Nghiên cứu nhằm đánh giá ảnh hưởng của cơ chất đến sinh trưởng, năng suất và chất lượng của nấm vân chi (Trametes versicolor). í nghiệm được tiến hành với 4 nghiệm thức khác nhau, ba lần lặp và được bố trí theo khối hoàn toàn ngẫu nhiên.
Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 05(126)/2021 NGHIÊN CỨU SỰ SINH TRƯỞNG, NĂNG SUẤT VÀ CHẤT LƯỢNG NẤM VÂN CHI (Trametes versicolor) TRỒNG TRÊN GỖ KHÚC KEO LÁ TRÀM (Acacia auriculiformis) TẠI ĐÀ NẴNG Nguyễn ị Bích Hằng1, Phạm ị Mỹ1, Trần Ngọc Sơn1 TÓM TẮT Nghiên cứu nhằm đánh giá ảnh hưởng chất đến sinh trưởng, suất chất lượng nấm vân chi (Trametes versicolor) í nghiệm tiến hành với nghiệm thức khác nhau, ba lần lặp bố trí theo khối hồn tồn ngẫu nhiên Kết chọn chất gỗ khúc keo tràm phối trộn với chất phụ gia, gồm 2% cám gạo + 2% bột ngô + 0,5% bột nhẹ + 0,5% đường; rút ngắn thời gian sinh trưởng phát triển nấm vân chi từ 17 - 20 ngày so với mùn cưa cao su; suất đạt 5,76% Kích thước dọc mũ nấm đạt 9,42 cm, kích thước ngang mũ nấm 4,12 cm, tỷ lệ khô/tươi 85% Dịch chiết thể nấm vân chi thu hoạch có khả bắt gốc tự ABTS với hiệu suất 83,66% nồng độ 500 μg/mL Hàm lượng polysaccharide triterpens tổng số thể nấm trồng que gỗ keo tràm 3,330,04%; 0,0170,0001 mg/g Hàm lượng kim loại Cd mẫu nấm vân chi trồng gỗ keo mùn cưa cao su 0,052 mg/kg 0,043 mg/kg Hàm lượng kim loại Pb mẫu nấm trồng gỗ keo mùn cưa cao su 0,011 mg/kg 0,013 mg/kg, Pb Cd nấm thấp giới hạn cho phép QCVN 8-2:2011/BYT giới hạn kim loại nặng thực phẩm Từ khóa: Nấm vân chi, keo tràm, gỗ khúc, sinh trưởng, suất I ĐẶT VẤN ĐỀ Nấm vân chi (Trametes versicolor) (trước gọi Coriolus versicolor) có tên tiếng Anh Turkey tail (đi gà tây), sử dụng y học Trung Quốc tên “Yunzhi” (có nghĩa loại nấm có hình dạng mây) có vị trí đặc biệt loại nấm dược liệu Các báo cáo từ năm 1960 cho thấy lợi ích sức khỏe điều trị ung thư dày uống trà “Saruno-koshikake” có chứa nấm vân chi Nghiên cứu nấm có hoạt tính kháng khuẩn, kháng virus kháng khối u (Hayakawa et al., 1997) Ngày nay, vân chi nghiên cứu công bố với nhiều cơng dụng chữa bệnh mới, sử dụng loại dược liệu hỗ trợ điều trị trầm cảm chống oxi hóa thần kinh trung ương (Hossen et al., 2021) Trong nấm vân chi có chứa hợp chất polysaccharides liên kết với protein, gồm hai loại chính: PSP (polysaccharide peptide) PSK (polysaccharide krestin) PSK tách chiết lần Nhật Bản vào cuối thập kỷ 60, PSP phân lập Trung Quốc vào năm 1983 Tác dụng chung PSP PSK hoạt hóa, tăng cường sản sinh bảo vệ tế bào hệ miễn dịch (Li et al., 2011), kháng u (Standish et al., 2008) kháng vi rút (Teplyakova et al., 2012) PSP phân lập từ nấm vân chi chứng minh có khả chống lại ung thư (Fisher et al., 2002) Trong Y học cổ truyền Trung Quốc, nấm vân chi sử dụng giảm đờm, chữa bệnh rối loạn phổi, tăng cường thể lực, tăng lượng, có ích với bệnh mãn tính Các bác sĩ Trung Quốc xem loại thuốc hữu hiệu điều trị nhiễm trùng, viêm đường hô hấp, tiết niệu đường ruột Ở Nhật Bản, PSP chiết xuất từ nấm vân chi chứng minh có khả kéo dài thời gian sống thêm năm năm cho bệnh nhân ung thư thuộc nhiều loại: ung thư dày, ung thư đại tràng, ung thư vòm họng, ung thư phổi… (Moon et al., 2009) Hiện nay, nghiên cứu chất nuôi trồng nấm vân chi nhà khoa học quan tâm nghiên cứu Ở miền Trung, nấm vân chi chưa nuôi trồng phổ biến, nguyên liệu trồng nấm miền Trung chủ yếu nguồn chất truyền thống mùn cưa cao su, nguồn nguyên liệu tập trung Tây Nguyên phía Nam, dẫn đến tốn chi phí vận chuyển khan nguồn nguyên liệu Tuy nhiên, Việt Nam keo tràm phân bố trồng nhiều tỉnh từ Bắc Trung Bộ Nam Trung Bộ Tây Nguyên Đặc tính keo tràm loại sinh trưởng nhanh thích nghi rộng ế nên, keo tràm tạo giá trị kinh tế cao phủ Việt Nam trọng sách phát triển trồng rừng keo tràm để phủ xanh đất trống đồi trọc, để cải tạo đất sản xuất lâm nghiệp làm nguyên liệu cho ngành chế biến gỗ nguyên liệu làm giấy Tuy nhiên, gỗ keo, cành, có tiềm việc ứng dụng làm chất nuôi trồng nấm ăn nấm dược liệu Vì vậy, mở rộng hướng ứng dụng keo tràm tiến tới ổn định nguồn nguyên liệu trồng nấm Đà Nẵng nói riêng miền Trung nói chung vấn đề cần thiết Trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng 83 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 05(126)/2021 Nghiên cứu thực nhằm tận dụng nguyên liệu chỗ, thay thế, đa dạng nguồn chất hồn thiện quy trình trồng nấm vân chi gỗ keo tràm xử lí dạng khúc đạt suất chất lượng Đà Nẵng II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Chủng giống gốc nấm vân chi cung cấp Trung tâm Ứng dụng Khoa học Công nghệ tỉnh Lâm Đồng Sau đó, nhân giống phịng thí nghiệm Công nghệ Sinh học nấm, khoa Sinh - Môi trường, Đại học Sư phạm Đà Nẵng 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm Nhằm so sánh hiệu việc trồng nấm vân chi chất so với chất mùn cưa cao su truyền thống, thí nghiệm bố trí theo cơng thức theo bảng Bảng Bố trí thí nghiệm Ký hiệu nghiệm thức ành phần tỷ lệ phối trộn CT1 (Đối chứng) Mùn cưa cao su + 2% cám gạo + 2% bột ngô + 0,5% bột nhẹ + 0,5% đường CT2 Mùn cưa cao su: Mùn cưa gỗ keo tràm (1 : 1) + 2% cám gạo + 2% bột ngô + 0,5% bột nhẹ + 0,5% đường CT3 Mùn cưa gỗ keo tràm + 2% cám gạo + 2% bột ngô + 0,5% bột nhẹ + 0,5% đường CT4 Que (khúc) gỗ keo tràm + 2% cám gạo + 2% bột ngô + 0,5% bột nhẹ + 0,5% đường 2.2.2 Phương pháp xử lý nguyên liệu - Xử lý gỗ khúc keo tràm: xử lý thân gỗ keo tràm thành khúc có chiều dài từ 12 - 15 cm, đường kính - cm Gỗ keo tràm sau chẻ thành khúc nhỏ tiến hành ngâm với nước vôi với tỷ lệ - 1,5%; sau - ngày, vớt gỗ để nước Tiến hành phối trộn với chất phụ gia, đóng vào túi nilong có kích thước khoảng 17 × 35 cm bịch nguyên liệu có khối lượng 1,1 kg Khử trùng nồi hấp áp lực 12 h Sau hấp bịch để nguội ngày cấy giống với lượng vào bịch (20 g) - Xử lý mùn cưa cao su: Tạo ẩm mùn cưa nước vôi 1%, độ ẩm đạt 60 - 75%, sau ủ đống khoảng - ngày Mùn cưa sau xử lý phối trộn với chất phụ gia đóng vào túi nilon có kích thước khoảng 17 × 35 cm bịch nguyên liệu có khối lượng 1,1 kg Khử trùng nồi hấp áp lực 12 h Sau hấp để bịch nguội cấy giống với lượng vào bịch (20 g) - eo dõi sinh trưởng phát triển nấm Vân chi điều kiện nhau: nhiệt độ cho sinh trưởng hệ sợi 26 - 30oC, nhiệt độ sinh trưởng thể 20 - 25oC, độ ẩm khơng khí lúc ươm sợi từ 65 - 70%, độ ẩm thể 80 - 95% 2.2.3 Phương pháp đánh giá sinh trưởng, phát triển, suất, hình thái nấm vân chi Sau cấy giống nấm vào bịch chất hấp khử trùng tiến hành theo dõi tiêu sinh trưởng 84 - ời gian hoàn thành pha sợi: Tính từ cấy giống đến hệ sợi phủ kín bịch nguyên liệu (ngày) - ời gian xuất mầm thể: Tính từ cấy giống đến xuất thể (ngày) - Hiệu suất sinh học nấm vân chi tính theo cơng thức sau đây: Khối lượng nấm tươi ˟ 100 Khối lượng nguyên liệu - Phương pháp đánh giá tỷ lệ nhiễm bệnh: Số bịch phôi bị nhiễm bệnh ˟ 100 Tổng số bịch phôi cấy giống - eo dõi yếu tố cấu thành suất nấm vân chi: Khối lượng thể (gram/quả thể), kích thước dọc mũ nấm (cm), kích thước ngang mũ nấm (cm) 2.2.4 Phương pháp đánh giá hoạt tính kháng oxi hóa Hoạt động loại bỏ gốc tự xác định phương pháp khử màu ABTS.+ (Nikolaos et al., 2004) Dung dịch ABTS.