾT GIÀU BAICALIN TỪ VỎ THÂN CÂY NÚC NÁC QUY MƠ PHỊNG THÍ NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ DƯỢC PHẨM VÀ BÀO CHẾ MÃ SỐ: 8720202 Người hướng dẫn khoa học: TS Bùi Thị Thúy Luyện HÀ NỘI 2021 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn trân trọng sâu sắc tới TS Bùi Thị Thúy Luyện, tổ Chiết Xuất – môn Công Nghiệp Dược – Trường Đại học Dược Hà Nội tận tình hướng dẫn, bảo, giúp đỡ em suốt thời gian thực đề tài Phong cách làm việc cô gương để em học tập sau Em xin chân thành cảm ơn tập thể cán bộ, giảng viên môn Công Nghiệp Dược – Trường đại học Dược Hà Nội nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện giúp em hoàn thành đề tài cách tốt Và em cũng xin cảm ơn gia đình, bạn bè, anh chị em người bên em, giúp đỡ, động viên tạo điều kiện thuận lợi cho em học tập, nghiên cứu suốt thời gian qua Mặc dù em cố gắng để luận văn hoàn thiện khơng tránh khỏi sai sót q trình thực Kính mong thầy bảo, góp ý để luận văn em hoàn thiện Em xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày 12 tháng 04 năm 2021 Học viên Lê Thị Bảo Ngọc MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH SÁCH CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Vài nét Núc nác 1.1.1 Tên gọi phân bố 1.1.2 Đặc điểm thực vật 1.1.3 Bộ phận dùng 1.1.4 Thành phần hóa học 1.2 Tổng quan baicalin 1.2.1 Tính chất 1.2.2 Tác dụng dược lý 1.2.3 Một số sản phẩm chứa baicalin 1.3 Một số phương pháp chiết xuất làm giàu baicalin 1.3.1 Một số phương pháp chiết xuất baicalin 1.3.2 Một số phương pháp làm giàu baicalin 11 1.4 Giới thiệu tối ưu hóa quy trình 12 1.5 Giới thiệu nhựa macroporous 13 1.5.1 Nhựa macroporous 13 1.5.2 Ứng dụng nhựa macroporous làm giàu hợp chất từ thiên nhiên 15 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Đối tượng nghiên cứu 17 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 17 2.1.2 Chất chuẩn hóa chất 17 2.1.3 Dụng cụ thiết bị 18 2.2 Nội dung nghiên cứu 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu 19 2.3.1 Phương pháp định lượng baicalin 19 2.3.2 Phương pháp chiết xuất baicalin từ vỏ thân Núc nác 20 2.3.3 Phương pháp khảo sát lựa chọn nhựa hấp phụ 24 2.3.4 Phương pháp khảo sát trình hấp phụ nhựa macroporous 25 2.3.5 Phương pháp khảo sát trình giải hấp phụ nhựa macroporous 26 2.3.6 Xây dựng quy trình điều chế cao giàu baicalin từ vỏ thân Núc nác 27 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 28 3.1 Kết thẩm định phương pháp định lượng baicalin 28 3.1.1 Tính đặc hiệu 28 3.1.2 Độ thích hợp hệ thống 29 3.1.3 Khoảng tuyến tính 30 3.1.4 Độ 31 3.1.5 Định lượng dược liệu đầu vào 31 3.2 Khảo sát ảnh hưởng số yếu tố đến quy trình chiết baicalin từ vỏ thân Núc nác 32 3.2.1 Ảnh hưởng kích thước dược liệu 32 3.2.2 Ảnh hưởng phương pháp chiết xuất 33 3.2.3 Ảnh hưởng dung môi chiết 33 3.2.4 Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/dược liệu 34 3.2.5 Ảnh hưởng thời gian chiết 35 3.3 Tối ưu hóa quy trình chiết xuất baicalin từ vỏ thân Núc nác 36 3.4 