Báo cáo thực hành ứng dụng CNSH trong nuôi trồng thủy sản

BÁO CÁO THỰC HÀNH ỨNG DỤNG CNSH TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Giáo viên hướng dẫn : TS. Nguyễn Thành Luân Lớp : 16DSHA2 Nhóm 2 Sinh viên thực hiện : Trần Trung Cương 161110078 Trần Quang 1611100041 Nguyễn Thị Mỹ Huyền 1611100096 Lê Ngọc Quân 161110065 Tp.Hồ Chí Minh, 6/12/2019 BÀI 1: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ VIBRIO TRONG TÔM ẤU TRÙNG VÀ TÔM THƯƠNG PHẨM 1.MỤC ĐÍCH,YÊU CẦU _ Mục đích: Giúp sinh viên tiếp cận phương pháp phân lập, mô tả , đánh giá sự hiện diện của các loài Vibrio spp trong tôm ấu trùng thông qua phương pháp pha loãng mẫu rồi đếm trực tiếp. Xác định được số lượng Vibrio spp trong tôm ấu trùng và phân lập được chủng vi sinh vật mình mong muốn , tách riêng các vi khuẩn từ quần thể ban đầu. _ Yêu cầu:  Định lượng số vi khuẩn tồn tại trong mẫu tôm ấu trùng  Đánh giá sự nhiễm Vibrio ở mẫu khảo sát  Cách thức chọn lọc của môi trường TCBS 2. KHÁI NIỆM, NGUYÊN TẮC _ Khái niệm: - Đặc điểm chung của các vi khuẩn Vibrio : Gram âm, hình que thẳng hoặc hơi cong, kích thước 0,3-0,5 µm x 1,4-2,6 µm, không hình thành bào tử và chuyển động nhờ một tiêm mao hoặc nhiều tiêm mao mảnh, tất cả chúng đều yếm khí tùy tiện và hầu hết là oxy hóa và lên men trong môi trường O/F Glucose. Thiosulphate citrate bile salt agar (TCBS) là môi trường chọn lọc của Vibrio. Hầu hết các loài đều phát triển trong môi trường nước biển cơ bản, Na+ kích thích cho sự phát triển của tất cả các loài Vibrio, chúng không phát triển trong môi trường không muối NaCl, chúng không sinh H2S, mẫn cảm với Vibriostat 2.4 diamino-6,7 diisopropyl pteridine phosphat (O/129). Cơ bản chúng sống trong môi trường nước biển và cửa sông (vùng nước lợ.Tôm có sự thay đổi màu sắc và chuyển sang màu hồng nhợt nhạt khi cảm nhiễm vi khuẩn Vibrio gây bệnh phát. - Phương pháp định lượng là các phương pháp để xác định sô lượng vi sinh vật trong mẫu - Các phương pháp định lượng: + Phương pháp đếm trực tiếp

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HCM VIỆN KHOA HỌC ỨNG DỤNG  BÁO CÁO THỰC HÀNH ỨNG DỤNG CNSH TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Giáo viên hướng dẫn : TS Nguyễn Thành Luân Lớp : 16DSHA2 Nhóm Sinh viên thực : Trần Trung Cương Trần Quang Nguyễn Thị Mỹ Huyền Lê Ngọc Quân Tp.Hồ Chí Minh, 6/12/2019 161110078 1611100041 1611100096 161110065 BÀI 1: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ VIBRIO TRONG TÔM ẤU TRÙNG VÀ TÔM THƯƠNG PHẨM 1.MỤC ĐÍCH,U CẦU _ Mục đích: Giúp sinh viên tiếp cận phương pháp phân lập, mô tả , đánh giá diện lồi Vibrio spp tơm ấu trùng thơng qua phương pháp pha lỗng mẫu đếm trực tiếp Xác định số lượng Vibrio spp tôm ấu trùng phân lập chủng vi sinh vật mong muốn , tách riêng vi khuẩn từ quần thể ban đầu _ Yêu cầu:  Định lượng số vi khuẩn tồn mẫu tôm ấu trùng  Đánh giá nhiễm Vibrio mẫu