+ chuẩn bị cách cho mL dung dịch ABTS mM mL dung dịch K2S2O8 2,45 mM Ủ dung dịch bóng tối 16h, sau pha loãng ethanol (khoảng 50 lần), điều chỉnh độ hấp thụ dung dịch bước sóng 734 nm có mật độ quang 0,7 ± 0,05 Tiến hành khảo sát hoạt động trung hòa gốc tự ABTS.+ cách cho 990 μL dung dịch ABTS.+ vào 10 μL cao chiết PS nấm Vân chi nồng độ 500 μg/mL Hỗn hợp phản ứng ủ thời gian phút Sau đó, đo độ hấp thụ quang phổ bước sóng 734 nm (Nikolaos et al., 2004) Chất đối chứng dương sử dụng Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 05(126)/2021 vitamin C Hiệu suất phần trăm ức chế (I%) tính theo cơng thức I% = [(A0 – Ai)/A0] ˟ 100 Trong đó: A0 giá trị mật độ quang mẫu trắng Ai giá trị mật độ quang mẫu thử 2.2.7 Phương pháp xử lý số liệu Tất thí nghiệm thực lặp lại lần Các số liệu phân tích thống kê phần mềm Microso Excel 2010 phần mềm SPSS 20 (Statistical Package for the Social Sciences) 2.2.5 Phương pháp định lượng Polysaccharide triterpens tổng số Mẫu nấm vân chi trồng chất mùn cưa cao su (CT1) chất gỗ khúc keo (CT4) gửi mẫu phân tích hàm lượng polysaccharide triterpens tổng số viện Dược liệu - Bộ Y tế 2.3 ời gian địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực từ 04/2020 đến 03/2021 Bộ môn Công nghệ Sinh học, Khoa Sinh - Môi trường, trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng 2.2.6 Phương pháp xác định kim loại nặng Hàm lượng Cadimi xác định dựa TCVN 7603:2007 - Xác định hàm lượng Cadimi phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Hàm lượng chì xác định theo TCVN 7602:2007 - Xác định hàm lượng chì phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử 3.1 Đánh giá sinh trưởng, suất nấm vân chi nguyên liệu khác ời gian sinh trưởng hệ sợi nấm quan trọng, có tính chất định đến phát triển thể suất nấm vân chi Kết theo dõi sinh trưởng, phát triển nấm vân chi cơng thức thí nghiệm thể bảng III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Bảng Ảnh hưởng nguyên liệu nuôi trồng đến thời gian sinh trưởng, phát triển suất nấm vân chi Công thức CT1 (ĐC) CT2 CT3 CT4 ời gian hoàn thành pha sợi (ngày) 35,2 ± 0,37a 33,6 ± 0,42b 30,01 ± 0,66c 18,5 ± 0,34d ời gian xuất thể (ngày) 56,8 ± 1,22a 54,3 ± 0,76b 54,8 ± 0,3b 36,33 ± 0,33c Hiệu suất sinh học (%) 4,89 ± 0,10a 4,08 ± 0,14b 4,15 ± 0,27b 5,76 ± 0,20c Tỷ lệ nhiễm bệnh (%) 5,780,58a 6,030,53a 6,150,25a Ghi chú: Các chữ khác bảng biểu thị khác biệt có ý nghĩa theo cột nghiệm thức khảo sát theo kiểm định Tukey độ tin cậy 95% Kết bảng cho thấy nấm vân chi trồng gỗ khúc keo tràm có thời gian sinh trưởng phát triển ngắn so với nấm trồng chất mùn cưa cao su mùn cưa gỗ tràm ời gian hoàn thành pha sợi, thời gian xuất thể, thời gian thu hoạch CT4 ngắn so với CT1 từ 17 - 20 ngày, điều cho thấy gỗ keo xử lý dạng khúc giúp rút ngắn thời gian sinh trưởng sợi nấm vân chi Việc sử dụng gỗ keo dạng que để trồng nấm giúp tăng suất lên 17% so với đối chứng, suất 4,89% 5,76% chất khúc gỗ keo mùn cưa cao su eo Nguyễn Việt Cường cộng tác viên (2008), hàm lượng cellulose, lignin gỗ keo tràm 76,7% gần tương đương vơi mùn cưa cao su 71,2% (Nguyễn Việt Cường ctv., 2008), điều cho thấy phương thức xử lý chất ảnh hưởng đáng kể đến thời gian sinh trưởng suất nấm vân chi Trồng nấm mùn cưa gỗ keo cho kết thấp nhất, điều lý giải độ mịn mùn cưa gỗ keo làm giảm độ thống khí nên ảnh hưởng đến suất nấm Kết phù hợp với nghiên cứu Trần Đức Tường cộng tác viên (2019), nhóm tác giả chứng minh công thức phối trộn chứa 50% cùi bắp 50% mùn cưa cao su không bổ sung dinh dưỡng xem chất phù hợp cho sinh trưởng, phát triển nấm vân chi đỏ đạt suất cao (Trần Đức Tường ctv., 2019) Điều cho thấy việc trồng nấm gỗ dạng khúc hay dạng que có khoảng trống giúp sợi nấm hô hấp dễ lan sợi nhanh, tiết enzyme ngoại bào phân giải chất nhanh so với dạng bột mạt cưa Kết mở triển vọng tận dụng phế phụ phẩm keo tràm cành vỏ địa phương để trồng nấm vân chi nhằm chủ động nguồn nguyên liệu chỗ tăng hiệu suất trồng nấm 85 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 05(126)/2021 Trong nuôi trồng nấm nói chung nấm dược liệu nói riêng tỷ lệ nhiễm bệnh đóng vai trị quan trọng ảnh hưởng đến suất Việc bịch nấm bị nhiễm sau cấy giống làm tổn thất nguyên liệu, công nuôi trồng xử lý bịch nhiễm Kết nghiên cứu cho thấy việc trồng nấm que gỗ tràm hoàn tồn khơng có bịch nhiễm qua lần thí nghiệm, tỷ lệ bịch nhiễm trồng CT1, CT2, CT3 từ 5,78 - 6,15% Chứng tỏ sợi nấm cấy chất gỗ khúc keo tràm thích hợp mặt dinh dưỡng trạng thái nguyên liệu làm cho sợi nấm dễ dàng sử dụng dinh dưỡng nên phát triển nhanh, mạnh chiếm ưu bịch nấm hạn chế xâm nhập bùng phát vi sinh vật gây bệnh Hình Quả thể nấm vân chi trồng nguyên liệu khác 3.2 Đánh giá kích thước khối lượng trung bình thể nấm vân chi nguyên liệu khác Kích thước thể nấm không ảnh hưởng đến suất nấm mà ảnh hưởng đến giá trị cảm quan thị hiếu người tiêu dùng Bên cạnh việc khảo sát đánh giá suất nấm việc đánh giá, so sánh hình thái nấm công thức nghiên cứu quan trọng để chọn lựa chất thích hợp việc ni trồng nấm hiệu Quả thể nấm vân chi trưởng thành sau thu hoạch tiến hành đo cân, đo kích thước sấy 55oC độ ẩm an tồn Kết nghiên cứu thể bảng Bảng Kích thước mũ nấm khối lượng trung bình thể nấm vân chi ni trồng ngun liệu khác Cơng thức CT1(ĐC) CT2 CT3 CT4 Kích thước ngang mũ nấm (cm) 3,61 ± 0,15a 3,38 ± 0,34a 3,58 ± 0,25a 4,12 ± 0,12b Kích thước dọc mũ nấm (cm) 9,31 ± 0,26a 9,28 ± 0,35a 9,02 ± 0,29a 9,42 ± 0,22a Khối lượng tươi (g/quả) Khối lượng khô (g/quả) Tỷ lệ khô/tươi (%) 12,7 ± 0,27a 11,02 ± 0,35b 11,14 ± 0,68b 14,6 ± 0,61c 10,8 ± 0,2 a 9,46 ± 0,3b 9,43 ± 0,5b 12,41 ± 0,5c 85,0 a 84,5 a 84,6 a 85,0 a Ghi chú: Các chữ a, b, c cột thể sai khác mức ý nghĩa p < 0,05 với giá trị giá trị trung bình ± SD (n = 3) Hình Hình thái thể nấm vân chi trồng nguyên liệu khác 86 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 05(126)/2021 Kết bảng cho thấy, thể nấm vân chi thu ngun liệu ni trồng khác có kích thước chiều dọc mũ giao động từ 9,02 đến 9,42 cm, kích thước ngang mũ nấm dao động từ 3,38 đến 4,12 cm Kích thước mũ thể nấm ni trồng CT4 lớn (4,12 ˟ 9,42 cm), CT1, CT2, CT3 cho thấy khơng có khác biệt có ý nghĩa kích thước mũ thể nấm Sự khác kích thước khơng làm ảnh hưởng đến tỷ lệ nấm khô tươi, điều cho thấy tích lũy chất khơ nấm thành phẩm cơng thức nghiên cứu tương đương Kích thước nấm vân chi nghiên cứu thấp so với kết nghiên cứu Vũ Tuấn Minh cộng tác viên (2017), tỷ lệ khô/tươi thể nấm cao Kết cho thấy, khơng có khác biệt hình thái kích thước thể nấm vân chi nuôi trồng công thức khác nhau; có khác biệt khối lượng trung bình thể, đặc biệt ni trồng gỗ khúc keo tràm khối lượng trung bình thể tươi (14,6 g/quả thể) vượt trội so với công thức nghiên cứu 3.3 Kết đánh giá khả kháng oxi hóa nấm vân chi Hoạt tính bắt gốc ABTS.+ tự khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa hiệu quả, nhanh chóng đơn giản Kết khảo sát hiệu bắt gốc tự dịch chiết nấm vân chi nghiệm thức thể hình Hình Hiệu suất bắt gốc tự dịch chiết nấm vân chi từ nghiệm thức Từ kết hình cho thấy dịch chiết nấm vân chi nuôi trồng công thức nghiên cứu có khả bắt gốc tự ABTS.