VŨ DUY PHONG ĐÁNH GIÁ tác DỤNG CHỐNG VIÊM và độc TÍNH TRÊN THỰC NGHIỆM của sản PHẨM CAO LỎNG TIÊU VIÊM HD KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VŨ DUY PHONG MÃ SINH VIÊN: 1601608 ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM VÀ ĐỘC TÍNH TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA SẢN PHẨM CAO LỎNG TIÊU VIÊM HD KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Thùy Dương ThS Ngô Thanh Hoa Nơi thực hiện: Bộ môn Dược lực HÀ NỘI – 2021 LỜI CẢM ƠN Nhân dịp hoàn thành luận văn, em xin gửi lời cảm ơn chân thành lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo, gia đình, bạn bè người giúp đỡ em thời gian vừa qua Bằng tất lòng, em xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thùy Dương – Phó trưởng Bộ mơn Dược lực, người kính mến dành nhiều thời gian, cơng sức, tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em suốt trình thực luận văn Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới ThS Ngô Thanh Hoa người quan tâm, bảo theo sát em trình thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn tới ThS DS Đào Thị Hoài Thu, Trưởng khoa Dược, Bệnh viện Y học cổ truyền Hải Dương hỗ trợ em trình thực khóa luận Em xin cảm ơn đề tài “Nghiên cứu sản xuất thuốc Cao lỏng tiêu viêm HD” số YD.20.BVYHCT.20-21 tài trợ cho nghiên cứu Bên cạnh đó, em xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô giáo, anh Đinh Đại Độ, chị Đinh Thị Kiều Giang, chị Nguyễn Thị Thủy anh chị nghiên cứu sinh, bạn, em sinh viên Bộ mơn Dược lực ln nhiệt tình giúp đỡ, chia sẻ khó khăn có kỷ niệm quý giá Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn người bạn ln động viên giúp đỡ mình, trải qua tháng ngày sinh viên tươi đẹp, cảm ơn gia đình u dấu ln ủng hộ dõi theo suốt đời Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Sinh viên Vũ Duy Phong MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan về viêm 1.1.1 Khái niệm về viêm 1.1.2 Nguyên nhân viêm 1.1.3 Phân loại viêm 1.1.4 Vai trò tế bào viêm 1.1.5 Thuốc chống viêm 1.2 Tổng quan về số mơ hình nghiên cứu tác dụng chống viêm 10 1.2.1 Mơ hình nghiên cứu tác dụng chống viêm cấp in vivo 10 1.2.2 Mơ hình nghiên cứu tác dụng chống viêm mạn in vivo 12 1.3 Tổng quan về sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 13 1.3.1 Xuất xứ thành phần sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 13 1.3.2 Thông tin về số vị thuốc sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 14 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 18 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 18 2.1.2 Động vật thí nghiệm 19 2.1.3 Hóa chất thuốc thử 20 2.1.4 Thiết bị nghiên cứu 20 2.2 Nội dung nghiên cứu 20 2.3 Phương pháp nghiên cứu 21 2.3.1 Phương pháp đánh giá tác dụng chống viêm sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 21 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu độc tính Cao lỏng tiêu viêm HD 25 2.3.3 Phương pháp xử lý số liệu 28 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 29 3.1 Kết đánh giá tác dụng chống viêm sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 29 3.1.1 Kết đánh giá tác dụng chống viêm cấp sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 29 3.1.2 Kết đánh giá tác dụng chống viêm mạn sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 30 3.2 Nghiên cứu độc tính sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 32 3.2.1 Kết xác định độc tính cấp sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 32 3.2.2 Kết xác định độc tính bán trường diễn sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 33 3.2.2.1 Ảnh hưởng sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD đến tình trạng chung chuột 33 3.2.2.2 Ảnh hưởng sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD đến tỷ lệ tăng khối lượng thể