khảo sát  Cách thức chọn lọc môi trường TCBS KHÁI NIỆM, NGUYÊN TẮC _ Khái niệm: - Đặc điểm chung vi khuẩn Vibrio : Gram âm, hình que thẳng cong, kích thước 0,3-0,5 µm x 1,4-2,6 µm, khơng hình thành bào tử chuyển động nhờ tiêm mao nhiều tiêm mao mảnh, tất chúng yếm khí tùy tiện hầu hết oxy hóa lên men mơi trường O/F Glucose Thiosulphate citrate bile salt agar (TCBS) mơi trường chọn lọc Vibrio Hầu hết lồi phát triển môi trường nước biển bản, Na+ kích thích cho phát triển tất lồi Vibrio, chúng khơng phát triển mơi trường không muối NaCl, chúng không sinh H2S, mẫn cảm với Vibriostat 2.4 diamino-6,7 diisopropyl pteridine phosphat (O/129) Cơ chúng sống môi trường nước biển cửa sông (vùng nước lợ.Tơm có thay đổi màu sắc chuyển sang màu hồng nhợt nhạt cảm nhiễm vi khuẩn Vibrio gây bệnh phát - Phương pháp định lượng phương pháp để xác định sô lượng vi sinh vật mẫu - Các phương pháp định lượng: + Phương pháp đếm trực tiếp + Phương pháp đếm khuẩn lạc + Phương pháp đếm khuẩn lạc màng lọc + Phương pháp đo độ đục + Phương pháp MPN ( most probable number - Đơn vị tính: tế bào /ml ( CFU/ML hay MPN/ML), tê bào /g ( CFU/G hay MPN/G) Tên bệnh Bệnh phát sáng Giai đoạn tôm ấu trùng, giống Bệnh đỏ dọc thân Bệnh đỏ thân Bệnh vỏ hay ăn mòn kitin, đen mang Ấu trùng, giống Tôm thịt giai đoạn tôm cua Nhiễm khuẩn cá Cá nuôi ao, lồng Vi khuẩn gây bệnh V.parahaemolyticus V.harveyi V.alginolyticus Vibrio spp Vibrio spp., Pseudomonas spp., Proteus sp Tác hại Gây chết hàng loạt Gây chết rải rác Gây chết rải rác chết rải rác, hàng loạt Vibrio spp chết rải rác Bảng : Một số bệnh vi khuẩn Vibrio gây tôm NGUYÊN TẮC _ Các kiểu khuẩn lạc khác sinh từ loài Vibrio khác nhau,thể qua lên men sucrose Ví dụ: V.cholerae V.alginolyticus sinh khuẩn lạc màu vàng, chúng lên men đường sucrose ,acid hình thành Ngược lại V.parahaemolyticus V.vulniticus sinh khuẩn lạc màu xanh thiếu lên men sucrose Vi sinh vật Vibrio không sinh hydrogen sulfide _ Cách thức chọn lọc môi trường TCBS Nồng độ thiosulfate citrate cao độ kiềm mạnh mơi trường ức chế phát triển Enterobacteriaceae Muối mật cholate ức chế chủ yếu enterococci Các chủng dương tính với sucrose phát triển để hình thành khuẩn lạc màu vàng diện chất thị thymolbluebromothymol màu xanh thay đổi thành màu vàng, axit hình thành, mơi trường kiềm mạnh Khuẩn lạc mộc môi trường TCBS agar _ Thành phần môi trường thạch TCBS (g / lít) Peptone from casein 5.0; peptone from meat 5.0; yeast extract 5.0; sodium citrate 10.0; sodium thiosulfate 10.0; ox bile 5.0; sodium cholate 3.0; sucrose 20.0; sodium chloride 10.0; iron(III) citrate 1.0; thymol blue 0.04; bromothymol blue 0.04; agar-agar 14.0 _ Cách tiến hành: Cân 88 g TCBS hòa tan lít nước cất, đun sơi đổ đĩa Không hấp pH: 8,6 ± 0,2 25 ° C Mơi trường TCBS có màu xanh (green) NGUYÊN LIỆU VÀ DỤNG CỤ - Mẫu tôm ấu trùng Môi trường TCBS NaCl 0,9 % Ống nghiệm Micropepet