+ Trong nấm vân chi trồng gỗ keo có hoạt tính kháng oxi hóa cao (83,66%), nhiên thấp so với vitamin C (89,47%) Kết nghiên cứu cao so với nghiên cứu Kamiyama (2013) hoạt động chống oxy hóa chống viêm thành phần hóa học cao chiết nấm vân chi Trong số chiết xuất thu được, chiết xuất acetone thể hoạt tính chống oxy hóa cao (50,9%), chiết xuất từ methanol (33,9%), n-hexane (29,5%) chloroform (15,2%) nồng độ 500μg/mL (Kamiyama, 2013) Như vậy, cao chiết thể nấm vân chi trồng chất gỗ khúc keo tràm có hoạt tính chống oxi hóa, chứng tỏ mẫu có chứa hợp chất có khả nhường hydrogen chuyển electron cho gốc tự cách trực tiếp, tạo thành sản phẩm ổn định hơn, có khả kết thúc phản ứng chuỗi điện tử tự Hoạt tính sở để đánh giá dược tính nấm cho thêm sở khoa học để phát triển nuôi trồng nấm chất gỗ keo phụ phẩm keo 3.4 Phân tích hàm lượng polysaccharide triterpens tổng số thể nấm vân chi Nấm vân chi trồng chất gỗ khúc keo tràm có suất cao rút ngắn thời gian nuôi trồng so với đối chứng CT2, CT3 Tuy nhiên, để đánh giá toàn diện hiệu trồng nấm dược liệu việc phân tích chất lượng nấm yếu tố định hiệu cách thức nuôi trồng Vì vậy, thể nấm vân chi trồng CT4 lấy mẫu gửi phân tích hàm lượng polysaccharide triterpens tổng số so với đối chứng viện Dược liệu Kết thu trình bày bảng Kết bảng cho thấy hàm lượng polysaccharide triterpens tổng số nấm vân chi trồng gỗ khúc keo tràm cao so với đối chứng Điều cho thấy gỗ khúc keo tràm chất hồn tồn thích hợp cho tăng suất chất lượng nấm vân chi Hàm lượng polysaccharide nấm vân chi trồng CT1 CT4 3,170,03% 3,330,04% Kết thấp nghiên cứu Zheng cộng tác viên (2014) (7,490,14%), khác giống nấm nuôi trồng điều kiện sinh thái khác 87 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 05(126)/2021 Bảng Hàm lượng polysaccharide triterpens tổng số thể nấm Vân chi Công thức CT1 CT4 Polysaccharide (%) 3,170,03a 3,330,04b Triterpens (mg/g) 0,0110,0003a 0,0170,0001b Ghi chú: Các chữ a, b cột thể sai khác mức ý nghĩa p < 0,05 với giá trị giá trị trung bình ± SD (n = 3) Triterpens nhóm chất đa dạng, chúng phân bố rộng rãi nhiều loài động vật, thực vật khác Triterpens có tác dụng sinh học giảm nguy ung thư, giảm cholesterol, giúp máu lưu thông tốt, làm giảm huyết áp, dung lâu dài coi chất kháng sinh tự nhiên, chống oxy hóa Hàm lượng triterpens nấm vân chi nghiên cứu không cao (0,0170,0001 mg/g) đủ sở khoa học để khẳng định nấm vân chi có nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học Kết phù hợp với kết nghiên cứu Leliebre-Lara cộng tác viên (2015), thể nấm vân chi chiết dung môi ethanol cho thấy diện hợp chất thứ cấp triterpenes, steroid, avonoid, alkaloid lượng nhỏ cardenolide (LeliebreLara, et al., 2015) 3.5 Kết đánh giá hàm lượng kim loại nặng thể nấm vân chi Nấm xem sinh vật có khả hấp thụ kim loại nặng, việc sử dụng chất ni trồng nấm có nhiễm kim loại nặng nguyên nhân làm cho nấm hấp thụ tích lũy kim loại nặng thể, dẫn đến số loại nấm ăn nấm dược liệu ni trồng thường có hàm lượng kim loại nặng vượt giới hạn cho phép Trong nghiên cứu này, việc đánh giá sinh trưởng, phát triển, chất lượng nấm vân chi trồng chất gỗ khúc keo tràm mùn cưa cao su, chúng tơi cịn tiến hành phân tích hàm lượng kim loại nặng mà cụ thể chì (Pb) cadimi (Cd), kết phân tích thể bảng Bảng Kết phân tích kim loại nặng nấm vân chi Mẫu CT1 CT4 QCVN (mg/kg) Cd (mg/kg) 0,0430,002 0,0520,003 0,2 Pb (mg/kg) 0,0130,001 0,0110,002 0,3 Kết bảng cho thấy hàm lượng Pb mẫu nấm trồng gỗ keo thấp mẫu trồng chất mùn cưa cao su, ngược lại hàm lượng 88 Cd mẫu nấm trồng chất mùn cưa cao su thấp chất gỗ keo Tuy nhiên, theo QCVN 