chuột thí nghiệm 33 3.2.2.3 Ảnh hưởng sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD đến thông số huyết học chuột thí nghiệm 35 3.2.2.4 Ảnh hưởng sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD đến thông số sinh hóa chuột thí nghiệm 36 3.2.2.5 Ảnh hưởng sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD đến đại thể quan chuột thí nghiệm 37 3.2.2.6 Ảnh hưởng sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD đến mô bệnh học gan, thận chuột thí nghiệm 38 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 43 4.1 Về tác dụng chống viêm in vivo sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 43 4.1.1 Về tác dụng chống viêm cấp sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 43 4.1.2 Về tác dụng chống viêm mạn sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 44 4.2 Về độc tính sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 46 4.2.1 Về độc tính cấp 46 4.2.2 Về độc tính bán trường diễn 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC 1: QUYẾT ĐỊNH THÀNH LẬP BAN CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI “NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT THUỐC “CAO LỎNG TIÊU VIÊM HD” PHỤ LỤC 2: TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CỦA THUỐC CỔ TRUYỀN CAO LỎNG TIÊU VIÊM HD” DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Tên viết đầy đủ Tên viết tắt ADP Adenosine diphosphate ALT Alanin transaminase AST Aspartate transaminase ATP Adenosine triphosphate COX Cyclo-oxygenase CLTVHD Cao lỏng tiêu viêm HD DNA Deoxyribonucleic acid EGF Yếu tố phát triển biểu mô FDA Cục quản lý Thực phẩm Dược phẩm Hoa Kỳ HCT Hematocrit HGB Nồng độ hemoglobin Ig Immunoglobulin IL Interleukin iNOS Enzym NO synthase cảm ứng LD50 Liều trung bình gây chết 50% số lượng động vật thí nghiệm LPS Lipopolysaccharid MCV Thể tích trung bình hồng cầu MHC Phức hợp hịa hợp mơ NSAID OECD PG Thuốc chống viêm không steroid Tổ chức hợp tác phát triển kinh tế (Organization for Economic Cooperation and Development) Prostaglandin TNFα Yếu tố hoại tử khối u TGF Yếu tố chuyển đổi tăng trưởng PDGF Yếu tố phát triển có nguồn gốc từ tiểu cầu PGHS Prostaglandin endoperoxid H synthase PLT Số lượng tiểu cầu PPAR Peroxisome proliferator-activated receptor RBC Số lượng hồng cầu SPSS Statistical Package for the Social Sciences WBC Số lượng bạch cầu DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Bảng 1.1 Bảng 3.1 Bảng 3.2 Bảng 3.3 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Tên bảng Một số thuốc chống viêm không steroid phổ biến Ảnh hưởng CLTVHD lên mức độ phù bàn chân chuột Ảnh hưởng cao tiêu viêm lên mức độ tăng khối lượng u hạt Bố trí thí nghiệm cho thử độc tính cấp mẫu thử Cao lỏng tiêu viêm HD Ảnh hưởng sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD đến thông số huyết học chuột cống trắng Ảnh hưởng sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD đến thơng số sinh hóa chuột cống trắng Số trang 29 31 32 35 36 Ảnh hưởng sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD đến Bảng 3.6 tỷ lệ khối lượng quan chuột cống trắng 37 Ảnh hưởng chế phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD dùng Bảng 3.7 liều lặp lại 28 ngày đến mô bệnh học gan chuột cống 39 trắng đực Ảnh hưởng chế phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD dùng Bảng 3.8 liều lặp lại 28 ngày đến mô bệnh học gan chuột cống 40 trắng Ảnh hưởng chế phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD dùng Bảng 3.9 liều lặp lại 28 ngày đến mô bệnh học thận chuột cống 41 trắng đực Ảnh hưởng chế phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD dùng Bảng 3.10 liều lặp lại 28 ngày đến mô bệnh học thận chuột cống trắng 42 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình Tên hình Số trang Hình 1.1 Sơ đồ tóm tắt