Que trang Đèn cồn Cồn 700C Cồn 960C Effendoft 5.TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM Mẫu tơm nghiền nhuyễn điều kiện vô trùng - - - - thể đồng Cân dịch huyền phù chủng vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus, Vibrio fluvialis, Vibrio vulnificus Ly tâm với tốc độ 4000 vòng/phút 15 phút nhiệt độ phịng Sau đó, bỏ dịch thu sinh khối Thực đến sinh khối đạt 0,001g tướng ứng với 109 cfu/ml Tiến hành pha loãng xuống mật độ 108,107,106,105,… Tại nồng độ pha loãng 10 7,106,105 tiến hành cấy trang bề mặt đĩa khơ Lật ngược đĩa ủ nhiệt độ phịng 24 Đọc kết sau 24 6.KẾT QUẢ Nếu vi sinh vật mẫu pha loãng tốt, vi khuẩn hình thành khuẩn lạc riêng rẽ Sau tiến hành đếm số lượng khuẩn lạc - tính tốn số lượng mẫu Sau 48 đếm toàn số khuẩn lạc mọc ghi nhận kết DILUTION BOTTLE b(1:10,000) b(1:10,000) c(1:1,000,000) c(1:1,000,000) ml PLATED DILUTION 1,0 1:10,000 0,1 1:100,000 1,0 1:1,000,000 0,1 1:10,000,000 DILUTION NUMBER OF FACTOR 10^-1 10^-2 10^-3 10^-4 CONLONIES >300 13 >300 - Sự phân bố khuẩn lạc đĩa petri phải hợp lý Độ pha lỗng cao số khuẩn lạc Nếu kết không hợp lý phải tiến - hành lại bước ni cấy Các đĩa có từ 30 đến 300 khuẩn lạc chọn để đếm Từ số đếm, số lượng mL môi trường ban đầu tính tốn 7.KẾT LUẬN Vi khuẩn Vibrio sử dụng đường nhiều nồng độ 10-1,10-2,10-3,10-4 Số lượng vi khuẩn hình thành đĩa đếm nồng độ 10-2, 10-4, 10-5 nồng độ 10-3, 10-1 số lượng vi khuẩn lớn 300 khuẩn lạc BÀI KHẢO SÁT ĐẶC ĐIỂM SINH HÓA CỦA VI KHUẨN VIBRIO MỤC ĐÍCH U CẦU _Mục đích: Các phản ứng sinh hóa giúp định danh chủng vi khuẩn phân lập - - - - - vi khuẩn có đặc tính sinh hóa khác Phát VSV có hệ enzym oxydase Xác định khà sử dụng Na+ Xác định vi sinh vật sản xuất trì acid bền trình lên men glucose Phát vi sinh vật tạo sản phẩm trung tính (acetoin) q trình lên men glucose Xác định khả tạo enzyme decarboxylase xúc tác phân cắt nhóm carboxyl số acid amin Phát vi sinh vật có hệ enzyme ß-galactosidase – enzyme cảm ứng Phát vi sinh vật có hệ thống enzyme catalase Yêu cầu: - Khảo sát phản ứng sinh hóa ba chủng : V.parahemolyticus (xanh), V.fluvialis (vàng), V.vulnificus (xanh), thông qua phản ứng:        Catalase Oxidase ONPG NaCl 0% / 6% MR-VP Lysine decarboxylase Acid from D.cellobiose Vi khuẩn vibro KHÁI NIỆM VÀ NGUYÊN TẮC _ Khái niệm 2.1 Khái niệm - Việc định danh chủ yếu dựa vào kiểu hình đặc biệt phản ứng - sinh hóa Có ba cách tiếp cận để thực thử nghiệm sinh hóa dùng cho mục đích định danh + Cách truyền thống + Sử dụng kit - + Dùng thiết bị tự động Các kết thử nghiệm sinh hóa hàng trăm lồi vi sinh vật tổng - hợp thành Bảng sinh hóa định danh vi sinh vật Bảng bao gồm đặc điểm sinh hóa đặc trưng để phân biệt loài vi sinh vật gây bệnh thường gặp Mỗi đặc điểm sinh hóa biểu thị trị số tỷ lệ phần trăm thử nghiệm sinh hóa cho kết dương tính - theo thống kê lồi vi sinh vật Các đặc điểm sinh hóa có trị