8-2:2011/BYT giới hạn ô nhiễm kim loại nặng thực phẩm kết hai mẫu nấm vân chi trồng mùn cưa gỗ keo có hàm lượng cadimi chì nằm giới hạn cho phép Như vậy, việc sử dụng loại chất gỗ keo trồng nấm để thu hoạch thể cho thấy hàm lượng kim loại nặng phân tích mẫu nấm vân chi không vượt giới hạn cho phép Trong tương lai việc sử dụng gỗ keo với phương pháp xử lý khác giúp giảm thời gian nuôi trồng, tăng suất đồng thời đạt tiêu chuẩn tích lũy kim loại nặng nấm xu hướng có triển vọng nhằm giảm phụ thuộc vào nguồn nguyên liệu mùn cưa cao su IV KẾT LUẬN Nấm vân chi trồng gỗ keo tràm xử lý dạng que khúc có khả sinh trưởng, phát triển suất, chất lượng thể nấm tốt trồng chất mùn cưa cao su truyền thống mùn cưa gỗ tràm: Trồng nấm vân chi gỗ khúc keo tràm rút ngắn 20 ngày/chu kì ni trồng so với trồng mùn cưa cao su truyền thống; Năng suất tăng 17% trồng nấm vân chi gỗ khúc keo tràm so với trồng chất mùn cưa cao su truyền thống; hiệu suất bắt gốc tự ABTS.+ dịch chiết nấm vân chi trồng gỗ keo với nồng độ 500 μg/mL đạt 83,66%; Hàm lượng polysaccharide triterpens tổng số thể nấm vân chi trồng gỗ khúc keo tràm cao so với đối chứng, 3,330,04% 0,0170,0001 mg/g Nấm vân chi trồng gỗ khúc keo tràm có hàm lượng kim loại nặng Pb, Cd giới hạn cho phép so với QCVN 8-2:2011/BYT giới hạn ô nhiễm kim loại nặng thực phẩm LỜI CẢM ƠN Xin chân thành cảm ơn sở Khoa học Công nghệ thành phố Đà Nẵng tài trợ cho nghiên cứu TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Việt Cường, Phạm Đức Tuấn, Nguyễn Xuân Quát, 2008 Cây tràm Việt Nam từ nghiên cứu đến sản xuất - Sinh thái - công dụng - chọn giống - lai tạo giống kỹ thuật gây trồng NXB Nông nghiệp Vũ Tuấn Minh, Lê ị u Hường, 2017 Nghiên cứu sinh trưởng, phát triển suất nấm vân chi (Trametes Versicolor (L.) Pilat) Trồng loại giá Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 05(126)/2021 thể ừa iên Huế Tạp chí Khoa học Cơng nghệ nơng nghiệp, ISSN: 2588-1256: 77-86 QCVN 8-2:2011/BYT - Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia giới hạn ô nhiễm kim loại nặng thực phẩm TCVN 7603:2007 - Xác định hàm lượng Cadimi phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử TCVN 7602:2007 - Xác định hàm lượng chì phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Trần Đức Tường, Võ ị u Duyên, Dương Xuân Chữ, Bùi ị Minh Diệu, 2019 Hiệu thay mùn cưa cao su vỏ tràm nuôi trồng nấm Vân chi đỏ (Pycnoporus sanguineus (L.: FR.) MURRILL) Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần ơ, tập 55, số chuyên đề Công nghệ sinh học (2): 74-80 Fisher, M., Yang, L.X., 2002 Anticancer e ects and mechanisms of polysaccharide-K (PSK): implications of cancer immunotherapy Anticancer Res 22: 1737-1754 Li, F., Wen, H., Zhang, Y., Aa, M., Liu, X., 2011 Puri cation and characterization of a novel immunomodulatory protein from the medicinal mushroom Trametes versicolor Sci China Life Sci 54: 379-85 Hayakawa K., Mitsuhashi N., Saito Y., Nakayama Y., Furuta M., Nakamoto S., Kawashima M., and Niibe H, 1997 E ect of Krestin as adjuvant treatment following radical radiotherapy in nonsmall cell lung cancer patients Cancer Detection and Prevention 21(1): 71-7, January-February Kamiyama, M., 2013 Antioxidant/Anti-In ammatory Activities and Chemical Composition of Extracts from the Mushroom Trametes Versicolor International Journal of Nutrition and Food Sciences, 2(2): 85 pp Moon, J.K., Shibamoto, T., 2009 Antioxidant assays for plant and food components J Agric Food Chem 57: 1655-1666 Hossen, S.M.M., Akramul, M., Tanim, H., Hossain, M.S., Sami, S.A., & Emon, N.U., 2021 Deciphering the CNS anti-depressant, antioxidant and cytotoxic pro ling of methanol and aqueous extracts of Trametes versicolor and molecular interactions of its phenolic compounds Saudi Journal of Biological Sciences, https://doi.org/10.1016/j.sjbs.2021.07.016 Nikolaos, Wang, L.F., Tsimidou, M., & Zhang, H.Y., 2004 Estimation of scavenging activity of phenolic compounds using the ABTS.