Lựa chọn nhựa hấp phụ 40 3.5 Khảo sát trình hấp phụ nhựa macroporous 41 3.6 Khảo sát trình giải hấp phụ nhựa macroporous 42 3.6.1 Khảo sát loại dung môi giải hấp phụ 42 3.6.2 Khảo sát thời gian giải hấp phụ 43 3.7 Xây dựng quy trình điều chế cao giàu baicalin từ vỏ thân Núc nác 44 CHƯƠNG BÀN LUẬN 48 4.1 Quy trình chiết xuất baicalin từ vỏ thân Núc nác 48 4.1.1 Kích thước dược liệu 48 4.1.2 Phương pháp chiết xuất 48 4.1.3 Dung môi chiết xuất 49 4.1.4 Tối ưu hóa quy trình chiết xuất baicalin từ vỏ thân Núc nác 50 4.2 Quy trình làm giàu baicalin từ dịch chiết vỏ thân Núc nác 53 4.2.1 Quá trình hấp phụ 53 4.2.2 Quá trình giải hấp phụ 53 4.3 Quy trình điều chế cao giàu baicalin từ vỏ thân Núc nác 54 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 PHỤ LỤC 63 DANH SÁCH CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT BV Bed Volume DM/DL Dung môi/dược liệu EtOH Ethanol IL Chất lỏng ion (Ionic liquid) ILMAE Ionic liquids-based microwave-assisted extraction HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid) HSCCC High speed countercurrent chromatography MeOH Methanol OFAT Phương pháp thay đổi yếu tố (One factor at a time) RSM Phương pháp đáp ứng bề mặt (Response surface methodology) TLC Sắc ký lớp mỏng tt/tt Thể tích/thể tích UV Tử ngoại (Ultraviolet) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Bảng 1.2 Bảng 1.3 Bảng 2.1 Bảng 2.2 Bảng 2.3 Bảng 3.1 Bảng 3.2 Bảng 3.3 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Bảng 3.6 Bảng 3.7 Bảng 3.8 Bảng 3.9 Bảng 3.10 Bảng 3.11 Bảng 3.12 Bảng 3.13 Bảng 3.14 Bảng 3.15 Bảng 3.16 Kết phân tích baicalin số sản phẩm chăm sóc sức khỏe Kết so sánh số phương pháp chiết xuất baicalin Phân loại nhựa macroporous Danh mục hóa chất sử dụng Các mức khoảng biến thiên biến đầu vào Thiết kế thí nghiệm theo mơ hình BBD Kết thời gian lưu diện tích píc dung dịch baicalin chuẩn Mối tương quan diện tích píc nồng độ baicalin Kết khảo sát độ baicalin Kết định lượng nguyên liệu đầu vào Kết khảo sát ảnh hưởng kích thước dược liệu đến hiệu suất chiết baicalin Kết khảo sát ảnh hưởng phương pháp chiết xuất đến hiệu suất chiết baicalin Kết khảo sát ảnh hưởng dung môi chiết xuất đến hiệu suất chiết baicalin Kết khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/dược liệu đến hiệu suất chiết baicalin Kết khảo sát ảnh hưởng thời gian chiết đến hiệu suất chiết baicalin Các mức thí nghiệm sử dụng mơ hình RSM Kết hàm mục tiêu quy hoạch thực nghiệm Kết phân tích phương sai yếu tố Kết phân tích phù hợp mơ hình thực nghiệm Kết chiết xuất baicalin theo thực nghiệm Kết khảo sát loại dung mơi giải hấp phụ Kết quy trình chiết xuất làm giàu baicalin (quy mô kg/mẻ) Trang 13 18 23 23 28 29 30 31 31 32 33 33 34 35 36 37 38 39 41 45 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ Trang Hình 1.1 Hình 2.1 Hình 3.1 Hình 3.2 Hình 3.3 Hình 3.4 Hình 3.5 Hình 3.6 Hình 3.7 Hình 4.1 Hình 4.2 Cấu trúc hóa học Baicalein Baicalin Hình ảnh Núc nác Sắc ký đồ HPLC thẩm định tính