số dao động mức 50% khơng có giá trị - việc định danh Trong thực tế kiểm nghiệm, kết thử nghiệm sinh hóa biểu thị qui ước ký hiệu như: (+) : dương tính (-) : âm tính Trong thử nghiệm này, để đảm bảo xác việc đọc kết quả, người ta thường thực thử nghiệm chủng đối chứng 2.2 Nguyên tắc 2.2.1 Thử nghiệm phép thử catalase - Các vi sinh vật hiếu khí kỵ khí tùy tiện chứa chuỗi truyền điện tử có cytochrome có enzyme catalase, có khả biến dưỡng lượng - - theo phương thức hô hấp với oxy tạo H2O2 Catalase thủy phân H2O2 thành H2O O2, ngăn cản tích tụ phân tử có độc tính cao tế bào Sự thủy phân H2O2 giải phóng O2 ghi nhận qua tượng sủi bọt khí 2.2.2 Thử nghiệm phép thử oxidase - Phát khả sinh enzyme cytochrom oxidase vi khuẩn - Hệ thống cytochrom có vi khuẩn hiếu khí, hiếu kỵ khí tùy tiện hệ thống hoạt động chất liên kết trình hơ hấp, vận chuyển H+ → O2 tạo thành nước - Phản ứng sử dụng thuốc thử tetramethyl p – phenylenediamine dihydrochloride 2.2.3 Thử nghiệm ONPG - Các vi khuẩn lên men lactose có tổng hợp enzyme galactosidase có vai trị xúc tác thủy phân lactose permease có vai trị vận chuyển lactose vào bên tế bào Hoạt tính enzyme galactosidase xác định vào chất tổng hợp Onitrophenyl-D-galactopyranoside Sự thủy phân chất đường bỏi galactosidase phóng thích O-nitrophenol có màu vàng 2.2.4 Khả sử dụng Na+ - Hầu hết lồi phát triển mơi trường nước biển bản, Na + kích thích cho phát triển tất lồi Vibrio, chúng khơng phát triển môi trường không muối NaCl, thử nghiệm giúp xem khả sông scuar Vibrio môi trường bổ sung 0%, 6% Nacl 2.2.5 Thử nghiệm MR-VP - Thử nghiệm Methyl red: Nhằm xác định khả vi sinh vật sản xuất trì sản phẩm acid bên mơi trường q trình lên men glucose Thử nghiệm phụ thuộc lớn vào thời gian nuôi cấy để xác định khác đường chuyển hóa glucose Thử nghiệm đươc tiến hành thời gian nuôi 2-5 ngày 37oC - Thử nghiệm Voges Proskauer: Nhằm phát khả vi sinh vật tạo thành sản phẩm trung tính acetylmethylcarbimol (acetonin) trình lên men glucose Để phát acetonin mơi trường nuôi cấy vi sinh vật, α-naphtol sử dụng thuốc thử môi trường kiềm mạnh tạo KOH 40% co vào môi trường thử nghiệm 2.2.6 Thử nghiệm Lysine decarboxylase - Nhằm xác định khả số vi sinh vật có khả tổng hợp enzyme khử nhóm carboxyl từ lysin, qua chúng làm kiềm mơi trường ni cấy NGUYÊN LIỆU VÀ DỤNG CỤ 3.1 Nguyên liệu  Ba chủng V.parahemolyticus (xanh), V.fluvialis (vàng), V.vulnificus (xanh) phân lập tăng sinh môi trường TCBS  H2O2 3%  NaCL 0% NaCl 6%  Thuốc thử oxidase (N,N,N′,N′-tetramethyl-p-phenylenediamine     (TMPD) Môi trường MR-VP Thuốc thử (α-napthol, KOH 40%) Môi trường LDC Đĩa giấy ONPG 3.2 Dụng cụ     Que cấy ria Lam kính Ống nghiệm 100ml Đèn cồn  Kẹp THỰC HIỆN Ba chủng V.parahemolyticus (xanh), V.fluvialis (vàng), V.vulnificus (xanh) phân lập tăng sinh mơi trường TCBS phịng thí nghiệm Viện Khoa học ứng dụng HUTECH 4.1 Thử nghiệm phép