+ assay Journal of Agricultural and Food Chemistry, 52(15): 4669-4674 Standish, L.J., Wenner, C.A., Sweet, E.S., Bridge, C., Nelson, A., Martzen, M., Novack, J., Torkelson, C., 2008 Trametes versicolor mushroom immune therapy in breast cancer J Soc Integr Oncol 6: 122-128 Teplyakova, T.V., Psurtseva, N.V., Kosogova, T.A., Mazurkova, N.A., Khanin, V.A., Vlasenko, V.A., 2012 Antiviral activity of polyporoid mushrooms (higher Basidiomycetes) from Altai Mountains (Russia) Intern J Med Mushrooms 14: 37-45 Leliebre-Lara V., M García, C Nogueiras, L Monzote, 2015 Qualitative analysis of an ethanolic extract from Trametes versicolor and biological screening against Leishmania amazonensis Emirates Journal of Food and Agriculture, 27(7): 592-595 Zheng, Y., Li, Y., & Wang, W.D., 2014 Optimization of ultrasonic-assisted extraction and in vitro antioxidant activities of polysaccharides from Trametes orientalis Carbohydrate Polymers, 111: 315-323 Study on mycelial growth, yield and quality of Trametes versicolor cultivated on wood logs of Acacia auriculiformis in Da Nang city Nguyen i Bich Hang, Pham i My, Tran Ngoc Son Abstract e study was conducted to investigate the e ect of substracts on mycelia growth, yield and quality of Trametes versicolor e experiment was conducted with di erent treatments, replications and arranged in a completely randomized block design e results showed that T versicolor cultivation on wood logs of Acacia auriculiformis mixed with additives, including 2% rice bran + 2% corn our + 0.5% light our + 0.5% sugar reduced growth time by 17 - 20 days compared to on rubber sawdust with the obtained yield of 4.8% e height of fungal fruit reached about 9.42 cm while the diameter reached 4.12 m e extract from ethanol of fruiting body was examined for antioxidant with the e ciency of 83.66% at the concentration of 500 μg/mL e total polysaccharide and triterpens content in T versicolor grown on wood logs of Acacia auriculiformis was 3.330.04%; 0.0170.0001 mg/g, respectively e Cd and Pb metal concentration of Trametes versicolor cultivated on the acacia wood logs were 0.052 mg/kg and 0.031 mg/kg, respectively which meet the standards of the National technical regulation on the limits of heavy metals contamination in food QCVN 8-2: 2011/BYT Keywords: Trametes versicolor, Acacia auriculiformis, wood logs, growth, yield Ngày nhận bài: 22/4/2021 Ngày phản biện: 20/5/2021 Người phản biện: TS Nguyễn Ngày duyệt đăng: 04/6/2021 ị Bích ùy 89 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 05(126)/2021 PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ ĐỊNH DANH VI KHUẨN HÒA TAN LÂN, CỐ ĐỊNH ĐẠM VÀ TỔNG HỢP IAA VÙNG RỄ CÂY ĐINH LĂNG (Polyscias fruticosa) Nguyễn Quốc Khương1, Trần Ngọc Hữu 1, Lê Vĩnh úc1, Lê ị Mỹ u1, Nguyễn Hồng Huế1, Trần Chí Nhân2, Phạm Duy Tiễn2, Lý Ngọc anh Xn2 TĨM TẮT Mục tiêu nghiên cứu xác định vi khuẩn có khả hịa tan lân, cố định đạm tổng hợp IAA vùng rễ đinh lăng Mười ba mẫu đất vùng rễ đinh lăng thu thập huyện Tri Tôn, tỉnh An Giang sử dụng để phân lập vi khuẩn hịa tan lân mơi trường NBRIP Kết nghiên cứu xác định 30 dịng vi khuẩn hịa