vai trị COX1 COX2 thể Hình 1.2 U hạt mơ hình gây u hạt thực nghiệm carrageenan 13 Hình 2.1 Hình ảnh sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 18 Hình 2.2 Sơ đồ thiết kế nghiên cứu 21 Quy trình tiến hành thí nghiệm đánh giá tác dụng Hình 2.3 chống viêm cấp in vivo mơ hình gây phù bàn chân 22 chuột carrageenan Quy trình tiến hành thí nghiệm đánh giá tác dụng Hình 2.4 chống viêm mạn in vivo mơ hình gây u hạt thực 24 nghiệm viên bơng tẩm carrageenan Hình 2.5 Hình 3.1 Hình 3.2 Hình 3.3 Qui trình xác định độc tính bán trường diễn 28 ngày Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng CLTVHD đến mức độ phù bàn chân chuột Ảnh hưởng Cao lỏng tiêu viêm đến tỷ lệ tăng khối lượng chuột nhắt đực Ảnh hưởng Cao lỏng tiêu viêm đến tỷ lệ tăng khối lượng chuột nhắt 27 30 34 34 ĐẶT VẤN ĐỀ Viêm trình phức tạp, phản ứng bảo vệ hệ miễn dịch trước công tác nhân gây bệnh với triệu chứng điển hình: sưng, nóng, đỏ, đau [1], [14] Triệu chứng viêm phổ biến, xuất nhiều trường hợp từ chấn thương thông thường, vết côn trùng đốt bệnh lý viêm khớp dạng thấp, gout Hiện nay, thuốc chống viêm không steroid (NSAIDs) thuốc chống viêm steroid thuốc sử dụng rộng rãi để điều trị viêm Tuy nhiên thuốc nhiều hạn chế làm tăng xảy tác dụng không mong muốn bệnh nhân sử dụng lâu dài [4], [20], [60] Chính vậy, việc nghiên cứu phát triển thuốc giảm thiểu nhược điểm thuốc sử dụng cần thiết Hướng nghiên cứu từ thuốc dược liệu quan tâm tập trung phát triển Tại Việt Nam, nền y học dân gian có lịch sử phát triển lâu đời, với 1000 thuốc dân gian [43] Nhiều vị thuốc, thuốc cổ phương có hiệu điều trị người dân sử dụng phổ biến Trong đó, thuốc “Tiêu viêm HD” bệnh viện Y học cổ truyền Hải Dương nghiệm phương sử dụng nhiều cho thấy tác dụng điều trị Các dược liệu thành phần thuốc đều vị thuốc từ lâu nhiều thầy thuốc nước sử dụng Bệnh viện Y học cổ truyền Hải Dương dùng thuốc trước chủ yếu áp dụng với bệnh nhân nội trú, dùng dạng thuốc sắc để bệnh nhân sử dụng Khi bệnh nhân điều trị ngoại trú, việc sắc thuốc gặp khó khăn khơng đảm bảo chất lượng thuốc sắc Hơn nữa, việc sử dụng bảo quản thuốc sắc không thuận tiện với đa số bệnh nhân Xuất phát từ nhu cầu thực tế, bệnh viện Y học cổ truyền Hải Dương nghiên cứu chuyển thuốc “Tiêu viêm HD” thành sản phẩm “Cao lỏng tiêu viêm HD” Nhằm chứng minh hiệu đánh giá tính an tồn sản phẩm, làm sở hoàn thiện hồ sơ tiền lâm sàng, chuẩn bị cho pha nghiên cứu tiếp theo, nhóm nghiên cứu thực đề tài “Đánh giá tác dụng chống viêm độc tính thực nghiệm sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD” với mục tiêu chính: ➢ Đánh giá tác dụng chống viêm cấp chống viêm mạn sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD động vật thực nghiệm ➢ Đánh giá độc tính cấp độc tính bán trường diễn sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD động vật thực nghiệm BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VŨ DUY PHONG ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM VÀ ĐỘC TÍNH TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA SẢN PHẨM CAO LỎNG TIÊU VIÊM HD KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2021 ... tác dụng chống viêm độc tính thực nghiệm sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD? ?? với mục tiêu chính: ➢ Đánh giá tác dụng chống viêm cấp chống viêm mạn sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD động vật thực nghiệm. .. giá độc tính bán trường diễn CLTVHD chuột cống trắng Đánh giá tác dụng Đánh giá độc tính chống viêm Đánh giá tác dụng Đánh giá tác dụng Đánh giá độc Đánh giá độc tính chống viêm cấp chống viêm. .. Kết đánh giá tác dụng chống viêm sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 29 3.1.1 Kết đánh giá tác dụng chống viêm cấp sản phẩm Cao lỏng tiêu viêm HD 29 3.1.2 Kết đánh giá tác dụng chống