thử catalase - Thử lame: nhỏ H2O2 30% lên lame, dùng que cấy vịng lấy sinh khối đặt lên giọt H2O2 Ghi nhận sủi bọt có Trong đó: V.flu : V.fluvialis V.para: V.parahemolyticus V.vu: V.vulnificus 4.2 Thử nghiệm phép thử oxidase - Dùng que cấy vô trùng lấy khuẩn lạc V.parahemolyticus, V.fluvialis V.vulnificus đặt lên giấy thấm với thuốc thử oxidase (N,N,N′,N′tetramethyl-p-phenylenediamine (TMPD) Thử nghiệm Voges Proskauer Trong đó: V.flu : V.fluvialis (-) V.para: V.parahemolyticus(-) V.vu: V.vulnificus(+) 4.6 Thử nghiệm Lysine decarboxylase - Khuẩn lạc (sau 24 giờ) cấy vào môi trường LDC lỏng ủ 37℃ 24 - 48 Phản ứng dương tính định màu tím đậm suốt mơi trường, phản ứng âm tính màu vàng suốt môi trường (Choopun et al., 2002) Trong đó: V.flu : V.fluvialis (-) V.para: V.parahemolyticus(+) V.vu: V.vulnificus(+) 4.7 Acid from D.cellobiose Trong đó: V.flu : V.fluvialis (-) V.para: V.parahemolyticus(-) V.vu: V.vulnificus(-) KẾT QUẢ V.parahemolyticus Catalase Oxidase ONPG NaCl 6% NaCl 0% MR VP LDC Acid from D.cellobiose V.fluvialis (vàng) (xanh) + + + + + + - V.vulnificus + + + + - (xanh) + + + + + - - BÀI 3: KHẢO SÁT KHÁNG SINH ĐỒ CỦA VI KHUẨN MỤC ĐÍCH YÊU CẦU 1.1Mục đích 15 Khảo sát kháng sinh đồ để biết độ nhạy chất kháng sinh chủng gây bệnh Qua biết cách sử dụng loại kháng sinh tốt để điều trị bệnh nhiễm khuẩn, cải thiện, nâng cao hiệu nuôi trồng thủy sản 1.2 Yêu cầu Khảo sát kháng sinh đồ ba chủng : V.parahemolyticus (xanh), V.fluvialis (vàng), V.vulnificus (xanh) loại kháng sinh là: Ampicillin, Clindamycin, Erythromycin, Florfenicol, Penicillin, Streptomycin môi trường Mueller-Hinton Agar ( MHA) KHÁI NIỆM VÀ NGUYÊN TẮC 2.1 Khái niệm Môi trường thạch Mueller-Hinton Agar ( MHA) mơi trường trong, dùng cho thử nghiệm tính nhạy cảm vi sinh vật với kháng sinh Môi trường thường dùng để thử nghiệm thuỷ phân tinh bột Thạch Mueller-Hinton có chứa hỗn dịch động vật, casamino acid tinh bột giúp cho hầu hết vi sinh vật phát triển Các loại kháng sinh:  Ampicillin (Am) biết đến loại loại thuốc sử dụng để - điều trị bệnh liên quan đến nhiễm khuẩn vi khuẩn gây  Clindamycin (CL) dùng điều trị nhiễm khuẩn nặng vi khuẩn kị khí  Erythromycin (Er) kháng sinh nhóm macrolid, có phổ tác dụng rộng, chủ yếu kìm khuẩn vi khuẩn gram âm gram dương  Florfenicol (FL) kháng sinh hệ nhóm Phenicol, kháng sinh tổng hợp phổ rộng, có hiệu điều trị bệnh vi khuẩn Gram (+) Gram (-)  Streptomycin (Str) kháng sinh phổ rộng có tác dụng chủ yếu vi khuẩn gram âm, vi khuẩn gram dương tác dụng penicillin  Penicillin (Pn) loại kháng sinh thuộc nhóm thuốc trị ký sinh trùng, chống nhiễm khuẩn, kháng virus kháng nấm 2.2 Nguyên tắc Thực cách trải chủng sinh vi vật thử nghiệm chuẩn hóa mơi trường MHA, sau đĩa giấy có chứa nồng độ cụ thể loại kháng sinh đặt bề mặt đĩa thạch Nếu có tác nhân ức chế giết chết sinh vật thử nghiệm, có khu vực xung quanh đĩa nơi