đặc hiệu Đường chuẩn biểu thị mối tương quan diện tích píc nồng độ baicalin Biểu đồ đánh giá khả hấp phụ giải hấp phụ số nhựa macroporous Đồ thị nồng độ baicalin theo thời gian hấp phụ Đồ thị nồng độ baicalin theo thời gian giải hấp phụ Sơ đồ quy trình chiết xuất làm giàu baicalin từ vỏ thân Núc nác Sắc ký đồ HPLC mẫu cao giàu baicalin thu Xu hướng ảnh hưởng yếu tố đến hiệu suất chiết baicalin Bề mặt đáp ứng cặp yếu tố ảnh hưởng hiệu suất chiết baicalin 17 28 29 40 41 42 44 46 50 51 ĐẶT VẤN ĐỀ Núc nác lồi dược liệu tìm thấy nhiều nơi giới, đặc biệt Nam Á, Đông Nam Á Trung Quốc [39] Trong y học cổ truyền Việt Nam, vỏ thân Núc nác sử dụng chủ yếu điều trị vàng da, dị ứng mẩn ngứa, sởi, tiêu chảy, lỵ, viêm đường tiết niệu, tiểu tiện máu, tiểu buốt [5] Các nghiên cứu gần giới rằng, dịch chiết từ vỏ thân núc nác có tác dụng bảo vệ gan tác dụng chống béo phì, hạ đường huyết giúp ngăn ngừa tiểu đường [35] Bên cạnh đó, baicalin, flavonoid vỏ núc nác, nghiên cứu chứng minh có tác dụng chống oxy hóa, kháng viêm [10], chống béo phì, chống tiểu đường typ [34] Với nhiều tác dụng dược lý thú vị vỏ thân Núc nác nguồn dược liệu tiềm để định hướng phát triển sản phẩm phục vụ cho nhiệm vụ chăm sóc sức khỏe cho người dân đặc biệt sản phẩm chống béo phì, hỗ trợ điều trị ngăn ngừa tiểu đường Để thực mục đích việc nghiên cứu quy trình chiết xuất làm giàu baicalin cao vỏ thân Núc nác đóng vai trị quan trọng Gần đây, nhà nghiên cứu tập trung vào việc tìm kiếm phương pháp làm giàu hoạt chất cao chiết dược liệu thay chiết xuất phân lập hoạt chất tinh khiết, với mong muốn thu cao điều chế có hàm lượng hoạt chất lớn, khối lượng thích hợp để đưa vào dạng bào chế, tăng khả ứng dụng dược liệu cơng nghệ dược phẩm Trong phương pháp hấp phụ sử dụng nhựa hấp phụ macroporous phương pháp đánh giá cao có khả hấp phụ/phản hấp phụ chọn lọc nhiều nhóm phân tử mục tiêu, hiệu suất lớn, dễ tái sử dụng, độ lặp lại tốt hầu hết sử dụng dung môi "xanh" nước ethanol Ở Việt Nam, chưa có nghiên cứu quy trình chiết xuất làm giàu baicalin từ vỏ thân Núc nác Với mong muốn tạo cao Núc nác có hàm lượng baicalin cao nhựa hấp phụ macroporous cho hiệu suất tốt chi phí 21 Lin Mei-Chih, Ming-Jer Tsai, and Kuo-Ching Wen (1999), "Supercritical fluid extraction of flavonoids from Scutellariae Radix", Journal of Chromatography A, 830(2), pp 387-395 22 Maungjunburee Saowanee Mahabusarakam Wilawan (2010), "Flavonoids from the stem bark of Oroxylum indicum (L.) Benth ex Kurz", Proceedings of the 7th IMT-GT UNINET and the 3rd International PSUUNS Conferences on Bioscience, pp 136-140 23 Mir-Palomo Silvia, et al (2016), "Inhibition of skin inflammation by baicalin ultradeformable vesicles", International Journal of Pharmaceutics, 511(1), pp 23-29 24 Mukti Kant Nayak et al (2014), "Antiviral activity of baicalin against influenza virus H1N1-pdm09 is due to modulation of NS1-mediated cellular innate immune responses", Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 