tan lân, 15 dịng có khả chịu đựng mơi trường chua dịng vi khuẩn ký hiệu AC10L2 có hoạt tính hịa tan lân cao nhất, đạt hàm lượng lân tan 20,5 mg P L-1 Dịng vi khuẩn AC10L2 có khả cố định đạm tổng hợp IAA, với hàm lượng 63,2 mg P L-1 0,81 mg IAA L-1 Dòng vi khuẩn AC10L2 định danh Bacillus subtilis kỹ thuật 16S rDNA Từ khóa: Đinh lăng (Polyscias fruticosa L Harms), vi khuẩn cố định đạm, vi khuẩn hòa tan lân, vi khuẩn tổng hợp IAA, Bacillus subtilis I ĐẶT VẤN ĐỀ Đinh lăng lồi thuộc họ Araliaceae, có nguồn gốc từ Ấn Độ Cây phát triển tốt nhiệt độ từ 19 - 29°C nhạy cảm với nhiệt độ cao (Pandya et al., 2020) eo Nguyen cộng tác viên (2020), đinh lăng thảo dược có tác dụng y học, đặc biệt chống oxy hóa, chống viêm hạ sốt Lân (P) đóng vai trị quan trọng trình sinh trưởng phát triển trồng Tuy nhiên, nhiều loại đất xác định nghèo P hữu dụng cho trồng bị cố định sắt, nhôm canxi để tạo thành hợp chất không tan trồng hấp thu (Weil and Brady, 2017), P tổng số cao (Nussaume et al., 2011) Lân tham gia vào số chức trồng quang hợp, hô hấp, tổng hợp acid nucleic, tạo lượng, phần thiếu phosphoprotein phospholipid (Cordell et al., 2011) Đạm (N) bổ sung từ nhiều nguồn khác khống hóa, cố định khí N2 phân bón (Zhang et al., 2017) Tuy nhiên, sau thời gian dài bón phân hóa học, tình trạng thối hóa nhiễm đất ngày trầm trọng (Gurdeep and Reddy, 2015), đồng thời gia tăng phát thải khí nhà kính gây nhiễm mơi trường (Nguyễn Quốc Khương, Ngơ Ngọc Hưng, 2014) Indole-3acetic acid (IAA), đóng vai trò quan trọng việc điều hòa sinh trưởng trồng (Jin et al., 2021) Wei cộng tác viên (2018) cho biết, vi sinh vật đất góp phần gia tăng lượng lân hữu dụng đất cho trồng Ngồi ra, vi khuẩn đóng vai trị cung cấp đạm cho trồng (Nguyễn Quốc Khương ctv., 2019) Nghiên cứu Singh cộng tác viên (2016) cho biết, vi khuẩn vùng rễ sử dụng để tăng cường sinh trưởng, phát triển trồng Mục tiêu nghiên cứu tuyển chọn vi khuẩn vùng rễ đinh lăng có khả hòa tan lân, cố định đạm tổng hợp IAA II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Mẫu đất cho phân lập vi khuẩn thu ba xã thuộc huyện Tri Tôn, tỉnh An Giang Môi trường NBRIP (g/L) gồm: 10 g glucose, g Ca3(PO4), 2,5 g MgCl2–6H2O, 0,25 g MgSO4–7H2O, 0,2 g KCl, 0,1 g (NH4)2SO4, sử dụng để phân lập vi khuẩn vùng rễ Môi trường Burk’s (g/L) gồm: 10 sucrose, 0,41 KH2PO4, 0,52 KH2PO4, 0,05 Na2SO4, 0,2 CaCl2, 0, M gS O – 7H O, 0, 005 Fe S O – 7H O, 0,0025 Na2MoO4–2H2O 20 agar, sử dụng để ni dịng vi khuẩn đánh giá khả cố định đạm 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 u thập phân tích mẫu đất Mười ba mẫu đất vùng rễ thu vị trí xung quanh gốc đinh lăng 02 năm tuổi, với khối lượng 500 g/mẫu, tư liệu hóa, trữ lạnh phân tích tiêu pHH2O, pH KCl, lân tổng số, lân dễ tiêu theo phương pháp mô tả Sparks cộng tác viên (1996) phòng thí nghiệm Bộ mơn Khoa học trồng, Khoa Nông nghiệp, Trường Đại học Cần Trường Đại học An Giang; Trường Đại học Quốc gia thành phố Hồ Chí Minh 90 ... số nấm vân chi trồng gỗ khúc keo tràm cao so với đối chứng Điều cho thấy gỗ khúc keo tràm chất hồn tồn thích hợp cho tăng suất chất lượng nấm vân chi Hàm lượng polysaccharide nấm vân chi trồng. .. tính nấm cho thêm sở khoa học để phát triển nuôi trồng nấm chất gỗ keo phụ phẩm keo 3.4 Phân tích hàm lượng polysaccharide triterpens tổng số thể nấm vân chi Nấm vân chi trồng chất gỗ khúc keo tràm. .. 17% trồng nấm vân chi gỗ khúc keo tràm so với trồng chất mùn cưa cao su truyền thống; hiệu suất bắt gốc tự ABTS.+ dịch chi? ??t nấm vân chi trồng gỗ keo với nồng độ 500 μg/mL đạt 83,66%; Hàm lượng