khơng có tăng trưởng xảy gọi vùng ức chế Dựa vào đường kính vùng ức chế, mức độ nhạy cảm phân chia thành phân loại S (susceptible - nhạy cảm), I (intermediate - kháng trung gian), R (resistant - kháng) NGUYÊN LIỆU VÀ DỤNG CỤ 3.1 Nguyên liệu Ba chủng V.parahemolyticus (xanh), V.fluvialis (vàng), V.vulnificus - (xanh) phân lập tăng sinh môi trường TCBS loại đĩa kháng sinh gồm: Ampicillin, Clindamycin, Erythromycin, Florfenicol, Penicillin, Streptomycin 3.2 Dụng cụ Kẹp Đèn cồn Cồn 70o Tăm khử trùng THỰC HIỆN - Tăng sinh ba chủng V.parahemolyticus, V.fluvialis V.vulnificus → đánh dấu nhãn tên sinh vật khảo sát chuẩn bị mật độ huyền ph→ hút 1ml dung dịch tăng sinh vào eppendofl ly tâm 4000 vòng/10 phút → bỏ dịch thu sinh khối → hút 100μl nước muối sinh lý → lắc - Cấy chủng vi khuẩn lên bề mặt môi trường MHA tăm Phủ bề mặt thạch cách quét theo ba hướng → để đĩa khô trước gắn đĩa kháng sinh - Dùng kẹp khử trùng gắp đĩa kháng sinh Đặt nhẹ đĩa môi trường thạch chấm sẵn Mỗi đĩa môi trường khảo sát loại đĩa kháng sinh → ủ đĩa 16-18giờ 37℃ → đọc kết 17 - Dùng thước kẻ đặt lên mặt đáy đĩa thạch, đo đường kính vùng ức chế hồn tồn, tính theo mm Sau so sánh kết với tiêu chuẩn quy định CLSI Hình 3.1 V.fluvialis V.vulnificus sau đặt loại kháng sinh KẾT QUẢ Kháng sinh Các chủng phân lập từ tôm ấu trùng V.parahemolyticus V.fluvialis V.vulnificus Ampicillin 16-22 Clindamycin 24-30 Erythromycin 22-30 Florfenicol 22-28 Penicillin 26-37 Streptomycin 23-25 R R S S I R R S S I S R R I R BÀI 4: ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA VI KHUẨN LACTIC ĐỐI VỚI VI KHUẨN GÂY BỆNH 1.MỤC ĐÍCH YÊU CẦU Mục đích: _ Khảo sát khả đối kháng vi khuẩn lactic vi khuẩn Vibrio spp _ Khảo sát hình thái, sinh lý, sinh hóa chủng vi khuẩn lactic _ Phân lập, tăng sinh vi khuẩn hữu ích ứng dụng phịng bệnh thủy sản từ nhiều nguồn khác Yêu cầu: Khảo sát khả đối kháng vi khuẩn phương pháp sọc chéo KHÁI NIỆM _ Khái niệm: Vi khuẩn lactic nhóm vi khuẩn Gram dương lên men carbohydrate có khơng có oxy tạo sản phẩm cuối acid lactic Nhóm vi khuẩn sản xuất hợp chất hữu tạo mùi thơm hương vị cho sản phẩm lên men Vi khuẩn lactic phân lập sữa gần chúng phân lập từ sản phẩm lên men như: thịt, sản phẩm từ 19 sữa, rau quả, nước uống bánh mì lên men, hệ tiêu hóa lồi động vật thủy sản Vi khuẩn lactic phát triển nhiệt độ khác hầu hết chúng phát triển nhiệt độ tối ưu 20-30 độ C , số loài ưa nhiệt phát triển nhệt độ cao 5055 độ C, vi khuẩn có khả chịu nồng độ muối cao,pH tối ưu cho hầu hết vi khuẩn lactic (pH=7.0) Hình 4.1 Hình thái vi khuẩn lactic _ Thành phần kháng khuẩn sinh từ vi khuẩn lactic Tác động kháng lại vi sinh vật vi khuẩn lactic chủ yếu acid lactic sản phẩm acid hữu Chúng làm giảm pH môi trường sinh sống vi sinh vật khác Ở pH thấp acid hữu chuyển thành lipid hòa tan khuếch tán qua màng tế bào chất Hầu hết bacteriocins vi khuẩn LAB cation nhỏ (