69(5), pp Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 69(5), 1298-1310 25 Ni Huilin, et al (2018), "Optimization of baicalin water extraction process from Scutellaria baicalensis (a traditional Chinese medicine) by using orthogonal test and HPLC", Revista Brasileira de Farmacognosia, 28(2), pp 151-155 26 Okay O (2000), "Macroporous copolymer networks", Progress in polymer science, 25(6), pp 711-779 27 Pan Jialiang, et al (2017), "Enrichment of chelidonine from Chelidonium majus L using macroporous resin and its antifungal activity", Journal of Chromatography B, 1070, pp 7-14 28 Peng-Fei Liu, et al (2013), "Purification and antioxidant activities of baicalin isolated from the root of huangqin (Scutellaria baicalensis gcorsi)", Journal of food science and technology, 50(3), pp 615-619 59 29 Rostagno Mauricio A., and Juliana M Prado (2013), "Natural product extraction: principles and applications", Royal Society of Chemistry, pp 30 Samatha TALARI Srinivas Penchala, Shyamsundarachary RUDROJU, Rajinikanth M, Rama Swamy N (2012), "Phytochemical analysis of seeds, stem bark and root of an endangered medicinal forest tree Oroxylum indicum (L) Kurz", Int J Pharm Bio Sci, 3(3), pp 1063-1075 31 Sankara S Nair AGR (1972), "Flavonoids from the leaves of Oroxylum indicum and Pajanelia longifolia", Phytochemistry, 11, pp 439-440 32 Sárközi Á Janicsák G., Kursinszki L., et al (2006), "Alkaloid Composition of Chelidonium majus L Studied by Different Chromatographic Techniques", Chromatographia 63, pp 81-86 33 Siddiqui Waseem Ahmad Ahad A, Ganai AA, Sareer O, Najm MZ, Kausar MA, Mohd M (2012), "Therapeutic potential of Oroxylum indicum: a review", Journal of Research and Opinion, 2(10), pp 34 Singh J., Chaudhari, B P (2017), "Baicalin and chrysin mixture imparts cyto-protection against methylglyoxal induced cytotoxicity and diabetic tubular injury by modulating RAGE, oxidative stress and inflammation", Environmental toxicology and pharmacology, 50, pp 67-75 35 Singh J., Kakkar, P (2013), "Modulation of liver function, antioxidant responses, insulin resistance and glucose transport by Oroxylum indicum stem bark in STZ induced diabetic rats", Food and Chemical Toxicology, 62, pp 722–731 36 Sithisarn P., Rojsanga, P., et al (2021), "Sithisarn, P., Rojsanga, P.FlavoneRich Fractions and Extracts from Oroxylum indicum and Their Antibacterial Activities against Clinically Isolated Zoonotic ", Bacteria and Free Radical Scavenging Effects Molecules, 26(6), pp 1773 37 Subramanian S Sankara Nair AGR (1972), "Flavonoids of the stem bark of Oroxylum indicum", Current Science, 41(2), pp 62-63 60 38 Toma M., Vinatoru, M (2001), "Investigation of the effects of ultrasound on vegetal tissues during solvent extraction", Ultrasonics sonochemistry, 8(2), pp 137-142 39 Tomimori T Imoto Y, Ishida M, Kizu H, Namba T (1988), "Studies on the Nepalese crude drugs (VIII) On the flavonoid constitutents of the seed of Oroxylum indicum Vent", Shoyakugaku Zasshi, 42, pp 98–101 40 Tran Thi Van Anh Malainer Clemens, Schwaiger Stefan, et al (2015), "Screening of Vietnamese medicinal plants for NF-κB signaling inhibitors: assessing the activity of flavonoids from the stem bark of Oroxylum indicum", Journal of ethnopharmacology, 159, pp 36-42 41 Wei Zuo-Fu, et al (2015), "Fast and green extraction and separation of main bioactive flavonoids from Radix Scutellariae", Industrial Crops and Products, 63, pp 175-181 42 Wu Bing-Lan Wu Zhou-Wei, Yang Fan, Shen Xiao-Fei, Wang Lun, Chen Bin, Li Fu, Wang Ming-Kui (2019), "Flavonoids from the seeds of Oroxylum indicum and their anti-inflammatory and cytotoxic activities", Phytochemistry Letters, 32, pp 66-69 43 Yan Ren-yi Cao Yang-yang, Chen Cheng-yu, Dai Hui-qing, Yu Shengxian, Wei Jie-lin, Li Hua, Yang Bin (2011), "Antioxidant flavonoids from the seed of Oroxylum indicum", Fitoterapia, 82(6), pp 841-848 44 Yang Xinyu, et al (2018), "Enrichment and Purification of Aucubin from Eucommia ulmoides Ionic Liquid Extract Using Macroporous Resins", Materials, 11(9), pp 1758 45 Yu Yang Mingyan Pei, and Ling Li (2015), "Baicalin induces apoptosis in hepatic cancer cells in vitro and suppresses tumor growth in vivo", International journal of clinical and experimental medicine, 8(6), pp 8958 46 Yuan Yuan Hou Wenli, Tang Minhai, Luo Houding, Chen Li-Juan, Guan Y Hugh, Sutherland Ian A (2008), "Separation of flavonoids from the 61 leaves of Oroxylum indicum by HSCCC", Chromatographia, 68(11-12), pp 885-892 47 Yuan YUAN Houding LUO, Lijuan CHEN (2008), "Linear scale-up of the separation of active components from Oroxylum indicum using high-speed counter-current chromatography", Chinese journal of chromatography, 26(4), pp 489-493 48 ZHANG Qin, et al (2015), "Application of ionic liquid-based microwaveassisted extraction of flavonoids from Scutellaria baicalensis Georgi", Journal of Chromatography B, 1002, pp 411-417 49 Zhang Yong-Hui, et al (2020), "Naringinase-catalyzed hydrolysis of naringin adsorbed on macroporous resin", Process Biochemistry, pp 50 ZHOU Fang, et al (2007), "The optimum condition on baicalin extraction from Scutellaria baicalensis", Zhong yao cai= Zhongyaocai= Journal of Chinese medicinal materials, 30(3), pp 332-335 51 Zhu Hai-yan et al (2015), "Baicalin inhibits autophagy induced by influenza A virus H3N2", Antiviral research, 113, pp 62-70 62 PHỤ LỤC Phụ lục Kết khảo sát ảnh hưởng số yếu tố đến trình hấp phụ giải hấp phụ nhựa macroporous Phụ lục Dữ liệu phân tích phương sai yếu tố phần mềm Design Expert 11 Phụ lục Đường biểu diễn ảnh hưởng hiệu suất chiết baicalin vào yếu tố thời gian, tỷ lệ DM/DL nồng độ EtOH Phụ lục Một số hình ảnh sắc ký đồ HPLC Phụ lục Chứng phân tích chuẩn baicalin 63 Phụ lục Kết khảo sát ảnh hưởng số yếu tố đến trình hấp phụ giải hấp phụ nhựa macroporous Kết khảo sát lựa chọn nhựa hấp phụ Dung lượng Khả Hiệu suất hấp phụ (mg/g) giải hấp phụ (mg/g) giải hấp phụ D101 49,72 42,14 84,75% HPD826 33,85 18,92 55,89% AB8 46,63 39,61 84,95% X5 29,59 20,19 68,23% H103 30,46 24,76 81,29% Loại nhựa Kết khảo sát thời gian nạp dịch chiết lên cột chứa nhựa macroporous Nồng độ baicalin dung dịch ban đầu Nồng độ baicalin Thời gian (giờ) (µg/ml) 1028,77 dung dịch sau hấp phụ (µg/ml) 93,76 159,12 478,06 942,39 10 979,73 64 Kết khảo sát thời gian giải hấp phụ Thời gian (giờ) Nồng độ baicalin dung dịch giải hấp phụ (µg/ml) 1911,95 1476,62 295,105 158,46 120,63 65 Phụ lục Dữ liệu phân tích phương sai yếu tố phần mềm Design Expert 11 ANOVA for Quadratic model Response 1: Hiệu suất Source Model Sum of Squares df Mean Square F-value p-value 5509,03 612,11 A-Thời gian 144,28 144,28 7,85 0,0264 B-Tỷ lệ DM/DL 187,70 187,70 10,22 0,0151 C-Nồng độ EtOH 3455,15 33,32 < 0.0001 significant 3455,15 188,08 < 0.0001 AB 18,97 18,97 1,03 0,3434 AC 0,3788 BC 68,26 68,26 3,72 0,0953 A² 123,10 123,10 6,70 0,0360 B² 21,54 21,54 1,17 0,3148 C² 1513,72 1513,72 82,40 < 0.0001 Residual 128,59 18,37 Lack of Fit 13,22 Pure Error 115,37 Cor Total 5637,63 16 0,3788 0,0206 0,8899 4,41 0,1528 0,9227 not significant 28,84 Factor coding is Coded Sum of squares is Type III - Partial The Model F-value of 33,32 implies the model is significant There is only a 0,01% chance that an F-value this large could occur due to noise P-values less than 0,0500 indicate model terms are significant In this case A, B, C, A², C² are significant model terms Values greater than 0.1000 indicate the model terms are not significant If there are many insignificant model terms (not counting those required to support hierarchy), model reduction may improve your model The Lack of Fit F-value of 0,15 implies the Lack of Fit is not significant relative to the pure error There is a 92,27% chance that a Lack of Fit F-value this large could occur due to noise Non-significant lack of fit is good we want the model to fit 66 Phụ lục Đường biểu diễn ảnh hưởng hiệu suất chiết baicalin vào yếu tố thời gian, tỷ lệ DM/DL nồng độ EtOH 67 Phụ lục Một số hình ảnh sắc ký đồ HPLC Mẫu chuẩn baicalin Mẫu nguyên liệu 68 Mẫu dịch chiết tối ưu hóa – Lần Mẫu dịch chiết tối ưu hóa – Lần 69 Mẫu dịch chiết tối ưu hóa – Lần Mẫu cao giàu baicalin – Mẻ 70 Mẫu cao giàu baicalin – Mẻ Mẫu cao giàu baicalin – Mẻ 71 Phụ lục Chứng phân tích chuẩn baicalin 72 73 ... ? ?Nghiên cứu quy trình điều chế cao chiết giàu baicalin từ vỏ thân Núc nác quy mô phịng thí nghiệm? ?? thực với mục tiêu: - Xây dựng quy trình điều chế cao giàu baicalin từ vỏ thân Núc nác quy mô kg dược... dịch chiết vỏ thân Núc nác  Xây dựng quy trình điều chế cao giàu baicalin từ vỏ thân Núc nác quy mô phịng thí nghiệm 18 Dựa thơng số khảo sát, chúng tơi tiến hành quy trình điều chế cao baicalin. .. 4.1.3 Dung môi chiết xuất 49 4.1.4 Tối ưu hóa quy trình chiết xuất baicalin từ vỏ thân Núc nác 50 4.2 Quy trình làm giàu baicalin từ dịch chiết vỏ thân Núc nác 53 4.2.1 Quá trình hấp